July 2nd, 2015
提出了一种强大而灵活的方法来确认杂草种群中的除草剂耐药性。该协议允许推断除草剂抗性水平并将其应用于各种杂草种类和除草剂,只需稍作适应。
该程序的总体目标是测试和确认各种杂草种类和除草剂的除草剂耐药性,以及推断除草剂耐药性水平。这是通过首先打破从除草剂处理中幸存下来的植物收集的种子的休眠来实现的,以获得同时发芽和幼苗出苗。需要一段从几天到一周以上的种子春化期。
第二步是将含有硝酸钾的螺旋培养基倒入塑料培养皿中。然后将 Vern 种子放在凝固的螺旋钻上,并将培养皿转移到具有每种杂草最佳条件的发芽柜中。接下来,将 15 到 20 棵幼苗移植到装满标准盆栽混合物的塑料托盘中。
为每个托盘分配一个条形码,包括其唯一标识的所有信息,然后将托盘放置在加热的温室中,直到幼苗达到 2 到 3 片叶子阶段。最后一步是使用精密台式喷雾器进行除草剂处理,所有除草剂均以商业配方使用推荐的表面活性剂,剂量为推荐田间剂量的两倍,处理后三到四周的三倍,完成最终评估。条形码阅读器用于记录存活植物的数量和每个实验单位的视觉估计生物量。
然后将数据下载到计算机中并进行分析,以确定除草剂耐药性状态。与体内或体外诊断筛查测试相比,该方法的主要优势在于其稳健性和灵活性。换句话说,该方法是可靠的,并且可以通过微小的适应轻松适应广泛的物种。
这种方法有助于回答与 CRO 领域中抗除草剂杂草种群的研究和管理相关的关键问题,例如抗性模式和水平。它还允许正确规划进一步的实验步骤,例如那些响应实验。一般来说,刚接触除草剂抗性测试的研究人员会遇到困难,因为需要考虑许多步骤和方面,并适应特定的实验条件。
首先一次从一个物种收集种子样本并分配一个唯一的代码。通过去除谷壳并拖拽种子来清洁种子。为每个样品填写一个表格,指明分配的唯一代码。
物种名称、采集日期、GPS 坐标、市、农民姓名、田地大小、侵染水平、当季使用的作物除草剂以及田地的历史记录。将种子储存在未密封的纸袋中,并标有分配的唯一代码。让水分蒸发,但不要将种子暴露在高温或极端温度波动中。
避免诱导继发性休眠。将清洗后的种子存放在 4 摄氏度的暗室中,以便春化。在塑料盘中放入一些去离子水。
剪下两个圆盘和一条滤纸,它们将通过毛细管在水和两个圆盘之间形成一座桥梁。将滤纸浸泡在水中,然后放入塑料盘中。然后将风干的种子放在纸上。
根据物种的不同,将塑料盘子转移到 4 摄氏度所需的时间。接下来,使用去离子水制备含有 0.1% 硝酸钾的 0.6% 螺旋溶液,将螺旋钻溶解在微波炉中,然后将螺旋钻溶液倒入塑料盘中。基质冷却后,将要发芽的 Vern 种子放在凝固的螺旋钻上。
将塑料培养皿放入发芽柜中,春化持续时间,以及光照和温度条件因杂草种类而异。移植而不是直接缝纫可以获得同一生长阶段的均匀植物,这是优化除草剂处理性能的重要前提。将 15 至 20 棵幼苗移植到塑料托盘中,塑料托盘中装满了 60% 粉砂壤土、土壤、15% 沙子、15% 农用珍珠岩的标准盆栽混合物, 和 10% 泥炭。使用条形码标识每个托盘,包括唯一标识、正在测试的种群代码、重复编号和渐进式托盘编号的所有信息。
将托盘放在加热的温室中,并根据需要给植物浇水,以保持基质处于或接近田间容量。生长温度因出苗后除草剂的杂草种类而异。喷雾植物,当它们达到两到三个叶期时,根据标签说明散装制备表面活性剂溶液,最终浓度通常表示为最终体积的百分比还是每单位面积分配体积?
计算要溶解在表面活性剂溶液中的商业产品的量。使用这个方程式,除草剂剂量的计算方法是将推荐的田间剂量乘以最大测试剂量,然后用溶液的最终体积除以台式喷雾器输送的体积。制备最浓的除草剂溶液 首先,将除草剂溶液稀释 3 次,以制备浓度较低的溶液。
该程序减少了称量或移液除草剂时出错的机会。除草剂溶液。浓度表示为每单位面积分布的体积。
从较低的除草剂剂量开始处理顺序。这样,就无需在两次处理之间用相同的除草剂清洗喷洒柜。使用精密台式喷雾器分配除草剂溶液,在 215 公斤帕斯卡的压力和 0.75 米/秒的速度下,每公顷输送 300 升除草剂,喷杆配备三个扁平风扇液压喷嘴。
更换除草剂后,用 1% 漂白剂清洗喷洒柜两次,然后冲洗。根据除草剂测试记录、在处理中存活的植物数量以及使用条形码阅读器(可自动识别每个托盘)的视觉估计生物量或 VEB,在处理后三到四周进行评估。如果植物无论颜色或其他外观如何都没有表现出活跃的生长,则被评估为死亡。
VEB 是通过对同一种群的处理和未处理的植物生物量进行目视比较而获得的。每个处理过的托盘的分数范围从不受除草剂影响的植物的 10 分到植物明显死亡的 0 分。通过在所有实验中包括易感人群来评估一般治疗效果,例如在从未或很少用除草剂处理的地点收集的人群。
将植物存活率表示为除草剂处理前计数的处理植物数量的百分比,并计算标准误差。渗透值将种群分为四类,这是根据当只有不到 5% 的植物在除草剂剂量中存活时对两种除草剂剂量敏感的处理所获得的结果。当除草剂剂量下存活者在 5% 至 20% 之间时,1 x 轻微抗性。
当超过 20% 的植物在除草剂剂量下存活时,1 x 抗性。当幸存者在除草剂剂量下超过 20% 时,1 倍和在除草剂剂量下超过 10% 时,具有高度抗性。显示了 panolam 除草剂处理对 4 个 iopa 种群的 3 x 代表性结果。
易感检查得到完全控制,而种群 1410 被归类为轻度抗性,因为只有不到 20% 的植物存活下来。种群 1411 在剂量 3 x 时得到控制,但在剂量 1 x 时植物存活率高于 20%,因此这归因于我们的状态。最后,群体 1412 在推荐的场剂量 1 倍或 3 倍下未得到控制,因此被归入高度耐药类别。
这里显示了第二个关于用 trien Ron methyl 处理的 pop 或 rehas 植物的生物量目测生物量的例子。未处理的对照得分为 10,而植物完全受控的托盘的 VEB 为零。为托盘分配 5 分的中级分数。
植物总生物量,即未处理植物托盘的一半,植物的生物量与未处理的对照相当,其中植物不受除草剂处理的影响,因此具有高度抗性,VEB 为 10。在尝试此程序时,重要的是要记住,杂草种子的质量应该在成熟时收集然后恢复,这对遵循此程序的实验成功有很大影响。可以执行其他方法,例如响应 byas,以精确回答与阻力水平相关的其他问题。
看完这个视频,你应该对如何进行除草剂抗性测试以及如何根据不同的杂草种类调整不同的步骤有一个很好的了解。特别是种子 CY 制动和种子发芽。不要忘记,使用除草剂或浓酸可能非常危险,因此在执行此程序时应始终佩戴口罩、手套和其他个人防护装备等预防措施。
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本文提出了一种确认杂草种群对除草剂抗性的稳健且灵活的方法。该协议允许通过微小的调整推断出各种杂草物种和除草剂的抗性水平。