Name: 代谢状态的表征非人灵长类动物与静脉葡萄糖耐量试验 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: 了解静脉葡萄糖耐量试验在非人灵长类动物中的应用，用于评估代谢状态和血糖控制。该方法可建立按代谢健康分层的队列，支持胰岛素抵抗和糖尿病治疗研究。

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作者谨此感谢DHMRI CLAS动物护理团队的大力支持，以及设施主管Daniel Peralta先生和驻场兽医Glicerio Ignacio博士（DVM MRCVS）的协助。

所有动物实验均经位于北卡罗来纳州研究园区（NCRC）的大卫·H·默多克研究所动物护理与使用委员会（IACUC）批准，批准编号为14-017，项目名称为“糖尿病及糖尿病前期/胰岛素抵抗非人灵长类动物模型的表征及改善胰岛素敏感性和代谢功能治疗药物的有效性研究”。
1. 动物选择与研究准备
<ol>
	<li>根据每月的食物摄入量和体重记录，选择饮食和体重稳定的动物。 
	注意：近期食欲下降的动物，应在食物摄入量稳定之前避免进行表征。
	<ol>
		<li>对于成年动物（&#62; 5 - 6 年），若其连续月份之间的体重差异超过10%，在未对动物进行检查并排除除代谢状态改变以外的其他原因之前，不应选择该动物。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>针对葡萄糖、胰岛素和C肽分析物，准备含有蛋白酶抑制剂（抑肽酶和DPP4抑制剂）的K2EDTA样本采集管。 
	注意：DPP4抑制剂与抑肽酶混合液可提供广谱的蛋白酶抑制作用，若需检测其他分析物（如胰高血糖素、GLP-1）时尤为适用。即使不检测额外分析物，血液采集管也应以相同方式制备，以保持样本采集的一致性。对于未使用本方法验证过的检测项目，应根据试剂制造商的建议单独采集样本。
	<ol>
		<li>通过将100 mg冻干抑肽酶与10 ml DPP4抑制剂混合，制备蛋白酶抑制剂混合液。每采集1 ml血液，向每支采血管中加入10 µl抑肽酶与DPP4抑制剂的混合液。</li>
		<li>为预防可能的采血过量，向每支采血管中额外加入10 µl蛋白酶抑制剂混合液。将处理后的采血管储存于-20 °C直至使用。操作过程中将采血管置于湿冰上，并在4 °C下离心。</li>
		<li>使用血清分离管在基线时采集血液样本，用于常规血清生化分析。全血细胞计数（CBC）使用不含蛋白酶抑制剂的标准K2EDTA管。血液样本离心后，使用冻存管对血浆和血清进行分装。</li>
		<li>正确标记采血管和冻存管，标注动物编号、日期、操作名称、采样时间点及样本体积。在冻存管上标注血浆中所含分析物，以便进行相应的检测。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>通过将0.15 ml浓度为每毫升1,000 USP单位的肝素注入250 ml生理盐水袋中，配制肝素化生理盐水冲洗液，获得每毫升含0.06 mg肝素的溶液。抽取40 - 60 ml该溶液至盐水锁中，用于样本间冲洗。另分别抽取1 ml和5 ml至独立注射器中，用于葡萄糖输注前后对输注端口进行冲洗。</li>
</ol>
2. 动物镇静与准备
<ol>
	<li>在实验操作前不少于14小时且不超过18小时，从动物笼中移除食物。 
	注意：动物在实验前必须禁食，以避免餐后血糖值波动。同时，禁食也是为了防止动物在麻醉期间发生胃内容物反流和误吸。</li>
	<li>在整个IVGTT实验过程中，通过肌肉注射给予氯胺酮（10 mg/kg）作为全身麻醉剂以镇静动物。在实验期间，每隔20至30分钟或根据需要追加给予氯胺酮（5 - 10 mg/kg）。
	<ol>
		<li>称量镇静后的动物体重。将动物置于加热的实验台上，保持侧卧位。</li>
		<li>每15至20分钟监测一次临床参数，以确保动物处于稳定的麻醉状态。使用脉搏血氧仪测量心率（100 - 200 次/分钟）和SPO2（&#62; 92%）。使用秒表测量呼吸频率（20 - 50 次/分钟），通过目视或手动计数15秒内的呼吸次数，再乘以4。通过直肠测量体温（&#62; 97 °F）。监测牙龈和嘴唇周围黏膜的颜色（湿润、粉红色）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>准备两个插管部位。使用毛发剪刀修剪导管插入区域的毛发，并使用氯己定和70%酒精交替擦拭对整个区域进行消毒。
	<ol>
		<li>将一根导管插入左侧或右侧头静脉或隐静脉区域，并通过三通阀连接至肝素生理盐水冲洗液（0.06 mg肝素/ml）。此部位用于采血。</li>
		<li>在另一条腿或手臂的头静脉或隐静脉区域插入第二根导管并连接一个接口。此部位用于葡萄糖输注。在葡萄糖输注前，使用少量（1 ml）肝素化生理盐水冲洗以保持导管通畅。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）操作步骤
注意：IVGTT 过程包括 8 个采血取样时间点（表 1）。
<ol>
	<li>采集基线样本，使用手持式血糖仪测量空腹血糖水平。同时采集血清样本用于常规生化分析，以及全血样本用于血常规（CBC）检测，以评估动物的整体健康状况。采集血浆样本，使用经制造商验证适用于猕猴的试剂盒，检测基线样本中的葡萄糖和胰岛素水平8, 9。 
	注意：在采集任何血液样本前，应从导管中预先抽出0.5 ml的血液，以清除导管死腔中残留的血液或肝素。</li>
	<li>获得基线样本后，通过葡萄糖输注端口在30秒内输注50%葡萄糖（250 mg/kg）。 
	注意：可使用更高剂量的模型（500 mg/kg），但为了进行纵向比较，剂量应在各次实验中保持一致。
	<ol>
		<li>输注结束后，用5 ml肝素化生理盐水冲洗输注端口，确保其中无残留葡萄糖。输注结束的时间点定义为T0。操作人员应更换手套，以防输注过程中残留的葡萄糖污染后续血液样本。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>葡萄糖输注后的第一个采样时间点为输注结束后的T3 min，随后依次为T5 min、T7 min、T10 min、T15 min、T20 min，最后一个采样时间点为T30 min。从每个时间点采集血浆样本，与基线样本一起用于检测葡萄糖和胰岛素水平（见步骤3.1）。
	<ol>
		<li>在T3 min时间点，再次使用手持式血糖仪检测血糖水平。 
		注意：基线和T3 min时的血糖仪读数仅用于确认葡萄糖输注是否成功。T3 min时的血糖水平应比空腹基线血浆葡萄糖水平高出约100 mg/dl。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. 动物恢复与样本处理
<ol>
	<li>在T30 min时间点后移除套管，并对导管插入部位施加压力以止血。监测动物直至其恢复意识并能够坐起。待动物完全恢复后提供饲料。</li>
	<li>立即将每份全血样本置于预冷的含K2EDTA的试管中，并置于冰上。采集后10分钟内于4 °C条件下以3,000 rpm离心。将血浆分装至冻存管中，冷冻后于-80 °C保存直至分析。
	<ol>
		<li>将用于常规血清生化分析的血清管中的血液在室温下静置，时间不少于20分钟且不超过30分钟，随后在室温下以3,000 rpm离心。血清样本在采集后48小时内进行检测前需冷冻保存。 
		注意：用于全血细胞计数（CBC）分析的全血样本在采集后24小时内检测前应冷藏保存。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. 数据处理
<ol>
	<li>在建立血浆胰岛素和葡萄糖曲线后，根据高于基线的葡萄糖数值自然对数曲线的斜率，确定葡萄糖清除率 K16, 17。 
	注：健康的非人灵长类动物（NHP）的葡萄糖清除率 K通常远高于1，常大于2或更高，因为健康动物的葡萄糖水平通常在30分钟内恢复至基线水平。随着胰岛素分泌减少，葡萄糖清除率K将显著下降，降至1以下。</li>
	<li>将整个曲线下面积AUC计算为各时间点之间线段所构成梯形面积之和，直至T30时间点16, 17。 
	注：传统上，该程序前10分钟的AUC被视为葡萄糖刺激的急性胰岛素反应（AIR），而程序最后20分钟的AUC则被视为晚期胰岛素反应（LIR）。当动物代谢功能逐渐紊乱时，胰岛素AUC会升高，反映出对日益加重的胰岛素不敏感性的代偿。然而，当动物进展至显性糖尿病阶段时，AUC将下降，通常首先表现为急性胰岛素反应阶段的降低，即AIR所反映的部分。</li>
</ol>

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</ol>

作者隶属于一家在代谢疾病领域活跃的合同研究组织（Crown Bioscience）。

静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）通过基于体重的单次右旋葡萄糖输注来评估葡萄糖刺激的胰岛素释放能力5, 12, 13。通过该检测可获得空腹血糖和胰岛素水平，并可评估动物释放胰岛素以及将升高的血糖水平恢复至基线的能力。这为使用者提供了信息，可用于将动物表征为血糖和胰岛素水平正常的健康对照、血糖正常但伴有高胰岛素血症的代谢紊乱动物，或高血糖且胰岛素抵抗的糖尿病动物。
在输注葡萄糖后，尤其是早期时间点的血液样本，必须及时且一致地采集和处理。这将减少个体内部和个体之间的变异，并降低数据时间顺序出错的可能性。T3时间点的准确性至关重要，因为血浆葡萄糖浓度从基线到输注葡萄糖后3分钟内的变化幅度是用于评估动物代谢状态的终点指标之一。在输注葡萄糖后的前7至10分钟内，葡萄糖清除率会出现下降，若未能按时采血，这一变化可能被遗漏。葡萄糖和胰岛素曲线在该时间段内的曲线下面积被用作终点指标，突显了这些早期时间点的重要性。如果T3之后的采血时间延迟，操作仍可继续，但应记录实际采血时间，以尽可能保留曲线的真实形态。尤其重要的是，任何超过一分钟的偏差都必须被记录并报告。在最初的十分钟之后，葡...

静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）是一种便捷的功能性检测方法，常规用于测定人类在不同代谢状态下β细胞的功能5, 7。在2型糖尿病（T2D）的动物模型中，该方法被广泛认可为一种用于表征动物从健康状态向代谢紊乱性高血糖状态进展的工具8, 9。最接近人类T2D的动物模型是非人灵长类动物（NHPs），其中以猕猴（rhesus）和食蟹猴（cynomolgus macaques）为典型代表。这些动物会自然发生T2D，其发病风险因素如年龄和肥胖与人类相似10。此外，随着代谢紊乱疾病的进展，其疾病进程和胰腺病理变化也与人类相似，均出现淀粉样物质沉积11。
本文报道了我们在非人灵长类动物（NHP）群体代谢状态表征工作中，实施静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）的标准方法。与其他更为耗时且昂贵的技术相比，该方法操作简便2。IVGTT可用于对大量动物群体进行快速、频繁的表征。结合糖化血红蛋白（HbA1C）水平、动物的饮食及摄食史，以及其瘦体质量百分比和体脂百分比，IVGTT通常足以评估动物的代谢状态及其向显性糖尿病发展的进程6, 8。
HbA1C 反映了红细胞寿命期间的平均血糖水平，可作为过去六周至三个月内血糖水平的可靠指标。在静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）的空腹基线血样中测得该值时，能够反映两次实验操作间隔期间的血糖控制状况。如果动物自上次 IVGTT 后已从代谢紊乱发展为糖尿病状态，则 HbA1C 值显著高于此前数值表明这一转变在上次 IVGTT 后不久即已开始；而 HbA1C 值接近此前水平则提示其近期才发生转变。通常情况下，在恒河猴中，HbA1C 值超过 6% 被视为异常，提示血糖控制不良10, 23。
血糖水平的解读应结合动物整体的行为表现和一般健康状况进行。糖尿病猕猴与人类相似，会出现多食、多饮和多尿的症状。群养动物会给这些指标的测量以及代谢紊乱和糖尿病猴个体化护理带来显著挑战。我们建议将动物单独饲养，以便提供更个性化的护理，并更方便地监测猴只健康状况的行为学标志8。此外，糖尿病猕猴还会出现体重下降，血脂水平升高（胆固醇升高、高甘油三酯血症）以及血清化学检测中矿物质代谢紊乱。检测血清化学中肝肾功能的指标非常重要，因为这些器官的损伤常常是进展性代谢障碍/糖尿病的并发症，并可能共同导致血糖、血脂和矿物质代谢失衡9, 11, 18, 24。
采用该方法时，猴子在整个生命周期内通过多次、频繁表征所产生的历史数据具有特别重要的价值。当需要进行其他操作（如葡萄糖钳夹或梯度葡萄糖输注（GGI））以全面评估动物健康状况时，通常是在初次表征阶段，而此时其历史数据尚不可获得。然而，一旦建立了基线，通常每三个月进行一次重复的静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）就足以追踪动物的进展情况。当动物根据其代谢状态在一年内参与多个研究时，这一点尤为重要。尽管动物的健康状况可能在数年内保持相对稳定，但当其代谢状态恶化时，胰岛素抵抗和葡萄糖耐受不良可能会迅速显著加剧。在相隔三个月的实验程序之间，HbA1C值可用于对动物健康状况的下降或改善趋势进行一定程度的插值推断。因此，该方法非常适合用于在动物自然生命周期内开展的多个纵向研究中的动物表征工作。

<table><tbody><tr><td>Allegra X-15R 离心机</td><td></td><td></td><td>血浆：4 &amp;#176;C，3,000 rpm，离心 10 分钟</td></tr><tr><td>Sorvall ST16R 离心机</td><td></td><td></td><td>血清：22 &amp;#176;C，3,000 rpm，离心 10 分钟</td></tr><tr><td>Thermo Scientific -86 &amp;#176;C 超低温冰箱，Forma 88000 系列</td><td></td><td>型号：88500A</td><td></td></tr><tr><td>50% 葡萄糖（D50）</td><td>Webster</td><td>07-8008986</td><td>静脉输注葡萄糖溶液</td></tr><tr><td>3 ml 鲁尔锁注射器</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td></td><td>连续采血</td></tr><tr><td>5 ml 鲁尔锁注射器</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td></td><td>肝素化生理盐水冲洗</td></tr><tr><td>10 ml 鲁尔锁注射器</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td></td><td>静脉输注 D50</td></tr><tr><td>2 x 2 纱布垫</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>366.23000.4</td><td>干燥使用，或配合 70% 酒精及 2% 氯己定溶液使用</td></tr><tr><td>4 ml 血清分离管&amp;nbsp;</td><td>Midwest Veterinary Supply</td><td>366.45000.4</td><td>用于超生化检测的采血管</td></tr><tr><td>K&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;EDTA，2 ml</td><td>VWR</td><td>95057-239</td><td>采血管</td></tr><tr><td>抑肽酶，100 mg</td><td>Sigma</td><td>A1153-100MG</td><td>采血管蛋白酶抑制剂添加剂</td></tr><tr><td>22 G x 1&quot; 导管</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>193.75250.2</td><td>静脉导管&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>带帽注射塞</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.11500.2</td><td>50% 葡萄糖输注端口</td></tr><tr><td>多孔胶带，1/2&quot; x 10 码</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.85000.2</td><td>固定导管和肝素锁</td></tr><tr><td>2% 氯己定溶液</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>193.08855.3</td><td>导管部位准备</td></tr><tr><td>70% 乙醇</td><td>VWR</td><td>71001-654</td><td>导管部位准备</td></tr><tr><td>止血带</td><td>Webster</td><td>07-8003432</td><td></td></tr><tr><td>三通阀</td><td>Midwest Veterinary Supply</td><td>366.28510.4</td><td>肝素锁</td></tr><tr><td>37&quot; 延长管</td><td>Webster</td><td>07-8454200</td><td>肝素锁</td></tr><tr><td>Exel 50-60 cc LL 注射器</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.12250.2</td><td>肝素化生理盐水冲洗</td></tr><tr><td>250 ml 袋装 0.9% 生理盐水</td><td>Webster</td><td>07-8365593</td><td>冲洗</td></tr><tr><td>1,000 U 肝素，10 ml</td><td>Webster</td><td>07-883-4916</td><td></td></tr><tr><td>氯胺酮（Ketaset）100&amp;nbsp;mg/ml</td><td>Fort Dodge</td><td>（AV 订购）</td><td></td></tr><tr><td>Precision Xtra 血糖试纸，50 片/盒</td><td>Abbott（American Diabetes Wholesale）</td><td>9381599728K7</td><td>检测基线及 T3 时点血糖水平</td></tr><tr><td>Masimo Rad 57</td><td>DRE</td><td>6052057V</td><td>脉搏血氧仪</td></tr><tr><td>Pavia 直肠温度计</td><td>Patterson</td><td>07-8391335</td><td></td></tr><tr><td>Precision Xtra 血糖仪</td><td>Abbott</td><td>9381599728K7</td><td>手持式血糖仪</td></tr></tbody></table>

使用静脉葡萄糖耐量试验表征非人灵长类动物的代谢状态

Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test

静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）在葡萄糖稳态特征描述中起着关键作用。结合摄食和禁食状态下的血清生化谱，包括血糖水平、HbA1c、胰岛素水平、饮食临床史、身体成分及体重状况，可对正常与异常的血糖调控进行评估。IVGTT的解读依赖于测定葡萄糖和胰岛素水平在右旋葡萄糖刺激后随时间的变化。需要考虑的关键指标包括：相对于T0（葡萄糖输注结束时）所达到的葡萄糖和胰岛素峰值水平、由前20分钟（T1至T20）快速葡萄糖清除斜率计算得出的葡萄糖清除率K、血糖恢复至基线水平所需的时间，以及曲线下面积（AUC）。这些IVGTT指标会随着葡萄糖稳态从健康状态向疾病代谢状态转变而呈现特征性变化5。本文将描述非人灵长类动物（恒河猴和食蟹猴）的特征，这些动物是人类2型糖尿病（T2D）最相关的动物模型，同时介绍这些动物从瘦健健康状态到肥胖代谢紊乱状态及T2D状态的IVGTT和临床特征8, 10, 11。

所示结果 图1 展示了成年健康和糖尿病食蟹猴在30分钟静脉注射葡萄糖耐量试验（IVGTT）期间典型的葡萄糖和胰岛素曲线。健康猴与晚期糖尿病猴的数据被并列呈现，以对比代谢特征处于两个极端的动物之间存在的显著差异。作者已成功地在恒河猴中应用了该IVGTT方案，并获得了类似结果。
健康猕猴（恒河猴和食蟹猴）在空腹状态下的基础血糖值可低至50至60 mg/dl 8。如图所示，健康非人灵长类动物在T3时间点测得的初始血糖升高幅度可能仍低于糖尿病动物的典型基础血糖值，后者通常超过200 mg/dl。在随后的30分钟内，健康动物的血糖水平通常会恢复至基础值，而代谢异常和糖尿病动物则无法实现这一恢复过程（图1；实线）。健康动物伴随的胰岛素曲线呈现两个峰值（图1；蓝色虚线），分别对应血糖浓度最初的快速下降阶段（第一时相），这一过程在很大程度上由胰岛...

本实验方案的目的是介绍一种标准方法，用于对非人灵长类动物进行静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT），以评估其血糖控制能力，并判断其从健康到代谢紊乱状态的代谢状况。

静脉注射葡萄糖耐量试验（IVGTT）在葡萄糖稳态特征描述中起着关键作用。当与血清生化指标结合使用时……

本静脉注射葡萄糖耐量试验（IVGTT）的总体目标是表征猕猴从健康状态进展为代谢紊乱、高血糖状态的代谢性疾病进程。该方法可用于建立根据其代谢状态分层的实验动物群组，以开展饮食或药物干预研究，评估针对糖尿病胰岛素抵抗治疗措施的疗效。该技术的主要优势在于，相较于其他耗时更长且成本更高的技术，操作简便。开始实验前14至18小时，从猕猴笼中移除食物，以避免餐后血糖值出现波动。次日早晨，称量已麻醉动物的体重，然后将灵长类动物置于预热的手术台上，保持侧卧位。每15至20分钟，使用脉搏血氧仪测量心率和外周毛细血管血氧饱和度；使用秒表测量呼吸频率，并通过直肠测温法使用体温计测量体温。每次临床参数检查时，还需确认牙龈和嘴唇周围的黏膜湿润且呈粉红色。在确认动物的基础健康状况后，使用剪毛器修剪导管插入部位的毛发，随后使用氯己定和70%酒精交替擦拭消毒两个区域。待部位准备就绪后，插入第一根导管，并通过三通旋塞将诱捕装置连接至肝素生理盐水冲洗液。此位置即为采血取样点。用胶带将通止阀固定在肢体上。导管的位置对于保持通畅以及精确地进行连续采血至关重要。因此，应考虑选择大隐静脉的内侧和更近端的区域，以便于固定和操作肝素化封管冲洗系统。然后，放置第二根导管，并连接用于葡萄糖输注的输液端口，随后推注 1 毫升肝素化生理盐水，以保持导管通畅直至开始葡萄糖输注。用胶带将端口固定于手臂上以确保其稳固。当两根导管均就位后，采集基础血样，并使用手持式血糖仪测定空腹血糖水平。采集血清样本用于常规生化分析，同时采集全血样本用于全血细胞计数，以评估动物的整体健康状况。采集全血样本后需立即颠倒混匀。每次采血后，将样本与含蛋白酶抑制剂的EDTA管充分混合。获得基线样本后，通过葡萄糖输注端口在30秒内输注50%葡萄糖剂量。随后用5毫升肝素化生理盐水冲洗，确保输注端口内无残留葡萄糖。输注结束后更换手套，以免输注过程中残留的葡萄糖污染后续血液样本。首次输注后采样时间点为葡萄糖输注结束后的第3分钟，随后在T5、7、10、15和20分钟时采样，最后一次采样在T30分钟。采集样本后10分钟内进行离心，用于葡萄糖和胰岛素分析，然后将血浆分装至冻存管中，于-80摄氏度冷冻保存，直至进行后续分析。在T3分钟采样时，使用手持式血糖仪检测血糖水平，以确认葡萄糖输注的效果。当采集完最后一个样本后，移除套管针，并对导管插入部位施加压力以止血，同时监测动物直至其完全恢复。此处展示了在30分钟静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）过程中，成年健康与糖尿病食蟹猕猴典型的葡萄糖和胰岛素曲线。健康猕猴空腹时的基础血糖值可低至50至60毫克/分升，在T3分钟时间点可观察到血浆葡萄糖的初始峰值。这显著低于糖尿病动物表现出的典型血浆葡萄糖峰值。在实验过程中，健康动物的葡萄糖水平通常会恢复至其基线值，而代谢异常和糖尿病动物的葡萄糖水平则不会。健康动物伴随的胰岛素曲线呈现两个峰值，对应于血糖水平的初始快速下降，这一过程在较大程度上由胰岛素对葡萄糖转运和摄取的外周作用所介导。这些外周效应的程度，即使在胰岛素反应的第一阶段，也比不上肝脏在降低血糖方面所起的作用；而在幅度较小但更持久的第二胰岛素峰期间，肝脏通过抑制内源性葡萄糖生成，对血糖水平的影响最为显著。一旦动物进入重度糖尿病状态，对右旋糖酐脉冲刺激的胰岛素分泌会急剧下降。在整个实验过程中，血糖水平将保持升高状态。与葡萄糖类似，此时的清除几乎完全由非胰岛素依赖性机制介导。在完成该操作后，可进一步采用分级葡萄糖输注或高胰岛素-正常血糖钳夹技术，以探讨有关胰岛素敏感性的其他问题。请注意，由于可能暴露于B型疱疹病毒，操作接触过猕猴血液的针头具有极高危险性。进行此操作时，应始终遵守相关预防措施，例如穿戴适当的个人防护装备，以及在处理锐器时需格外小心。

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代谢状态的表征非人灵长类动物与静脉葡萄糖耐量试验

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术，或称胰岛素钳夹，是评估胰岛素作用的金标准...

清醒非束缚小鼠的高胰岛素-正常血糖钳夹实验

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本文描述了以高脂饮食喂养小鼠以建立饮食诱导的胰岛素抵抗和肥胖模型的方法，并对其代谢特征进行表征。此外，文中提供了进行口服葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验的详细实验方案，用于监测机体整体葡萄糖代谢的变化。 体内.

研究 体内 高脂饮食喂养小鼠的葡萄糖代谢评估：口服葡萄糖耐量试验（OGTT）与胰岛素耐量试验（ITT）

肥胖的发病率不断上升，并增加慢性肺部疾病的风险。为了阐明其潜在机制并制定预防策略，需要建立明确的动物模型。本文提供了三种方法（葡萄糖耐量试验、体容积描记法和肺组织固定）用于研究肥胖对小鼠肺部功能的影响。...

腹腔内葡萄糖耐量试验、肺功能测定及肺组织固定以研究肥胖与代谢障碍对肺部结局的影响

本方案描述了使用体成分分析仪和代谢动物监测系统来表征小鼠体成分及代谢参数的方法。以高脂饮食诱导的肥胖模型为例，展示了这些技术的应用。...

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本研究通过使用稳定同位素标记的葡萄糖示踪剂，对多囊卵巢综合征小鼠模型中的肝脏葡萄糖生成进行直接测定 通过...

多囊卵巢综合征小鼠模型中肝糖生成的评估

本文介绍了一种用于量化棕色脂肪组织（BAT）活性对人类代谢生理学意义的实验方案。该方法通过结合碳水化合物负荷、间接热量测定法以及锁骨上区域温度变化的测量来实现。这种新颖的方法有助于开发针对人类棕色脂肪组织产热作用的药物靶点。...

结合间接热量测定法、红外热成像和血糖水平检测来测量人体棕色脂肪组织产热活性

本文描述了一种用于深入评估听觉和认知能力（这些能力与听力技能相关）的测试组合（IMAP）。该测试组合易于实施、适合儿童，且不受语言混杂因素的影响。刺激材料的生成和测试流程的管理均由一个软件平台（IHR-STAR）控制，以确保实验程序的可重复性。...

理解听力：IMAP测试量表

了解静脉葡萄糖耐量试验在非人灵长类动物中的应用，用于评估代谢状态和血糖控制。该方法可建立按代谢健康分层的队列，支持胰岛素抵抗和糖尿病治疗研究。

使用静脉葡萄糖耐量试验表征非人灵长类动物的代谢状态

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