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DOI: 10.3791/52700-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
该视频介绍了在无创条件下使用特定的局灶性癫痫临床前模型对镇静大鼠进行高分辨率脑电图的准备、记录和来源分析程序。
该程序的总体目标是使用从局灶性癫痫大鼠获得的高分辨率脑电图记录进行脑源分析。这是通过首先将 EEG 迷你帽放入含 0.2% 氯化物的蒸馏水中过夜,然后在第二天用混合导电膏填充每个电极以改善电极阻抗来实现的。第二步是在镇静大鼠上设置 EEG 迷你帽并记录高分辨率 EEG 数据。
接下来,使用基于阈值的方法和小波分解方法对记录的脑电信号进行预处理,以获得不同类型发作间期癫痫样的平均信号。最后一步是生成大鼠的头部体积导体模型,其电极位置基于单个或概率 MRI。最终,计算 ES Loretta 逆解以显示预计与致癫痫脑区相关的估计脑源。
临床前 RAM 模型对于通过电生理技术研究表观发生非常有用。尽管过去曾使用侵入性电生理记录来研究癫痫大鼠,但没有可用的技术可以在没有针头麻醉的情况下对这只大鼠进行全脑源成像。在这项研究中,我们提出了一个完整的方法来实现这一目标。
在本视频中,我将向您展示如何准备和设置 EEG mini。我将负责准备 RU 录制的所有程序。在 G 录制期间,我将作 G 录制设备和软件。
此外,我将展示如何根据记录的数据执行脑源分析。要开始此过程,请将 EEG 电极糊与 0.9% NACL 溶液混合。添加一滴亚甲蓝,以帮助观察电极内部和皮肤上的电极糊。
接下来,将混合糊状物放入注射器中,确保其中没有气泡。然后从底部用糊状物填充所有 32 个电极,作为大鼠制备程序的一部分,不引入任何气泡,然后修剪大鼠的头部,将异氟降低到 2%然后将大鼠放在立体定位装置中的加热垫上。用耳杆固定耳道并固定鼻锥以供应麻醉剂。
接下来,将眼药膏涂抹在动物的眼睛上。随后剃光它的头,用 90% 异丙醇摩擦皮肤,刺激血管并去除油脂。然后将生理盐水棉签放在头皮上并完全覆盖,以保持良好的皮肤电导,直到准备好放置 EEG 迷你帽。
将呼吸温度和三个导联心电图探头连接到大鼠的身体,以在记录过程中持续监测其生理机能。在此过程中,取出大鼠头皮上的盐水拭子,并将准备好的 EEG 迷你帽放在其皮肤上。用橡皮筋固定迷你帽。
在接地电极和参比电极上涂上一层高电导电极糊。随后,将它们放在相应的耳朵上。然后将 EEG 迷你帽连接到放大器。
查看 EEG 轨迹的预览并检查所有电极的性能。然后以每公斤 0.25 毫克/公斤的剂量给予大鼠腹膜内 Dexter,并立即将氟的 isof 率降低至 0%如果呼吸率不在 30 至 60 BPM 范围内,则以最大 1% 的幅度轻轻增加氟的 isof 氟率现在开始脑电图记录并验证脑电图轨迹中是否存在阵发性活动。记录后,将彩色笔插入 EEG 迷你帽的三个突出圆圈的位置,标记它们位于皮肤顶部。
在取下 EEG 迷你帽之前,请拍一张带有地标的大鼠头照片。进行 IED 检测和分类 使用 matlab 中自主开发的代码,将每种 IED 亚型的平均脑电信号用于脑源分析。在下面的过程中,开源软件头脑风暴将与伍斯特大鼠的 MRI 图谱一起使用,将 MRI 和脑表面输入到软件中,以默认设置生成头面。
然后根据 MRI 生成头皮和内外颅骨表面 对于铅场计算,使用可视化选项检查每个表面相对于 MRI 的方向和位置,使用获取的大鼠头部图片共同注册 MRI 中三个标志的位置和地标的网格点。作为参考,当电极固定在脚手架上时,生成电极位置。然后输入生成的通道文件到 brainstorm 软件显示,并确认所有电极的位置以计算铅场矩阵。
输入电导率值,该值满足皮肤、头骨和大脑的比率。根据体积导体模型和创建的电极位置获取铅场矩阵。之后,通过选择源估计方法选项(例如 S Loretta)输入 IED 子类型的平均 EEG 信号。
逆解将根据计算出的导程场矩阵和末端图的输入 EEG 信号获得。此处显示的估计来源是 IED 的大脑源位置相对于尖峰和尖锐波中不同集群的时间序列。评估在标有红色垂直线的特定时间进行。
这是 EEG 地形图,这是皮质电流来源。该图显示了癫痫发作期间估计的大脑来源,实例的时间标记为红色垂直线。看完这个视频,你应该对如何准备简易迷你帽来记录高转速脑电图,以及对大鼠进行脑源分析有一个很好的了解。
我们在这里介绍的方法被应用于临床模型,以了解潜在表观发生的机制。
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