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DOI: 10.3791/53772-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
在这里,我们提出了一个方案来评估清醒猪、休息和分级跑步机运动期间的心肺功能。慢性器械作允许不受心脏抑郁麻醉剂影响的重复血流动力学测量。
该手术的总体目标是对动物进行慢性仪器检查,以便在患有和不患有心血管疾病的警觉动物的心肺压力测试期间进行血流动力学测量。这种方法可以帮助回答心血管领域的关键问题,例如代谢综合征如何影响左心室功能和灌注,从而导致射血分数保留的心力衰竭的发展。该技术的两个主要优点是血流动力学测量和血液样本是从清醒的动物那里获得的,并且该技术可以在休息和心血管压力(如运动)期间进行。
该技术的意义可以延伸到肺动脉高压的早期诊断,因为肺微血管功能以及右心室功能和灌注可以在疾病引入后的明确阶段进行测量。这种技术的视觉演示是必不可少的。由于该血管的血管痉挛,很难学习如何在冠状动脉周围放置流量探针。
此外,由于该血管相对于开胸术的位置,因此很难将流量探针放置在主动脉周围。演示该程序的是我们实验室的技术人员 Annemarie Verzijl。为动物准备手术后,在皮肤上做一个切口,从肩胛骨左下角尾部开始 1 厘米,然后向下切开至左腋窝。
切口后,使用透热疗法烧灼皮肤中的血管。接下来,使用透热疗法的切割方式,切开前锯肌和胸大肌。继续使用透热疗法烧灼肌肉层中的血管。
现在,使用钝器解剖,小心地分割第 4 左肋间隙的肋间肌。使用蚊子夹完成此作。然后暴露左肺的肋面,该表面覆盖着脏层和壁层胸膜。
接下来,小心地刺穿胸膜的两层并撕开它们,进入胸膜腔。使用胸廓牵开器,分开伤口和肋骨的边缘,然后用力将组织推开,从而改善暴露。要暴露心脏和大血管,请向尾部推左肺并用湿纱布将其楔入到位。
从钝性解剖开始这部分手术,以去除胸降主动脉周围约 2 平方厘米的结缔组织。接下来,使用不可吸收的 USP 3-0 编织丝缝合线在主动脉壁上放置三针荷包线缝合线。然后用不锈钢 16 号针穿过缝合线穿透主动脉血管壁。
沿着针头,将充满液体的导管的尖端插入主动脉。然后将钱包线缝合在一起并系好。为了固定导管,将多余的缝合线缠绕在环上方的导管上 3 次,将其系好,并在其插入部位添加约 1 厘米颅骨的新缝合线。
现在将充满液体的导管连接到连接到计算机的校准压力传感器。因此,在后续步骤中监测平均动脉压。接下来,在不损伤膈神经的情况下,用交叉切口打开心包。
在切口下方,用 Farabeuf 牵开器识别肺动脉并轻轻拉动尾部,露出升主动脉和主动脉弓。暴露主动脉后,使用 Metzenbaum 剪刀在升主动脉和肺动脉之间的结缔组织中切开 1 厘米。现在连接流量探针。
首先,使用缝合线将橡皮筋绕在血管周围。其次,将流量探头测量装置连接到橡皮筋上。第三,将流量探头连接到电脑,第四,检查心输出量信号,确认探头位置正确。
下一步是暴露和解剖左冠状动脉前降支的近端部分。首先,用镊子提起组织。然后,使用 Metzenbaum 剪刀在纸巾上做一个小切口。
然后用棉签小心地从动脉中梳理出组织。为了确保冠状动脉被完全解剖,请在冠状动脉下方放置一个小的直角蚊夹。当冠状动脉发生血管痉挛时,喷洒 10% 利多卡以放松血管。
使用相同的技术,将充满液体的导管放置在肺动脉、右心室、左心室和左心房中。现在所有导管都应该连接到计算机。然后用连接到冠状静脉导管的缝合线平行于前室间冠状静脉缝合。
缝合后,用冠状静脉导管的 20 号针刺穿静脉,然后静脉插入导管套管。然后用现有的缝线固定导管。取下针并连接到延长线。
现在将冠状动脉血流探头放在先前解剖的左前降支冠状动脉周围。放置探头后,检查计算机上的冠状动脉血流信号,确认血流探头放置正确。冠状动脉血流信号的形状应与此处显示的形状相似。
通过做一个 1.5 厘米的切口开始这一阶段的手术,在尾部约 8 厘米处平行于第一个切口。然后使用一个大的弯曲蚊夹,皮下将引流管从胸膜腔引出,穿过第 6 肋间隙到达该切口。将引流管连接到抽吸装置,以排出胸部剩余的液体。
接下来,使用一个大的弯曲蚊子夹将流量探针单独穿过第 3 个左肋间隙和肋骨上方的肌肉。将充满液体的导管穿过第 3 或第 5 左侧肋间隙。首先,夹住充满液体的导管。
接下来,取下三通旋塞阀以尽量减少穿孔区域。第三,刺穿肋间肌。现在,用不可吸收的 USP 2-0 编织丝固定流量探头和充满液体的导管。
在肋间肌上使用 purse string 缝合线。这种缝合还将防止在恢复负胸内压后漏气。接下来,在皮肤上向左约 2 厘米处做三个切口,并与脊柱平行。
使这三个切口长 3 厘米,彼此相距 3 厘米。现在从喙部切口部位到背部切口处,在左侧背阔肌下方刺穿套管针。然后使用套管针,将流量探针和液体导管连接到背部。
隧道完成后,将旋塞阀放在充满液体的导管上并取下夹子。抽取一些血液以去除血凝块和气泡。然后以每毫升 1, 000 单位的浓度用肝素填充充满液体的导管,并以每毫升 5, 000 单位的剂量用肝素填充冠状静脉导管。
通过在两个不同的部位将第 4 肋间隙的肋骨拉在一起来闭合胸部。使用不吸收的 USP 6 编织聚酯。然后用跑步缝合前锯肌和胸大肌。
使用不可吸收的 USP 2-0 编织丝,用正在运行的皮下缝合线闭合皮肤。然后缝合导管之间背侧的切口。首先,直接在皮肤上打一个结以闭合切口。
然后用另一个距离皮肤约 1 厘米的结将导管固定在缝合线上。用聚乳糖缝合线缝合流量探针,以免流量探针线被缝合线切断。然后小心地取出引流管,同时对切口的颅侧施加压力,以恢复胸膜腔中的负压。
现在通过用荷包线缝合切口并用凡士林密封伤口来完成手术。遵循有关如何恢复动物以及如何进行跑步机实验的文本协议。让猪以每小时 5 公里的速度运动导致心输出量翻倍。
观察到体内耗氧量增加了两倍。这是由于心输出量的增加加上血红蛋白浓度的增加和体内氧提取的增加。这主要是通过心率的增加和每搏输出量的小幅增加来实现的。
左心室收缩力的增加促进了每搏量的增加,左心室压力的一阶导数最大值的增加以及左心室舒张率的增加和左心房压力的增加,这是左心室的充盈压。全身血管舒张的发生表现为全身血管传导的增加和全身血管阻力的降低。这几乎完全容纳了心输出量的增加,因此平均主动脉压仅略有增加。
文本协议中提供了其他几个参数的进一步解释。看完这个视频后,你应该对如何在随后的心血管实验中对动物进行慢性仪器进行血流动力学测量有一个很好的了解。
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