简单和计算机辅助测试嗅觉的小鼠

以下实验的总体目标是测试小鼠的先天嗅觉辨别、嗅觉偏好或回避和嗅觉敏感性。这是通过将鼠标暴露在新型引诱剂或上诉剂和中性气味（即水）中来实现的。同时，摄像机记录了行为过程。

接下来，使用提供的宏在图像 J 中分析视频，以获得在气味和水参数中花费的时间。结果显示了基于事后计算机辅助分析的不同基因型与水相比对气味的偏好或回避行为。与使用专用竞技场和嗅觉相比，嗅觉测试的主要优点是它使用熟悉的竞技场，因此完成速度快，设置简单。

此外，它使用 Unexpensive 硬件演示该程序将是 Emmanuel Abry，根据我实验室的学生的说法。对于此实验，使用 3 至 5 个月大的雄性、C 57 黑色、6 只野生型和转基因小鼠。该演示使用两条敲落线和窝产配对对照。

对于实验场地，使用干净消毒的小鼠笼子和 3 厘米的床上用品。接下来，准备相机设置。将其放置在笼底上方 58 厘米处，安装在定制的三脚架上。

在柜台上做一些标记，以表示笼子的位置。对于中心图像，将相机设置为以大约每秒 15 帧的速度录制 320 x 240 像素的视频。为了准备测试者，请尽可能将每种气味的浓缩物储存在溶剂中。

对于偏好测试，将花生酱在花生油中制备 10% 重量/体积的溶液。对于回避试验，用 98% 的甲基丁酸溶液。对于敏感性测试，在测试前 1 到 2 天从相同品系的小鼠收集雌性尿液。

将雌性腹部限制在笼子网格上方，并将她的尿液滴入塑料盘中。从几只雌性身上收集样本以标准化。对于个体差异，将所有样品拉入 1.5 毫升试管中，并储存在零下 20 摄氏度。

首先，让动物习惯化，将一只放在干净的笼子里，让它探索。在五分钟内，测试笼的环境应与家用笼的环境相似。在每个测试日重复一次习惯阶段，当习惯期结束时，开始记录并吸取 60 微升令人愉悦的气味。

在这种情况下，将花生酱涂在对面墙上的一面墙上，吸取等量的水。中性香味，将滴剂涂抹在每面墙上约 10 厘米处。现在让动物探索两分钟，然后停止录制并将鼠标放回它的家笼子里。

对每只要测试的鼠标重复该过程。始终使用新的测试笼。三到五天：完成所有偏好测试后，使用新的测试笼进行回避测试。

对于每只鼠标，执行回避测试。和吸引测试一样，只用回避气味代替令人愉悦的气味，即二甲基丁酸。对于敏感性测试，同一只小鼠的试验之间可以重复使用一个笼子。

因此，在笼子的水面上做标记，并准备在两次试验之间用 70% 乙醇浸泡的纸清洁短壁。在实验当天，用十倍稀释系列制作四种浓度的尿液。使用像回避测试这样的双蒸水，让每只动物习惯于测试笼 5 分钟。

然后首先将每只小鼠暴露在最高稀释度的尿液中，即 1 比 10， 000。记录时，将尿液稀释液涂抹在测试笼上，并将水涂抹在对面的墙壁上。与其他测试一样，让动物探索。

两分钟。此后，将动物转移到干净的老鼠笼中。在所有动物经历最低浓度后，清洁所有测试笼壁，并使用次浓尿液对每只小鼠重复测试。

继续此过程，直到测试出纯尿液。收集完实验的所有数据后，打开图像 J 中的视频进行调整和处理细节，这些视频使用描述的协议在文本协议中提供。两条不同的敲落线。

将 B 组和 C 组与垫料对照组进行了比较，A.A 等方差或不等方差的无方向学生 T 检验比较了基因型内气味和水之间的时间。使用单因素 inova 比较基因型之间的行为。实验组 B 和 C 均表现出对诱人的气味没有偏好 在回避测试中，对令人厌恶的二甲基丁酸气味的反应与 A 组和 B 组的预期一样，但 C 组对这种气味没有表现出回避行为。

在敏感性测试中，通过从与水一起度过的时间中减去与尿液一起度过的时间来获得吸引力阈值，水是 1 比 1000 稀释度的尿液的首选。而实验组 B 和 c 需要 100 倍的浓度才能表现出偏好。一旦掌握了，如果执行得当，这项技术可以在几个小时内完成，然后按照这个程序，可以执行其他方法，如嗅觉学习和消退，以研究嗅觉可塑性和学习。