"以病人为像"肝癌原位同源小鼠模型的癌转移

癌症的转移扩散是癌症相关死亡的主要原因。我们提供了一个深入的描述，我们赖以生存的手术方法，为建立"以病人为像"原位同基因小鼠模型系统研究的实质器官肿瘤转移的机制。

该程序的总体目标是建立一个像 Orthotopic Syngeneic 这样的患者模型系统，用于研究肝细胞癌的转移机制。这是通过首先准备用于植入的小鼠肝细胞癌细胞来实现的。在第二步中，打开受体同基因动物的腹部，并将细胞小心地注射到肝脏的右叶中。

最终，该方法的成功和可重复性推荐它广泛用于阐明肝细胞癌转移的生物学机制。与小鼠异种移植肿瘤模型等现有技术相比，该技术的主要优势在于，我们的 syn 遗传肿瘤模型系统允许研究免疫反应在肿瘤转移中的作用。与我们实验室的本科生 Michelle Nadu 将一起演示该程序要准备植入细胞，首先要用 5 毫升 PBS 洗涤 60% 至 70% 汇合的肝细胞癌细胞培养物两次。

将细胞培养物与 2 毫升胰蛋白酶在 37 摄氏度下孵育。5 分钟后，对细胞进行计数，并以每毫升 PBS 的 5 乘以 10 至第 5 个细胞稀释。接下来，将 100 微升等分试样的细胞转移到每只小鼠的一根无菌 1.5 毫升微量离心管中，并将细胞置于冰上。

在开始外科手术之前，请确认脚趾的麻醉水平是否合适。捏住，将药膏涂抹在 16 至 20 克健康的成年 bsy 小鼠的眼睛上，然后在动物腹部中线周围约一英寸的区域剃须。然后戴上一胶手套，用肥皂消毒剂擦洗裸露的皮肤数次，然后用无菌 PBS 冲洗约 5 分钟。

准备好皮肤后，丢弃手套并穿上适当的个人防护装备。提供外部热源以防止手术过程中麻醉剂体温过低，然后在动物的四肢和尾巴上放置手术胶带，将鼠标固定在仰卧位。接下来，在 xiphos 胸骨正下方做一个笔直的切口，并使用无菌自保持手术牵开器打开腹部。

当肝脏可见时，将一份细胞分试样吸入配备有 20 号针头的 1 毫升注射器中，然后缓慢小心地将所有 100 微升肝细胞癌细胞注射到肝脏的右叶中。取下针头后，用无菌棉签至少一分钟以止血。然后使用可吸收缝合线闭合皮下组织，然后闭合皮肤。

使用手术夹，用另一种消毒剂擦洗清洁伤口，并在皮下注射 100 微升生理盐水。然后在手术后立即将鼠标转移到没有同伴和纸垫料的干净笼子中至少 24 小时。这些 BSY 小鼠肝脏植入 5 乘以 10 比 6 1 ME。如刚才所示的小鼠肝细胞癌细胞。

一只小鼠的箭头所示，63 天后可观察到肝细胞癌发展的临床临床证据。在肝脏表面观察到浅表肿瘤，并有一些附着在腹壁上。这只小鼠的肺也表现出异常的形态，并显示可见的出血性坏死区域。

在第二只小鼠中，肝脏出现严重异常，异常与预期对照的浅表肿瘤非常相似。未植入的小鼠在肝脏或肺部均未发展为肿瘤。一旦掌握，这种原位 syn 遗传小鼠模型可以为阐明转移和肝细胞癌的生物学机制提供良好的平台。