2016年8月30日
为了研究满足多种检测需求的简单制造方法,我们创建了一个由棉材料制成的液体吸收通道系统。该设备用于建立多检测平台,并解决通常影响基于侧向流动的生物医学设备的污染问题,用于亚硝酸盐、总蛋白和尿胆原的临床尿液分析。
该协议的总体目标是用一种容易获得的材料棉花制造一种分析设备,用于您的分析。这种技术的主要优点是该设备易于制造。它的成本非常低,可用于多次检测,并且组装速度快。
该设备的分析方法对检测样品和反应污染很敏感。演示该程序的是 Shang-Chi Lin,他在创新该方法方面发挥了重要作用。首先准备试纸设备。
首先,使用去离子水液滴的标准接触角测量来确定试纸清洁棉的疏水性。然后,通过将清洁棉切成 5.5 厘米乘 1 厘米的块,开始制造基于棉花的分析设备。使用切纸刀。
下一步是在一张层压薄膜上钻三个直径为 0.5 厘米的孔组。成行钻孔,孔之间留出一厘米的距离。每组孔构成一个试纸,一张标准层压膜上最多可安装 36 条试纸。
接下来,将清洁棉夹在有孔的层压膜和未钻孔的层压膜之间。然后,使用标准层压机封装设备。现在,从组件上切割单个 5.5 x 1 厘米的试纸设备。
要制作三种测试溶液的标准曲线,需要 48 条。在每个测试区域上,使用锋利的刀片从每个测试区域的中心到纵向装置的亲水层制作一个小通道。小心,不要只切到设备的一半。
现在,将直径为半厘米的色谱纸盘插入三个孔中的每一个。层压膜应该有一个小唇,垫子边缘可以塞在下面。对于尿液分析条,用亚硝酸盐指示剂溶液涂覆亚硝酸盐测定垫。
用 BSA 指示剂溶液涂布蛋白质测定垫。并在尿胆原测定垫上涂上尿胆原指示剂。在继续之前,让条带在环境温度下完全干燥。
对于制备的每种标准品,将制备好的装置的吸收端浸入标准溶液中 10 秒钟。每条应吸收 200 至 300 微升溶液。为每种被测标准浓度准备三条试纸。
在室温下等待 10 分钟,让比色反应完成。现在,扫描设备以分析每个测试板的颜色。在 RGB 模式下以 600 dpi 使用桌面扫描仪。
使用 ImageJ 等标准软件分析扫描的图像。打开扫描的图像文件后,在菜单命令中选择图像,然后选择 类型 将 RGB 图像转换为 8 位灰度。然后,使用工具栏中的椭圆工具选择测试板分析区域。
接下来,在菜单命令中选择 Analyze,然后选择 Measure 以分析颜色强度。根据平均强度结果,制作测定的标准曲线。在这种情况下,使用二次模型拟合亚硝酸盐测定的标准曲线,并使用线性回归模型拟合总蛋白和尿胆原的标准曲线。
在所制造装置的疏水界面上,测量了外部棉的接触角 127 度,或多或少 5 度。使用这些设备,制作标准曲线以确定每次检测的检测限。对于亚硝酸盐,检测限为 0.147 毫摩尔。
对于牛血清白蛋白,蛋白质测试溶液,检出限为 3.7 μmol。对于尿胆素原,检测限为 4.9 毫克/升。看完这个视频后,您应该对如何制造具有外层疏水性的棉花诊断设备有一个很好的了解,这有助于避免污染。
一旦掌握,如果执行得当,这项技术可以在一两个小时内完成。在尝试此程序时,通过接触角测量确定清洁棉外层的疏水性非常重要。
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本研究介绍了一种由棉质材料制成的流体吸收通道系统,旨在用于多种检测应用。该装置解决了基于侧向流动的生物医学设备中普遍存在的污染问题,特别是在临床尿液分析中的应用。
这种基于棉花的分析装置为资源有限环境下的多分析物检测提供了一种低成本、可快速部署的解决方案。通过利用纤维素纤维天然的吸收性和疏水性,该平台实现了抗污染的侧向流动检测,适用于临床尿液分析。其简单性和可扩展性可支持生物制药研发中的早期生物标志物筛查和检测方法开发工作流程。
该设备通过提供一种快速、低门槛的尿液分析物定量方法,适用于从早期发现到临床前研究的工作流程,支持先导化合物筛选中的决策判断。