Name: 慢性血栓栓塞性肺动脉高压和右心室功能的仔猪评估 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: 了解慢性血栓栓塞性肺动脉高压的仔猪模型建立方法，通过左肺动脉结扎和渐进性肺血管阻塞技术，结合超声心动图和右心室压力-容积环评估，为研究右心室功能障碍机制提供可靠的实验工具。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

作者感谢马里·拉内隆格医院外科研究实验室团队提供的技术支持和动物护理。VividE9 心脏超声系统（通用电气医疗系统）由法国大巴黎地区心血管-肥胖重点研究领域（CODDIM 编号 100158）资助项目提供经费支持。

本方案已获得本单位动物实验伦理委员会及机构动物福利委员会批准。所有动物均按照美国国家医学研究协会制定的《实验室动物护理原则》以及国家卫生研究院出版的《实验室动物护理与使用指南》（国家实验室动物资源研究所编制，NIH出版物第86-23号，1996年修订版）的规定，得到人道的照护与管理。
一般注意事项：必须根据“3R原则”（英国国家动物实验替代、优化与减少研究中心）尊重对待所有动物。手术操作必须严格保持无菌，且操作方式应与对人类实施手术相同。所有医疗器械必须处于无菌状态。
1. 麻醉方案
注意：使用体重为 20 kg（3 周龄）的大白猪仔。肺动脉高压逐步诱导建立。第一步通过左侧开胸术结扎左肺动脉（PA）。后续步骤在5周内每周进行一次肺动脉栓塞。所有操作均在全身麻醉下进行。
<ol>
	<li>在操作前 12 小时内不要喂食动物。</li>
	<li>对仔猪进行术前给药，于操作前 30 分钟&#160;在颈部肌肉注射盐酸氯胺酮（30 mg/kg）和阿托品（0.05 mg/kg）8。</li>
	<li>当猪只镇静后，插入耳缘静脉导管。</li>
	<li>插管前经静脉推注芬太尼（0.005 mg/kg）和丙泊酚（2 mg/kg）。经耳缘静脉注射顺式阿曲库铵（0.3 mg/kg），随后进行插管（使用 7 法式导管进行非选择性插管）9。</li>
	<li>在仔猪身上安装持续监测设备：持续心电图（EKG）、呼气末 CO2 和血氧饱和度监测8,9。在超声引导下经颈动脉置入动脉液体通路导管，以监测体循环动脉压8-10。</li>
	<li>以异氟烷（2%）联合 100% 氧气补充维持全身麻醉，并持续静脉输注芬太尼（0.004 mg/kg）和丙泊酚（3 mg/kg）。</li>
	<li>给予抗菌预防治疗，注射头孢西丁（1 g）和庆大霉素（80 mg）。</li>
	<li>通过注射纳布啡（0.01 mg/kg），每日三次（t.i.d.），预防术中和术后疼痛。</li>
	<li>每 15 分钟&#160;检查一次麻醉的完整性：无自主运动、心率稳定、血压和氧合状态稳定。</li>
	<li>使用兽用眼膏保护眼睛，防止麻醉期间角膜干燥。</li>
</ol>
2. 左肺动脉结扎
<ol>
	<li>将仔猪置于左侧卧位，剃除手术区域毛发，并用酒精溶液对皮肤进行消毒。使用局部无菌区域。</li>
	<li>通过左侧第4肋间的小切口开胸（5至10 cm）th 肋间隙。不要超过肩胛骨尖端后方。小心地将肺向膈肌方向牵开。</li>
	<li>找到理想的手术窗口后，牵开左侧奇静脉，游离左主肺动脉，随后使用不可吸收的2/0丝线结扎。 
	注意：切勿打开心包膜。</li>
	<li>逐层使用可吸收缝线关闭胸腔。放置胸腔引流管以排出术后气胸。在仔猪拔管后立即拔除胸腔引流管。</li>
</ol>
3. 右下肺叶肺动脉的栓塞
<ol>
	<li>全身麻醉后，将仔猪置于仰卧位。持续监测血氧饱和度、呼气末二氧化碳2，心电图（EKG）、平均体循环血压（mPA）和平均肺动脉压（mPAP）在整个手术过程中。</li>
	<li>在超声引导下经皮插入所有导管。经颈动脉插入6 French动脉导管用于血压监测，并通过颈静脉在距胸骨上切迹2 cm处以45°角方向穿刺，将8 French鞘管插入上腔静脉。</li>
	<li>在荧光透视引导下，通过8 Fr鞘管将5 French血管造影导管插入右肺动脉。导管尖端必须置于肺下叶的段动脉内。</li>
	<li>准备肺动脉栓塞材料：将1 ml含有N-丁基-2-氰基丙烯酸酯的软组织胶与2 ml脂溶性造影剂混合。 
	警告：避免皮肤或眼睛接触 N-丁基-2-氰基丙烯酸酯。</li>
	<li>当血管造影导管位置良好时，向肺动脉内注射0.2 ml至0.4 ml的制备液。通过测量mPAP/mPA比值评估栓塞耐受性，该比值不应超过0.5。如果血氧饱和度下降，则停止栓塞。 &#60; 90% 和/或平均肺动脉压（mPA）降至 60 mm Hg 以下和/或心输出量低于 2 L/min。</li>
	<li>移除血管造影导管和鞘管，对穿刺部位进行指压止血。</li>
</ol>
4. 血流动力学评估
<ol>
	<li>全身麻醉后，将仔猪置于仰卧位。在整个操作过程中持续监测血氧饱和度、呼气末二氧化碳（CO2）、心电图（EKG）、体循环血压（mPA）和肺动脉血压（mPAP）。</li>
	<li>根据氧饱和度（&#62; 95%），以尽可能低的吸入氧浓度（FiO2）对仔猪进行通气。</li>
	<li>在超声引导下经皮插入所有导管。将一根6 French动脉导管插入颈动脉，将一根8 French鞘管插入上腔静脉（穿刺点位于胸骨上切迹上方2 cm处，进针方向与皮肤呈45°角）。</li>
	<li>将一根7 French Swan-Ganz导管插入肺动脉主干。采用热稀释法测定心输出量，注射10 ml 4 °C的生理盐水。</li>
	<li>记录以下参数：体循环和肺动脉的收缩压、舒张压和平均压，心率，氧饱和度，右心房压，心输出量。</li>
</ol>
5. 右心室的超声心动图评估
<ol>
	<li>全身麻醉后，将仔猪置于仰卧位，并按照人类右心室筛查的指南进行经胸超声心动图检查。在呼气末暂停期间记录视频循环。</li>
</ol>
6. 采用导纳法进行压力-容积环评估
<ol>
	<li>全身麻醉后，将仔猪置于仰卧位。持续监测血氧饱和度、呼气末 CO2，心电图（EKG）、全身血压（mPA）和肺动脉血压（mPAP）在整个手术过程中。</li>
	<li>在右侧或左侧颈动脉插入一根6 French动脉导管，在左心室插入一根血管造影导管。在上腔静脉插入9 French鞘管，在右侧或左侧股静脉插入8 French鞘管，并在右侧或左侧股动脉插入动脉PiCCO导管。所有导管均在超声引导下经皮插入。</li>
	<li>根据制造商的建议对导纳探针进行压力和容积校准。通过采集5 ml动脉血样测量血液电阻率（Rho）。采集5 ml动脉血，排除注射器中的空气，并用该血样填充探针以测量血液电阻率。 10-13.</li>
	<li>通过上腔静脉的9Fr鞘管将导管插入右心室。在透视引导下准确定位导管末端。将导管末端置于右心室心尖部，并尽可能深入地插入心室。</li>
	<li>控制环路的质量。图6)</li>
	<li>通过股静脉将可扩张球囊插入下腔静脉，将球囊末端置于右心房下方。在荧光透视引导下进行。</li>
	<li>记录右心室在基础状态及下腔静脉阻断期间的压力-容积环，方法如前所述10-12. (图7)</li>
</ol>
7. 右心室心内膜心肌活检
<ol>
	<li>全身麻醉后，将仔猪置于仰卧位。在整个操作过程中持续监测血氧饱和度、呼气末二氧化碳（CO2）、心电图（EKG）、体循环血压（mPA）和肺动脉血压（mPAP）。</li>
	<li>经皮插入10 French鞘管至上腔静脉。在右心房内插入7 French Swan-Ganz（SG）导管和一根长的7.5 French导管鞘。当SG导管尖端准确定位于右心室（RV）时，充盈SG导管的球囊，借助球囊将长鞘导管推送至右心室内。随后放空球囊并撤出SG导管，保留长鞘导管于右心室内。通过透视和超声心动图确认长鞘导管尖端位置正确。</li>
	<li>将活检钳经长鞘插入，在超声、透视及心电图（EKG）监测下进行心内膜心肌活检。</li>
</ol>
8. 术后常规护理注意事项
<ol>
	<li>手术后，仅在仔猪自主呼吸功能恢复后进行拔管。</li>
	<li>术后用药：肌肉注射头孢噻肟（1 g），每日一次，连续5天；并给予适当的镇痛治疗（布托啡诺，肌肉注射，0.01 mg/kg，每日两次，持续10天）。</li>
	<li>动物在完全恢复之前，不得与其他动物同处。</li>
</ol>
9. 安乐死方法
<ol>
	<li>在以下情况下对动物实施安乐死：实验结束时、一周内体重减轻15%或以上、无法正常进食、厌食、无法治疗的感染、疼痛或其他疾病、病情过于严重&#160;：发绀，严重呼吸困难</li>
	<li>使用8%七氟烷进行全身麻醉后，注射高剂量丙泊酚（0.5 mg/kg）并联合致死剂量氯化钾（0.2 g/kg）。当心脏停搏于舒张期时，取下心脏和肺组织块，用于组织学和分子学研究。</li>
</ol>

<ol><li>Simonneau, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Updated+clinical+classification+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Updated clinical classification of pulmonary hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 54, Suppl 1. S43-S54 (2009).</li>
<li>Dartevelle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. 23 (4), 637-648 (2004).</li>
<li>Hoeper, M. M., Mayer, E., Simonneau, G., Rubin, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Circulation. 113 (16), 2011-2020 (2006).</li>
<li>Galie, N., Kim, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+microvascular+disease+in+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Am+Thorac+Soc%22%5BJournal%5D)">Pulmonary microvascular disease in chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Proc Am Thorac Soc. 3 (7), 571-576 (2006).</li>
<li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+in+patients+with+idiopathic%2C+familial%2C+and+anorexigen-associated+pulmonary+arterial+hypertension+in+the+modern+management+era%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Survival in patients with idiopathic, familial, and anorexigen-associated pulmonary arterial hypertension in the modern management era.</a> Circulation. 122 (2), 156-163 (2010).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+right+heart+failure%3A+a+window+for+translational+research+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Experimental models of right heart failure: a window for translational research in pulmonary hypertension.</a> Semin Respir Crit Care Med. 34 (5), 689-699 (2013).</li>
<li>Mercier, O., Fadel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%3A+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension: animal models.</a> Eur Respir J. 41 (5), 1200-1206 (2013).</li>
<li>Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Fruhauf, N. R., Kuhne, C. A., Broelsch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+handling+and+anesthesia+for+experimental+surgery+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs.</a> J Surg Res. 130 (1), 73-79 (2006).</li>
<li>Flegal, M. C., Kuhlman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+monitoring+equipment+for+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Anesthesia monitoring equipment for laboratory animals.</a> Lab Anim (NY). 33 (7), 31-36 (2004).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+reserve+in+a+piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Right ventricular reserve in a piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. , (2014).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+plasticity+in+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload.</a> J Heart Lung Transplant. 33 (2), 194-202 (2014).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+indices+of+right+ventricular+function+are+markers+of+ventricular-arterial+coupling+rather+than+ventricular+contractility%3A+insights+from+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload.</a> Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14 (12), 1140-1149 (2013).</li>
<li>Kass, D. A., Yamazaki, T., Burkhoff, D., Maughan, W. L., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relationships+by+the+conductance+%28volume%29+catheter+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Determination of left ventricular end-systolic pressure-volume relationships by the conductance (volume) catheter technique.</a> Circulation. 73 (3), 586-595 (1986).</li>
<li>Mercier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 3 (4), 908-915 (2013).</li>
<li>Brooks, H., Kirk, E. S., Vokonas, P. S., Urschel, C. W., Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+the+right+ventricle+under+stress%3A+relation+to+right+coronary+flow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Performance of the right ventricle under stress: relation to right coronary flow.</a> J Clin Invest. 50 (10), 2176-2183 (1971).</li>
<li>Boulate, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+microvascular+lesions+regress+in+reperfused+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Pulmonary microvascular lesions regress in reperfused chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> J Heart Lung Transplant. , (2014).</li>
</ol>

无利益冲突需披露。

与人类临床实践一样，所有外科手术过程中都必须遵守无菌操作规程。在O. Mercier描述的原始CTEPH幼猪模型中 等 经胸骨正中切口打开心包后，结扎左侧肺动脉14由于心包被保持开放状态，右心室与心包之间的相互作用受到损害，从而延缓了右心衰竭的发生。研究表明，当心包处于开放状态时，右心室扩张对心输出量的不利影响显著降低。15因此，在进行左肺动脉结扎时，似乎最好不打开心包。尽管左外侧开胸术技术上更具挑战性（必须注意保护膈神经和左肺），且存在疼痛控制的问题，但该术式为心包外左肺动脉结扎提供了最佳入路。由于单纯左肺动脉结扎不会导致平均肺动脉压（mPAP）升高，因此需对右下叶肺动脉进行渐进性栓塞。本模型的第二个关键点在于右下叶肺动脉栓塞后发生大块肺栓塞的风险。每次注入2 ml N-丁基-2-氰基丙烯酸酯，分次注射，每次注射之间评估血流动力学耐受性。平均肺动脉压与平均主动脉压（mPAP / mPA）之比不应超过0.5。此外，若血氧饱和度下降，则应停止栓塞操作。 &#60; 90% 和/或平均肺动脉压（mPA）降至 60 mmHg 以下和/或心输出量低于 2 L/min。
<p ...

慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）是肺动脉高压（PH）的一种亚型，由一次或多次急性肺栓塞后持续存在并机化的血栓导致肺血管床慢性阻塞所致1-3。阻塞性和非阻塞性微血管病变共同作用，进一步增加肺血管阻力4。右心室最初通过代偿性肥厚以维持心输出量。若不进行治疗，右心室将逐渐扩张并最终失代偿。在现代医学背景下，尽管已有多种靶向治疗手段，肺动脉高压仍是一种进行性且常导致死亡的疾病5。大量研究表明，右心室（RV）对压力负荷的适应能力是决定PH患者生存预后的关键因素。因此，阐明右心室从适应性重构向失代偿性重构转变的机制，是开发新疗法和优化治疗策略的核心。由于肺动脉高压属罕见病，且在这些病情脆弱的患者中几乎无法获取组织样本，因此必须依赖实验研究。此外，在临床前阶段必须明确：一种对肺血管具有益处的药物是否会导致右心室功能受损。
多年来，人们已开发出多种肺动脉高压（PH）和右心室（RV）衰竭的实验模型，这些模型各有优势与局限性6,7。在药理学小鼠模型（野百合碱、SU5416、低氧）中，PH 和 RV 衰竭继发于严重的炎症、缺血或毒性应激，可能引发多种“副作用”，并对分子通路分析造成偏倚。此外，在小鼠模型中进行右心室心内膜心肌活检极具挑战性，通常需以牺牲动物为代价。较大动物的手术模型生理学特性更接近人体，但部分模型并不影响肺血管系统（如肺动脉束带、体-肺分流）或仅诱发急性 PH 和右心室衰竭（急性肺栓塞）。本文旨在描述一种更具代表性的猪仔慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）原创模型。该大动物模型允许重复进行临床实践中常用的无创和有创检测（如右心导管检查），以追踪肺血流动力学和右心室功能的动态变化。

慢性血栓栓塞性肺动脉高压及仔猪右心室功能评估

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

本文描述了一种与慢性右心室（RV）功能障碍相关的慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）的原创性仔猪模型。通过逐步阻塞肺血管床，在3周龄的仔猪中诱导肺动脉高压（PH）。首先经小切口开胸术结扎左侧肺动脉（PA）；随后在透视引导下，每周对右肺下叶进行一次n-丁基-2-氰基丙烯酸酯栓塞，持续5周。与假手术动物相比，经右心导管测得的平均肺动脉压（mPAP）、右心房压及肺血管阻力（PVR）在5周后均呈进行性升高。通过经胸超声心动图评估右心室（RV）的结构和功能重塑（包括RV直径、RV壁厚度、RV收缩功能）。采用导纳法进行压力-容积环（PVL）分析，评估右心室弹性（elastance）及右心室-肺动脉耦合功能。同时对肺组织和右心室进行组织学检查。通过重复经皮穿刺心内膜心肌活检，可对右心室新鲜组织进行分子学分析。利用分子分析和病理学方法，从肺活检样本中研究阻塞区与非阻塞区的肺微血管病变。此外，该模型在动物中表现出一系列肺动脉高压严重程度，具有良好的可靠性和可重复性。该模型成功再现了人类CTEPH疾病的多个特征，为深入理解右心室超负荷及肺微血管病变的潜在机制（如线粒体功能障碍、炎症反应）以及探索靶向治疗、细胞治疗和基因治疗等新疗法提供了新的研究前景。

可行性
本实验室于2009-2010年建立了这种慢性栓塞性肺动脉高压的仔猪模型。自2011年以来，我们共使用了70头仔猪，完成了63个成功模型。根据我们的经验，建立该模型需要一定的学习过程。
在死亡率方面，我们观察到5例非计划性死亡（7.1%），主要发生在经验积累的初期阶段。两个关键步骤分别为肺动脉栓塞和心内膜心肌活检。其中4只仔猪在肺动脉栓塞后因严重的急性右心衰竭死亡，1只仔猪死因不明。在发病率方面，4只仔猪（5.7%）在操作过程中出现了严重并发症。
在进行心内膜心肌活检过程中，两只仔猪因右心室游离壁穿孔需紧急实施心包引流，并紧急行心包缝合术。所有病例术后恢复顺利。自采用超声引导进行心内膜心肌活检以来，未再观察到此类并发症。
另外两只仔猪在肺动脉结扎术后出现了脓胸，术后7天需实施安乐死。

<p class="jove_co...

通过逐步阻塞肺动脉，在仔猪中诱导出慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）和右心室（RV）功能障碍。其表现与CTEPH患者中观察到的情况极为相似。该动物模型对于开展CTEPH及右心室衰竭的病理生理学和治疗研究将是一个非常有用的工具。

一种与慢性右心室（RV）功能障碍相关的慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）的原创性仔猪模型被描述。

本实验的总体目标是建立一种可靠且可重复的幼猪慢性血栓栓塞性肺动脉高压模型，以研究慢性右心室功能障碍的机制。该模型的建立首先在三周龄幼猪中进行左主肺动脉结扎术。第二步，通过逐步阻塞肺血管床来增加平均肺血管阻力。接下来，通过超声心动图评估右心室功能，并通过右心室压力-容积环测定来测量右心室与肺动脉之间的紧密耦合关系。最后一步，通过心内膜心肌活检获取新鲜的右心室组织。最终，可通过组织学分析评估肺动脉和右心室的静息状态下的重构情况。该模型可用于回答有关右心室功能障碍潜在机制的关键问题，例如，哪些因素在心肌细胞的代谢或线粒体功能障碍中发挥作用。开始操作前，将连续监测装置连接至一只三周龄的麻醉仔猪。插入导管至仔猪耳静脉并注射麻醉剂。随后在影像学引导下，经颈动脉插入动脉液体导管，以监测全身动脉压。接下来，将仔猪置于左侧卧位，剃除手术区域的毛发，并用酒精溶液对皮肤进行消毒。然后，通过第四肋间长约5至10厘米的左侧侧胸切口开胸，注意不要超过肩胛骨尖端的后方，并小心将肺向膈肌方向牵开。当找到理想的手术视野后，牵开左侧上腔静脉，游离主左肺动脉，随后使用不可吸收的2.0丝线进行结扎。在透视引导下操作，注意不要打开心包膜。通过8 French鞘管插入5 French血管造影导管，直至右肺动脉，使导管尖端进入肺下叶的段级肺动脉。导管就位后，向肺动脉内注射0.2至0.4毫升新鲜配制的肺动脉栓塞材料。然后通过测量平均肺动脉压与平均体循环血压的比值来评估栓塞的耐受情况。不得重复进行栓塞。若氧饱和度低于90%，或平均体循环血压下降至60毫米汞柱以下，和/或心输出量低于每分钟2升，则停止操作。平均肺动脉压必须升高10毫米汞柱。为进行血流动力学评估，将仔猪置于仰卧位，按照先前所示方法进行持续监测，并在全身麻醉下对仔猪进行导管插入。经皮插入一根10法式导管至上腔静脉，并将一根7法式 Swan-Ganz 导管置入肺动脉主干。然后通过 Swan-Ganz 导管注入 10 毫升 4 摄氏度的生理盐水，以评估心输出量。通过超声心动图评估右心室。将仔猪置于仰卧位。然后根据人类右心室筛查指南进行经胸超声心动图检查。在全身麻醉下持续监测，于呼气末暂停时记录视频循环，用于压力-容积环评估。将一根8F动脉导管插入右侧或左侧颈动脉，同时将一根血管造影导管插入左心室。然后将12法式鞘管插入下腔静脉，8法式鞘管插入右侧或左侧股动脉，并将动脉微导管插入右侧或左侧股动脉。接下来，根据制造商的建议对导纳探头进行压力和容积校准。为测量血液电阻率，采集5 mL动脉血，排除注射器中的空气后填充探头。然后通过上腔静脉中的9 French鞘管将导管插入右心室。在荧光透视引导下，将导管尖端送入右心室心尖部，并尽可能将导管的其余部分插入心室。在确认探头的容积节段在舒张期和收缩期呈现出良好环形形态后，经股静脉将一次性使用的球囊导管插入下腔静脉CVA，将其末端置于右心房下方不远处。然后记录右心室在基础状态及下腔静脉阻断期间的压力-容积环，以经皮方式进行右心室心内膜心肌活检。将10 French鞘管插入上腔静脉，将7 French Swan-Ganz导管和一根长的7.5 French导管鞘插入右心房。当Swan-Ganz导管尖端到达右心室内时，充盈导管气囊，并将长鞘导管沿气囊推送至右心室内。然后使球囊放气，并取出探头，保留长鞘管在原位。最后，将活检钳插入长鞘管中，在超声造影、X线透视和心电图监测下进行心内膜心肌活检。如术中所见，阻塞的左肺、右下叶及纵隔胸膜区域的肺系统血管和支气管循环出现增生肥大，黏膜下血管粗大且数量增多。在阻塞的左肺及右下叶还观察到支气管小动脉。 这些图像显示，在发生阻塞性肺血管病变后，受累区域的血管生成增加，同时在左肺和右肺下叶的阻塞区域观察到血管中膜增厚，而在右肺上叶的非阻塞区域则出现血管充血性血管病变。如图像所示，右侧肺下叶动脉因未溶解的栓子（成分为正丁基-2-氰基丙烯酸酯和纤维蛋白）导致慢性阻塞，且在六周后仍可见。经多次栓塞后，右心室和右心房区域、右心室直径以及右心室壁厚度均有所增加。术中观察到右心室显著扩大，并伴有右心室肥厚。右心室肥厚程度的增加与平均肺动脉压升高相关。进一步的压力-容量分析显示，随着右心室动脉耦合功能的形成，右心室功能受损，并伴有其耦合功能的相应下降。该模型为研究神经功能障碍领域的研究人员探索代谢和线粒体疾病提供了途径，同时也为开展大量临床治疗研究创造了条件。

chronic-thromboembolic-pulmonary-hypertension-assessment-right

Research

科研

JoVE Journal

Medicine

医学

慢性血栓栓塞性肺动脉高压和右心室功能的仔猪评估

本文提供了一种用于评估小鼠右心室大小和肺动脉高压的超声心动图检查方案。应用范围包括心肌病和肺血管疾病转基因及毒素诱导小鼠模型的表型确定以及系列评估。...

小鼠右心的超声心动图评估

右心室（RV）功能障碍在心血管疾病的发病机制中至关重要，但目前可用于评估右心室功能的方法十分有限。近年来超声成像技术的进步为长期纵向研究右心室提供了无创且准确的选择。本文中，我们详细描述了一种利用右心室压力超负荷小鼠模型进行的逐步超声心动图检测方法。...

经胸超声心动图评估肺动脉缩窄小鼠模型中右心室结构与功能

肺动脉高压与肺动脉脉动性、收缩性和弹性的显著降低相关，这会导致肺动脉压力和肺血管阻力升高。本研究利用低氧幼猪模型证明，使用一种新开发的脉动导管改善肺动脉可塑性，可有效改善低氧性肺动脉高压。...

增加肺动脉搏动性血流可改善仔猪低氧性肺动脉高压

我们介绍了一种通过诱导急性呼吸窘迫综合征（ARDS）在猪模型中建立右心室功能障碍的实验方案。我们展示了通过在主动脉和肺动脉周围放置血流探头来侵入性监测左心室和右心室心输出量的方法，以及在主动脉和肺动脉内进行血压测量的技术。...

ARDS 大动物模型中主动脉与肺动脉血流动力学的有创监测

我们提出了一种在患有慢性肺动脉高压的大动物模型中诱导并表型分析急性右心衰竭的实验方案。该模型可用于测试治疗干预措施、建立右心功能评估指标 或加深对急性右心衰竭病理生理机制的理解。...

在慢性血栓栓塞性肺动脉高压大动物模型中诱导与表型分析急性右心衰竭

本文介绍了一种闭胸法，用于在急性右心室功能障碍的猪模型中进行基于导纳的双心室压力-容积环记录。...

采用导纳导管在猪模型中进行闭胸双心室压力-容积环记录

本文描述了建立严重右心室压力超负荷的手术技术和实验方法，以模拟其适应性和非适应性表型。...

一种用于肺动脉高压和右心室衰竭的大型动物模型：绵羊左肺动脉结扎与进行性主肺动脉缩窄

本方案描述了在肺动脉高压大鼠模型中，对右心室形态和功能进行超声心动图表征的方法。...

肺动脉高压大鼠模型中右心室功能的全面超声心动图评估

详细介绍右心室功能评估方法将提升肺动脉高压研究的质量和可靠性，为未来的研究提供坚实的框架，并增强不同实验室之间的可重复性。...

肺动脉高压实验模型中右心室功能的评估

通过测量肱动脉血流介导的扩张、主动脉脉搏波速度以及血管内皮细胞蛋白表达，可以评估慢性肾病患者的血管功能障碍程度及其相关的生理机制。...

慢性肾脏病患者血管功能的评估

了解慢性血栓栓塞性肺动脉高压的仔猪模型建立方法，通过左肺动脉结扎和渐进性肺血管阻塞技术，结合超声心动图和右心室压力-容积环评估，为研究右心室功能障碍机制提供可靠的实验工具。

慢性血栓栓塞性肺动脉高压及仔猪右心室功能评估

探索更多视频