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DOI: 10.3791/52874-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
环境富集需要复杂且具有挑战性的设置,以及全面的饲养和处理技术,以确保小鼠具有强大的代谢和抗癌作用。该协议提供了在小鼠中重现上述效果的详细程序。
该程序的目标是提供在环境富集中饲养和维持动物所需的细节,这在小鼠中产生强大的代谢和抗癌作用。这是通过首先在一个大箱子中设置肥料箱环境来实现的,箱子里有轮子、流源、畜栏、管道、原木和笼子等物品。第二步是将动物介绍给新奇的环境。
接下来,通过更改垃圾箱中对象的位置和类型并定期提供新鲜的食物和水来维护丰富的环境。最后一步是清理环境中替换的对象,以便将来可以交换它们。最终,在安乐死和动物组织分析之后。
这种环境富集技术显示肥胖减少,对饮食诱导的肥胖的能量消耗抵抗力增加,以及通过激活下丘脑对称神经脂肪细胞轴实现白色到棕色脂肪表型转换。该方法描述了有关为实验室啮齿动物设置丰富环境以增强对癌症和代谢疾病的抵抗力的详细信息。首先,用杀孢子素消毒剂喷洒并擦拭大型浓缩箱的内部。
按照制造商的说明,用 30% 乙醇或自来水浸泡的纸、毛巾和纸巾擦干垃圾桶,以去除以前消毒剂的任何气味。在丰富的环境中使用带有 SOR 型轮子的塑料管冰屋和其他各种塑料小屋等玩具。像以前一样清洗这些玩具,使用像以前一样清洗过的金属轮。
如果轮子上的油漆开始褪色,以至于当动物在上面奔跑时,轮子变得吵闹,请在轮子和轮轴连接的地方涂抹少量凡士林。在丰富的环境中使用原木。用手清除所有床上用品或其他碎屑来清洁原木。
然后通过在干燥循环或纺织循环中高压灭菌原木来对原木进行消毒,使其温度达到 121 摄氏度 15 分钟。使用 29 厘米 x 18 厘米 x 12.5 厘米和 30.5 厘米 x 19 厘米 x 14 厘米之间的干净饲养笼来固定。饲喂和饮水线架从笼子的前底部切出一个直径至少 5 厘米的孔,供小鼠进出。
开始。对于四分之一英寸的玉米芯实验动物垫料,放入干净到大的浓缩箱中,深度为 2 至 2.5 厘米。接下来,将两到三个先前的主动脉夹原木放在箱子的一个角落,以隔离大约 1, 225 平方
厘米的区域。然后在原木隔离的区域,在上面放置三块带有 SOR 轮的胶水。确保轮子有自由旋转的空间。现在将塑料管拼接在一起,使多个臂从中央连接件中分出。
将此管路放在垃圾桶中间两个角的垃圾桶中。放置一个装满与垃圾箱相同垫料的饲养笼。每个饲养笼前面的孔应朝向料箱的中心。
在每个饲笼顶部放置一根装有老鼠食物的食物和水线。加入水瓶。将一个 11.5 厘米的轮子、一个 20.5 厘米的轮子和一个 28 厘米的轮子放入垃圾桶中。
然后在整个富集箱中再放置四到五个塑料笼,如玩具或隧道。用微型隔离器滤纸盖住垃圾箱,并使用活页夹将滤纸夹在垃圾箱上。将动物从标准笼子放入富集箱时,将笼子侧放到箱子中,以便动物可以从标准笼子自由移动到富集箱。
不要让筑巢材料转移到富集箱中。10 到 20 只具有相同年龄、性别和遗传品系的动物可以同时饲养在丰富的环境中。确保每天观察动物是否有疾病或痛苦的迹象。
如有必要,每周两次轻柔地处理动物以进一步检查它们的状况。检查食物和水的水平,确保食物和水可以持续接下来的两天。此外,将跑轮和充实玩具拉直,以便它们展开并易于使用。
每周更换一次脏污的浓缩物品,最好是在将老鼠从环境中移走时更换。出于实验目的,请移除饲笼和金属丝架,换上装满新鲜食物的干净笼子和架子。用干净的水瓶替换水瓶。
至关重要的是,重新排列扩充项,以便保留设置的关键方面,但扩充项的放置方式不同。点。检查大浓缩箱的其余部分,必要时进行清洁。每两周舀出脏垃圾并铺上新的干净床上用品。
在进行每周饲养时,请用手清洗玩具或通过笼子清洗玩具。每个月,通过移除富集玩具和喂食笼并舀出猫砂来清理大部分猫砂。更换新鲜垫料 确保笼子的所有区域都有 2 厘米的垫料,每三个月一次,或者根据您的动物规程要求,移走所有垫料和玩具,并像以前一样清洗 对浓缩箱进行消毒 房屋控制 将动物分组,进行相同的 12 小时光照黑暗循环。
作为微隔离笼中富集环境中的小鼠,在对照笼中提供与富集环境中相同的玉米芯垫料,并添加一个 4 厘米 x 4 厘米的巢穴,该巢穴由一个 maister maker 巢点亮,该巢将 3 到 5 只同性别的小鼠安置在普通小鼠笼中。不要在笼子里提供任何玩具管或笼子。在笼子中包括一个用于存放食物的金属架和一个水瓶(如果笼子没有连接到自动浇水系统)。
每天监测动物的健康状况,确保动物有充足的食物和水。更换或清洁笼子、饲线、食物和水。像以前一样,每周清洁一次笼子和金属丝架。
将 3 周龄雄性小鼠饲养在富集环境或对照笼中 5 周,然后皮下接种每只动物 10 至 5 个细胞。结果显示 B 16 黑色素瘤肿瘤重量为接种后 17 天。每组由 10 只动物组成。
星号表示小于 0.05 的 P 值,由此处的学生 T 检验计算得出。3 周龄小鼠进行 6 天的环境富集。在丰富的环境中 6 天,腹膜后、白色脂肪组织、脂肪垫重量减少。
该图显示,在富集环境中 6 天,棕色脂肪组织、表皮白色脂肪组织和腹膜后白色脂肪组织、脂肪垫重量相对于体重的减少。接下来的两张图分享了小鼠在富集环境中饲养 4 周的结果,如图所示,环境富集 4 周,除棕色脂肪组织外,所有脂肪类型的脂肪垫重量均减少。在环境富集 4 周后,除棕色脂肪组织外,所有脂肪类型的脂肪垫重量相对于体重均有所下降。
看完这个视频,你应该对如何建立和维护一个丰富的环境有一个很好的了解,这个环境会诱导抗癌和抗肥胖的作用和小鼠。
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