染色昆虫行为检测:麻醉的交配行为果蝇

该程序的总体目标是以非侵入性方式使昆虫明显区分彼此，以便在行为实验中识别它们。这是通过首先在标准果蝇小瓶中用几滴食用色素对正常果蝇食物的表面进行可见染色来实现的。接下来，将果蝇加入小瓶中三个小时，此时果蝇的腹部应表现出强烈的颜色。

例如，可以进行交配实验，以观察雌性是否发现染成特定颜色的雄性更有吸引力。归根结底，这种染料技术是一种快速、简单且非侵入性的昆虫标记方法，便于实验鉴定。与现有方法（例如去除苍蝇的一部分翅膀）相比，使用这种技术的主要优点是它更快、侵入性更小，并且不太可能影响后续行为。

这种方法在各种实验中都很有用，在这些实验中，识别果蝇的个体或类别非常重要。它也很容易用于学校或大学的简单实验。演示这种技术的将是利物浦大学的博士生 Rudy Verse Bo 和 Chloe Hayes。食物被调用并凝固后，首先在食物顶部添加 0.5 到 1 毫升蓝色食用色素，将染料涂抹在小瓶的整个表面。

然后将食物在 4 摄氏度下存放两天，让食物的顶层吸收。接下来，根据实验的需要将苍蝇转移到食物上。在一天之内，可以很容易地将蝇蝇与未染色的苍蝇区分开来，以便与染色的苍蝇进行交配试验。

使用抽吸器将个体处女雄性转移到装有 20 毫升食物的标准 75 x 20 毫米塑料瓶中。如果进行两只雄配试验，将每个处理组中的一半雄性放入装有彩色食物的小瓶中。接下来，将新出现的雌性以 10 人为一组转移到新鲜食品瓶中。

现在让两性在适合该物种的温度下成熟到交配年龄。当果蝇准备好时，将实验雄性暴露于所需的治疗中。例如，其他果蝇正在用二氧化碳麻醉并标记小瓶，以确定试验前一天果蝇的处理和颜色状态。

将雌性移入装有 20 毫升食物的单个小瓶中，以使果蝇适应交配的小瓶，并用中性标签标记小瓶以致盲实验。然后将一两只雄性果蝇添加到每个装有一只雌性果蝇的交配小瓶中。视情况而定。

开始交配试验，以配合培养箱中的灯亮起，进行两次雄配试验。注意每只雄性来自不同的治疗方法，并且一只果蝇出现腹部染色。记录每只雄蝇的处理和着色。

如果交配发生在两小时内，则记录交配的雄性骰子状态以进行单雄配试验。记录配接开始和停止的时间。然后计算试验的嵌合成功、延迟和持续时间数据。

找到的最佳模型可以解释二氧化碳效应的变化。麻醉包含物种作为一个因素。例如，在这些代表性实验中，二氧化碳麻醉对果蝇的交配成功没有显着影响。

在果蝇黑腹果蝇的两项雄性试验中，伪隐蔽果蝇和果蝇亚隐蔽果蝇，然而，观察到暴露于二氧化碳麻醉的雄配成功率显着降低，当果蝇在收集时或试验前一天暴露于气体时，效果甚至更大。在三个物种中，食物色果蝇的交配没有观察到显着差异，在分析中包括处理或在单次交配试验中对昆虫的交配状态也没有观察到显着差异。交配没有差异。

当使用二氧化碳麻醉收集最近出现的成虫时，观察到三种物种中的任何一种的潜伏期。只有果蝇亚不明蝇在交配试验前两天暴露于二氧化碳时表现出对交配时间的影响。看完这个视频后，您应该对如何在实验中使用肠道染色作为一种非侵入性技术来标记果蝇有一个很好的了解。

在尝试此程序时，重要的是要测试目标染料对焦点物种的任何影响。有些染料可能有毒，有些颜色会直接影响交配成功。例如，红色食用色素在某些物种中可能更受欢迎。

在这里，我们使用这种染料技术来区分竞争配试验中的果蝇。然而，它也可以用于需要单独识别果蝇的各种其他实验，例如评估攻击性、领土防御、食物偏好活动或社会行为的分析。