Milk Collection in the Rat Using Capillary Tubes and Estimation of Milk Fat Content by Creamatocrit

该程序的总体目标是描述如何手动从哺乳大鼠那里收集牛奶以进行牛奶成分的实验室分析。这种方法可用于帮助回答母婴健康领域的关键问题，例如母体饮食如何影响乳汁成分。该技术的主要优点是可以由一名研究人员进行，无需任何专门的真空或抽吸设备。

No.To 开始，请在挤奶前将母鼠与她的后代分开至少 5 分钟。接下来，收集挤奶程序所需的所有材料，如下所示。然后将吸水工作台垫放在加热的手术台上，或使用单独的加热垫来防止挤奶过程中母带的热量散失。

接下来，检查麻醉系统，以确保系统在手术前有足够的氧气和异氟。然后将用于初始麻醉诱导的面罩安装到机器上，并将维护面罩放在附近。打开氧气罐，将流量设置为每分钟 1 升。

然后打开异氟的流量，将其流量设置为 5%麻醉后，将坝切换到维护面罩。通过检查是否缺乏踏板反射来确认足够的麻醉水平。然后将挡水坝仰卧放在吸收性工作台垫上。

将 isof fluorine 的流量减少到 2% 到 3%在整个过程中持续监测 dam 并根据需要调整 isof fluorine 的流量，以避免疼痛和呼吸抑制。接下来，使用无菌酒精湿巾或清洁垫，使用配备 25 号针头的 1 毫升注射器对一小瓶催产素进行消毒，吸取 0.1 毫升催产素。然后将针头插入坝体腹部的右下象限，针头以 15 至 30 度的角度指向头部，深约 0.5 厘米。

向后拉柱塞以确保注射前出现负压。如果没有抽出液体，则注射催产素并立即将针头和注射器丢弃到生物危害容器中。等待大约 5 到 15 分钟，让催产素刺激乳汁。

在此期间放奶，选择要收集牛奶的奶瓶。使用修剪器轻轻去除所选四肢周围的毛皮，因为毛皮可能会导致样品采集困难。然后用温水清洁四肢。

准备至少两个地点，因为收集牛奶可能需要多个地点。乳汁喷出后，轻轻挤压 Tet 的底部以手动排出乳汁。收集时，将奶滴收集到 50 微升毛细管中。

装满后，通过触摸用于将牛奶从吸到微量离心管侧面的管子末端，将牛奶从毛细管分配到无菌微量离心管中。然后使用连接到 1 毫升注射器的 18 号针头吹出未吸入试管的任何牛奶。重复牛奶收集并将其转移到微量离心管中，直到收集到足够的牛奶。

对于所选分析，尝试将 dam 处于麻醉状态的总时间限制在一小时以内。挤奶完成后，关闭氟和氧气的流动，并从母带上取下面罩。继续监测 dam，直到它恢复足够的意识以维持胸骨卧位。

如果不需要进一步分析，请在零下 80 度下吹牛奶。为了准备 CCR 测量，直接从 Tet 将 15 至 20 微升牛奶装入微量血细胞比容管中。然后用粘土密封剂密封管的末端。

将毛细管放入血细胞比容旋转器中，密封凹痕指向外部，并确保离心机平衡。然后以 13， 700 倍 G 离心样品 2 分钟。样品完成旋转后，从离心机中取出试管。

观察样品分离成乳霜层和透明层的过程。使用尺子或卡尺测量并记录管中液体的总长度以及脂肪或奶油层的长度。使用此信息计算 CCR，如随附的文本协议中所述，以确定怀孕和哺乳期间的饮食如何影响乳汁成分。

断奶时从 Worcester 母牛那里收集牛奶样品，这些母猪饲喂高蛋白、高益生元纤维或控制饮食。从高益生元纤维饮食的母猪收集的牛奶具有最高的 C 血细胞比容、较差的浓度和能量值。然而，当涉及到蛋白质时，这些差异在统计学上并不显著。

然而，从高蛋白饮食的母猪中收集的牛奶的蛋白质浓度最高。尽管这种差异在统计学上并不显著。一旦掌握，如果作正确，该技术可以在坝的初始麻醉点后不到一个小时内完成。

尝试此程序时，请务必记住持续监测 dam，以确保在此程序后处于麻醉状态时不会发生呼吸抑制。质谱法等其他方法可用于回答其他问题，例如测定牛奶的低聚糖组成。看完这个视频后，您应该对如何手动收集哺乳大鼠的乳汁有了很好的了解。