Name: 鼠前列腺微解剖和手术去势 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: 学习小鼠前列腺显微解剖与手术去势技术，用于研究激素剥夺对前列腺癌发生的影响。该方法可单独分析各前列腺叶，观察病理过程与激素变化，为癌症研究提供可重复实验方案。

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本手稿中的部分图示由 Bart O. Williams 实验室慷慨提供。作者的研究得到了美国国家癌症研究所基金 U54CA143803、CA163124、CA093900 和 CA143055 的资助。

本方案符合并遵循约翰斯·霍普金斯大学机构动物护理和使用委员会制定的指南。
1. 小鼠前列腺的显微解剖
<ol>
	<li>根据机构动物护理和使用指南，采用二氧化碳窒息法或其他经批准的方法处死小鼠。</li>
	<li>将小鼠仰卧固定在解剖板上，用大头针穿过四只脚掌进行固定。</li>
	<li>用70%乙醇喷洒腹部。</li>
	<li>用镊子夹住下腹部皮肤，使用剪刀在阴茎开口前方约1 cm处剪开皮肤和腹膜，注意不要损伤任何器官。</li>
	<li>从下腹部开始，沿腹部两侧向上剥离皮肤和腹膜至肋骨区域，暴露腹膜腔。</li>
	<li>辨认膀胱和泌尿生殖道，并通过轻轻移开脂肪和其他器官将其暴露出来。</li>
	<li>用镊子夹住靠近尿道基部的输精管，并将其撕离。</li>
	<li>对另一侧输精管重复此操作。</li>
	<li>用镊子小心夹住膀胱并向上提起，同时用剪刀在膀胱下方及腹侧前列腺以下（约在膀胱基部下方1 cm处）剪断尿道。 
	注意：当膀胱被提起时，整个泌尿生殖道（包含膀胱、一段尿道、所有前列腺叶以及精囊）将随之被拉出，过程中可能会有一定阻力。</li>
	<li>将泌尿生殖道（UGT）放入盛有约5–10 mL磷酸盐缓冲液（PBS）的60–100 mm培养皿中。</li>
	<li>在解剖显微镜下进行后续操作。双手各持一把精细镊子。将镊子&#34;像握笔一样&#34;握住，并将前臂 rested 在实验台面上以保持稳定。</li>
	<li>使用精细镊子调整UGT的位置，使膀胱位于上方，尿道朝下，精囊位于膀胱两侧。</li>
	<li>用一把镊子夹住尿道，另一把镊子小心剥离脂肪组织，避免撕裂任何前列腺组织。注意：脂肪组织相对于周围组织呈现&#34;发亮&#34;的外观。</li>
	<li>去除脂肪后，用镊子撕开前列腺两个腹叶之间的结缔组织，将其分开。</li>
	<li>要分离其中一个腹叶，用一把镊子夹住该腹叶的尖端附近，另一把镊子尽可能靠近尿道处夹住其基部。在保持夹住叶基的同时，用另一把镊子夹住尿道，然后以稳定、平滑的动作将该叶从尿道上撕下。确保无前列腺组织残留在尿道上。根据下一步实验要求，将分离的叶放入相应的介质中：
	<ol>
		<li>如需进行组织学分析的固定和石蜡包埋，将组织放入10%中性缓冲福尔马林（NBF）8中。</li>
		<li>如需冷冻保存和切片，将组织放入OCT等冷冻包埋介质中8。</li>
		<li>如需进行单细胞分离用于培养或流式细胞术，将组织放入冷PBS中9。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>对另一个腹叶重复步骤1.15。</li>
	<li>要分离其中一个前叶，用镊子轻轻将该叶从精囊上拉开，注意不要刺破精囊。一旦该叶与精囊完全分离，按照步骤1.15中去除腹叶的方式将其移除。</li>
	<li>对另一个前叶重复步骤1.17。</li>
	<li>将剩余的泌尿生殖道翻转，使背侧前列腺可见。</li>
	<li>要分离其中一个背外侧叶，用镊子撕开两个背外侧叶之间的结缔组织，以及叶与精囊后部之间的结缔组织。以类似于步骤1.15中去除腹叶的方式移除该叶。</li>
	<li>对另一个背外侧叶重复步骤1.20。</li>
</ol>
2. 外科阉割
注意：本实验为存活手术，因此无菌操作、麻醉和疼痛管理对于本方案的伦理性和成功实施至关重要。须遵守所有机构动物护理和使用指南。手术过程中应使用外部热源（如循环水毯）以防止低体温。 &#160;动物未恢复足够意识以维持胸卧位时，不得无人看管。动物手术后未完全恢复前，不得将其放回其他动物中。所有手术器械在使用前须经高压灭菌。
<ol>
	<li>在清洁无菌的台面上，使用适当方法麻醉小鼠（例如 吸入2%异氟烷），并将小鼠置于仰卧位。注意：可根据批准的动物实验方案，采用其他麻醉方法（如氯胺酮）。</li>
	<li>通过轻捏脚趾检查小鼠的反射反应。若无反应，进入下一步；若有反应，等待1–3分钟后再检查。使用电动剃刀剃除手术区域的毛发。</li>
	<li>采用70%乙醇与碘伏交替擦拭的方式，或根据机构兽医人员或实验动物护理与使用委员会（IACUC）推荐的程序，对小鼠腹部进行无菌准备。</li>
	<li>使用无菌手术刀，在下腹部正中距阴茎约1.5 cm的前方，沿中线做一道长约1 cm的垂直皮肤切口。</li>
	<li>在腹膜上做一小切口（&#60;1 cm），注意避免损伤任何器官。</li>
	<li>使用无菌镊子夹住腹膜切口边缘，轻轻提起，以便观察其下方的腹腔。</li>
	<li>用另一把无菌镊子伸入腹腔，夹住位于膀胱侧方的左侧或右侧睾周脂肪垫。将脂肪垫经腹膜和皮肤切口拉出，直至睾丸随之脱出。此步骤中需小心，避免损伤其他组织或器官。</li>
	<li>使用电灼笔切断固定睾丸的脂肪垫。再用电灼笔缓慢切断睾丸动脉。注意：若切断睾丸动脉过快，可能导致大量出血，需对小鼠实施安乐死。</li>
	<li>切断脂肪垫和动脉后，移除睾丸及脂肪垫。</li>
	<li>对另一侧睾丸重复步骤2.6–2.9。&#160;注意：另一种睾丸切除方法为手术结扎睾丸动脉，随后用剪刀剪断血管。</li>
	<li>使用可吸收缝线缝合腹膜。</li>
	<li>使用外科伤口钉合器闭合皮肤。</li>
	<li>给予镇痛药以控制疼痛，并将小鼠置于清洁笼盒中，在笼盒加热器上保温5–10分钟。密切观察小鼠是否有疼痛或出血迹象。</li>
</ol>

<ol><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).</li>
<li>Roehrborn, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+benign+prostatic+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Impot+Res%22%5BJournal%5D)">Pathology of benign prostatic hyperplasia.</a> Int J Impot Res. 20 (suppl 3), 11-18 (2008).</li>
<li>Valkenburg, K. C., Williams, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate+Cancer%22%5BJournal%5D)">Mouse models of prostate cancer.</a> Prostate Cancer. , 895238(2011).</li>
<li>Shappell, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostate+pathology+of+genetically+engineered+mice%3A+definitions+and+classification.+The+consensus+report+from+the+Bar+Harbor+meeting+of+the+Mouse+Models+of+Human+Cancer+Consortium+Prostate+Pathology+Committee%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Prostate pathology of genetically engineered mice: definitions and classification. The consensus report from the Bar Harbor meeting of the Mouse Models of Human Cancer Consortium Prostate Pathology Committee.</a> Cancer Res. 64 (6), 2270-2305 (2004).</li>
<li>Valkenburg, K. C., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+discovery+in+prostate+cancer+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Drug discovery in prostate cancer mouse models.</a> Expert Opin Drug Discov. , 1-14 (2015).</li>
<li>El-Alfy, M., Pelletier, G., Hermo, L. S., Labrie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unique+features+of+the+basal+cells+of+human+prostate+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Res+Tech%22%5BJournal%5D)">Unique features of the basal cells of human prostate epithelium.</a> Microsc Res Tech. 51 (5), 436-446 (2000).</li>
<li>Prins, G. S., Huang, L., Birch, L., Pu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+estrogens+in+normal+and+abnormal+development+of+the+prostate+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">The role of estrogens in normal and abnormal development of the prostate gland.</a> Ann N Y Acad Sci. 1089, 1-13 (2006).</li>
<li>Valkenburg, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+Wnt%2Fbeta-catenin+signaling+in+a+subpopulation+of+murine+prostate+luminal+epithelial+cells+induces+high+grade+prostate+intraepithelial+neoplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Activation of Wnt/beta-catenin signaling in a subpopulation of murine prostate luminal epithelial cells induces high grade prostate intraepithelial neoplasia.</a> Prostate. 74 (15), 1506-1520 (2014).</li>
<li>Lukacs, R. U., Goldstein, A. S., Lawson, D. A., Cheng, D., Witte, O. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+cultivation+and+characterization+of+adult+murine+prostate+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation, cultivation and characterization of adult murine prostate stem cells.</a> Nat Protoc. 5 (4), 702-713 (2010).</li>
<li>Michiel Sedelaar, J. P., Dalrymple, S. S., Isaacs, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice+and+men--warning%3A+intact+versus+castrated+adult+male+mice+as+xenograft+hosts+are+equivalent+to+hypogonadal+versus+abiraterone+treated+aging+human+males%2C+respectively%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Of mice and men--warning: intact versus castrated adult male mice as xenograft hosts are equivalent to hypogonadal versus abiraterone treated aging human males, respectively.</a> Prostate. 73 (12), 1316-1325 (2013).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+luminal+epithelial+stem+cell+that+is+a+cell+of+origin+for+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A luminal epithelial stem cell that is a cell of origin for prostate cancer.</a> Nature. 461 (7263), 495-500 (2009).</li>
<li>Pascal, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5alpha-Reductase+inhibition+coupled+with+short+off+cycles+increases+survival+in+the+LNCaP+xenograft+prostate+tumor+model+on+intermittent+androgen+deprivation+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">5alpha-Reductase inhibition coupled with short off cycles increases survival in the LNCaP xenograft prostate tumor model on intermittent androgen deprivation therapy.</a> J Urol. 193 (4), 1388-1393 (2015).</li>
<li>Shen, M. M., Abate-Shen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+genetics+of+prostate+cancer%3A+new+prospects+for+old+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Molecular genetics of prostate cancer: new prospects for old challenges.</a> Genes Dev. 24 (18), 1967-2000 (2010).</li>
</ol>

作者声明不存在任何竞争性经济利益。

前列腺显微解剖技术可实现小鼠前列腺叶特异性的实验与分析（图1）。在基因工程小鼠模型中，某些表型可能仅出现在某一前列腺叶中，而在其他叶中未见。此外，对于组织学分析，本方案可确保获得最大量的纯前列腺组织进行切片与染色，避免切片中混杂其他泌尿生殖道组织。最后，在单细胞实验中，该方案可实现近乎纯化的前列腺细胞的分离。上皮细胞富集试剂盒可进一步将前列腺上皮细胞与间质细胞分离纯化。显微解剖的局限性在于需要使用解剖显微镜，以及操作者需经过一定学习曲线，掌握在显微镜下使用精细镊子的技术。 alternatively，前列腺组织也可作为泌尿生殖道整体（UGT）的一部分直接进行组织学切片，从而无需显微解剖。然而，对整个UGT进行切片的缺点是切片中会包含其他组织，导致组织纯度降低。此外，在制备单个前列腺细胞群体时，必须将前列腺各叶从UGT中分离，以避免细胞污染。
手术去势是许多前列腺研究实验室的基础手术，对于研究睾酮对前列腺发育和疾病的影响至关重要。（图3）该方案操作快速（经验丰富的操作者通常约需5分钟），并能几乎完全清除循环中的睾酮。...

前列腺是美国男性中最常见的癌症发生部位。每年约有22万名男性被诊断出患有前列腺癌，其中约27,000名男性将死于该疾病1。在美国，男性一生中被诊断为前列腺癌的风险约为七分之一1。良性前列腺增生（BPH）是一种与年龄相关的非癌性前列腺增大，也是一种普遍存在的疾病，影响超过80%的80岁以上男性2。因此，前列腺一直是大量研究的重点。
小鼠模型已被广泛用于前列腺疾病的研究3。总体而言，小鼠前列腺是人类前列腺的良好代表4，但小鼠与人类在前列腺的解剖结构和生理特性方面存在相似性和差异性5。在两个物种中，前列腺均位于膀胱底部，包绕尿道。人类前列腺为单一腺体，分为四个区域：中央区、移行区、外周区和前纤维肌性基质。相比之下，小鼠前列腺由围绕尿道分布的三对叶组成：前叶、腹叶和背外侧叶。在细胞水平上，主要区别在于人类基底细胞与腔面细胞的比例约为1:1，而小鼠中该比例为1:46。小鼠间质与人类也有所不同——人类具有更发达的平滑肌组织，而小鼠前列腺的肌层则明显更薄。正确识别、分离和处理小鼠前列腺对于开展小鼠前列腺研究至关重要。
激素水平显著影响人类和小鼠前列腺的发育与稳态。尽管雌激素似乎在前列腺发育中发挥作用7，但前列腺中最重要的激素是睾酮。睾酮对腺体的发育和维持至关重要。无论是通过物理还是化学手段去势后，成年前列腺中约90%的腔面细胞会发生凋亡，腺体随之萎缩。如果在去势条件下重新引入睾酮，前列腺能够自我再生至完全功能状态。睾酮似乎也驱动前列腺癌的发展，因此雄激素剥夺疗法是一种常用的治疗策略。然而，许多前列腺癌会发展为对雄激素剥夺产生耐药性。此外，接受雄激素剥夺治疗的前列腺癌患者会经历反复的去势与再生循环。在小鼠模型中，手术去势结合重新给予睾酮以实现前列腺的激素性再生，是研究去势抵抗性以及睾酮循环对前列腺影响的重要工具。
本文将讨论并演示如何准确定位并显微解剖小鼠前列腺，以及如何对小鼠进行手术去势的正确操作技术。

<table><tbody><tr><td>手术器械</td><td>Roboz</td><td>Various</td><td></td></tr><tr><td>甲醛</td><td>Sigma</td><td>F8775</td><td></td></tr><tr><td>OCT包埋剂</td><td>VWR</td><td>25608-930</td><td>必须置于干冰上冷冻，并储存在-80 &amp;deg;C</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Life Technologies</td><td>10010</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>约翰·霍普金斯大学</td><td></td><td>也可从在线供应商处获得</td></tr><tr><td>电凝笔</td><td>Medline</td><td>ESCT002</td><td></td></tr><tr><td>丝线缝合线</td><td>AD Surgical</td><td>M-S330R19</td><td></td></tr><tr><td>外科伤口夹</td><td>Roboz</td><td>RS-9265</td><td></td></tr></tbody></table>

小鼠前列腺显微解剖与外科去势手术

Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration

小鼠模型被广泛用于研究前列腺癌及其他疾病。小鼠是研究前列腺的优良模型，已被用作探索人类前列腺发育与疾病的替代模型。前列腺显微解剖技术可在无其他组织污染的情况下，对前列腺各叶的解剖结构、组织学特征及细胞特性进行一致性的研究。睾酮影响前列腺的发育与疾病进程。雄激素剥夺疗法是前列腺癌患者的常见治疗手段，但许多前列腺肿瘤会发展为去势抵抗性。对小鼠模型实施手术去势，可研究前列腺的去势抵抗性及其他激素生物学特征。该操作可与睾酮重新引入（即前列腺的激素再生）相结合，是研究前列腺中干细胞谱系的有力方法。前列腺显微解剖与手术去势相结合，为前列腺发育与疾病的稳健、一致性研究开辟了多种可能性。本文描述了实验室小鼠中前列腺显微解剖与手术去势的技术方案。

通过前列腺显微解剖术从小鼠体内分离出全部六个前列腺叶（图1）。完整的泌尿生殖道（UGT）由所有前列腺叶、膀胱、精囊和尿道组成（图1a）。输精管连接于尿道，但在前列腺显微解剖过程中并非必需，因此可在移除UGT前通过切断尿道将其分离（图1b-1c）。泌尿生殖道在从腹腔取出后仍保持完整结构（图1d）。此时，UGT表面仍覆盖有脂肪组织，需将其清除以暴露前列腺叶（图1e）。在膀胱基底部围绕尿道可见全部六个前列腺叶（腹侧、前侧和背外侧成对分布）。随后可按照上述方案分离出纯净的前列腺组织（图1f）。这些前列腺叶可置于适当的培养基中以供后续分析。
阉割是指切除作为睾酮主要产生器官的睾丸。在小鼠中，睾酮的存在会持续到实施阉割为止，此时前列腺会发生退化（图...

本文描述了实验室小鼠前列腺显微解剖和手术去势的实验方案。我们还展示了由这些方案产生的代表性结果。最后，我们讨论了这些方案的优势和应用。

小鼠模型被广泛用于研究前列腺癌及其他疾病。小鼠是研究前列腺的优良模型，具有……

这些操作的总体目标是实现对小鼠前列腺以及其内不同激素状态的研究。该方法有助于回答前列腺癌领域中的关键问题，例如，激素剥夺对前列腺癌发生的影响是什么。该技术的主要优势在于，能够在单个前列腺腺体中研究各种病理过程和激素变化的影响。首先，用大头针将小鼠仰卧固定在解剖板上，通过每只脚掌的脚垫进行固定，并用70%乙醇喷洒腹部。接着，用镊子夹住下腹部皮肤，用剪刀在阴茎开口前方约一厘米处剪开皮肤和腹膜。然后，从下腹部沿腹部两侧向上剪开皮肤和腹膜，直至肋骨 cage，暴露腹腔。 在确定膀胱和泌尿生殖道（UGT）的位置后，轻轻将脂肪组织及其他器官移至一侧，以暴露泌尿组织。然后用镊子夹住靠近尿道的输精管基部，并撕离该导管。在去除另一侧导管后，用镊子小心夹住并向上提起膀胱，同时用剪刀在腹侧前列腺下方及膀胱基部下方约一厘米处剪断尿道。将收获的尿道球腺（UGT）转移至含有约5至10毫升磷酸盐缓冲液（PBS）的60至100毫米培养皿中，并将培养皿置于解剖显微镜下。接着，用双手各持一对精细镊子，像握笔一样持握工具，并将前臂置于显微镜两侧的实验台面上以保持稳定。用镊子调整UGT的位置，使其膀胱朝上，尿道朝下，精囊位于膀胱两侧。用一把镊子夹住尿道，用另一把镊子小心地剥离脂肪组织，注意不要去除任何前列腺组织。当所有脂肪组织被清除后，撕开前列腺两个腹叶之间的结缔组织以将其分离。然后，用一把镊子夹住其中一个腹叶的尖端附近，另一把镊子尽可能靠近尿道夹住该叶的基部。现在，用另一把镊子固定尿道，同时以稳定、平滑的动作将腺叶从血管上拉开。确认尿道上无前列腺组织残留。然后，根据下一步实验要求，将腺叶放入相应的培养基中。以相同方式分离另一腹侧叶后，用镊子轻轻将其中一个前叶从精囊上拉开，注意不要刺破精囊。随后，当前叶完全与精囊分离后，按照前述分离腹侧叶的方法将其移除。分离第二个前叶后，将剩余的尿道生殖道组织（UGT）翻转，使背侧前列腺可见，再用镊子撕开两个背外侧叶之间以及背外侧叶与精囊后部区域之间的结缔组织。然后，按照刚刚演示的方法，切除单侧背外侧叶。进行去势手术时，先将麻醉后的小鼠仰卧置于干净无菌的台面上，并通过脚趾夹捏法确认麻醉深度是否合适。若小鼠无反应，则使用电动剃毛器剃除手术区域的毛发，并对腹部进行消毒。接下来，使用无菌手术剪在腹部下侧正中线皮肤处做一个长约一厘米的垂直切口，位置位于阴茎前方约1.5厘米处，随后小心地在腹膜上做一个较小的切口，注意避免损伤任何器官。用无菌镊子轻轻提起腹膜切口边缘，以观察腹膜腔，并用另一把无菌镊子轻轻拉出一侧睾丸脂肪垫，直至睾丸显露。然后使用电凝笔缓慢切开脂肪垫，同时固定睾丸，直至切断睾丸动脉。如果切割动脉速度过快，血管可能会出血过多，需要对小鼠实施安乐死。建议间歇性加热电灼笔，避免温度过高，然后缓慢移动仪器穿过动脉，以防止动物失血过多。切除脂肪垫和动脉后，弃去睾丸和脂肪垫，并对另一侧睾丸重复上述去势操作。取出第二个睾丸后，使用无菌丝线缝合腹膜，并用外科伤口夹钉合皮肤。随后给予镇痛处理以控制疼痛，并将小鼠置于清洁的笼子中，在笼式加热器上保温5至10分钟，期间持续监测，直至其完全恢复。完整的泌尿生殖道包括全部六个前列腺叶、膀胱、精囊和尿道。输精管连接尿道，但在前列腺微解剖过程中并非必需，因此可在摘除泌尿生殖道（UGT）前将其分离。一旦泌尿生殖道从腹腔中取出，其结构将保持完整，但表面覆盖有脂肪组织，需清除脂肪以暴露前列腺叶。在本代表性实验中，去势后进行了两轮激素再生循环，并通过ELISA检测血清中的睾酮水平。正如预期，在去势条件下，睾酮水平几乎完全消失。在使用他莫昔芬（一种选择性雌激素受体调节剂）的情况下，血清睾酮水平与激素正常状态相比无显著差异。然而，在去势后重新引入睾酮，导致血清睾酮水平出现显著升高。显微解剖后，去势小鼠的前列腺叶明显缩小，而经睾酮处理的小鼠前列腺叶则恢复至原有大小。此外，对正常状态、去势状态及再生状态下的前叶前列腺组织进行苏木精和伊红染色，结果显示去势动物组织切片中旺盛的组织生长显著减少。若操作熟练，每只小鼠的该技术操作可在五分钟内完成。在进行去势操作时，重要的是始终保持无菌环境，并确保有效控制小鼠感受到的疼痛。去势后，还可采用其他方法，如雄激素重新引入，以进一步探究睾酮对前列腺肿瘤的影响。该技术建立后，为前列腺癌领域的研究人员探索小鼠中前列腺肿瘤的致癌过程、发展机制以及去势抵抗性奠定了基础。

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医学

鼠前列腺微解剖和手术去势

在本视频中，我们介绍了从雄性小鼠模型中分离泌尿生殖系统（UGS）的操作步骤。该泌尿生殖系统可在体外进一步解剖，以分离前列腺组织，并研究其在前列腺癌发生过程中的作用。...

从小鼠泌尿生殖系统中分离前列腺：一种将雄性小鼠前列腺腺体与其他泌尿及生殖器官分离的技术

关键词：前列腺分离，小鼠，泌尿系统，生殖系统，雄性小鼠，器官分离

在本视频中，我们演示了将前列腺癌细胞注射到小鼠前列腺内的操作步骤。原位小鼠模型可用于在非侵入性且具有临床相关性的环境中研究疾病的发生机制以及对治疗方案的反应。...

前列腺内注射癌细胞：建立原位前列腺癌小鼠模型的癌细胞递送技术

本视频介绍了一种利用腺病毒递送系统在前列腺细胞中编辑特定基因的方法。该方法可实现基因表达的原位和局部调控，结合CRISPR技术，用于构建新型的小鼠前列腺癌模型。...

利用基因工程小鼠模型模拟前列腺癌：一种通过CRISPR/Cas9介导的局部基因编辑技术在小鼠前叶前列腺细胞中的应用

这种人源前列腺癌原位模型可用于定量分析肿瘤大小、循环肿瘤细胞以及肺部特异性转移灶的形成。由于肿瘤细胞必须逃逸出原发器官，进入血液循环，并在继发部位定植，该模型能够有效重现人类肿瘤转移的真实情况。...

一种人前列腺癌转移的原位小鼠模型

前列腺癌是美国癌症相关死亡的第二大常见原因。原位癌模型为理解前列腺癌的生物学特性以及评估治疗方案的有效性提供了一种有效的方法。本方案详细描述了建立原位前列腺癌小鼠模型所需的各个步骤。...

人前列腺癌的临床前原位小鼠模型

本实验方案的目的是演示前列腺癌细胞的前列腺内注射，随后进行阉割。在具有临床相关性的肿瘤微环境和免疫健全宿主的背景下，建立依赖雄激素及去势抵抗性前列腺癌的原位临床前模型，对于研究该疾病至关重要。...

一种用于雄激素依赖性和去势抵抗性前列腺癌的生物发光与荧光同基因小鼠原位模型

组织工程化肾脏结构为解决器官短缺及透析带来的有害影响提供了一种方案。本文描述了一种从小鼠肾脏中显微解剖分离皮质-髓质节段的实验方案。这些节段被植入无支架的细胞结构中，形成肾脏类器官。...

原发性肾组织节段的显微解剖及其与新型无支架构建技术的整合

本方案描述了一种新建立的将病毒递送至小鼠前列腺的方法。该技术可通过CRISPR/Cas9技术、基因过表达或Cre重组酶递送，实现基因表达的原位调控，并建立一种新型的小鼠前列腺癌模型。...

病毒递送CRISPR向导RNA至小鼠前列腺以实现基因改造

基因工程小鼠是研究前列腺癌机制的有用模型。本文介绍了一种从小鼠泌尿生殖系统中识别并分离前列腺叶的方案，基于组织学特征对其进行区分，并分离和培养原代前列腺细胞 体外...

小鼠前列腺叶的鉴定、组织学表征及用于体外三维球体培养模型的分离

我们展示了一种用于小鼠前列腺癌模型的尸检及解剖方法，重点介绍前列腺肿瘤的分离。同时提供了一步一步建立小鼠前列腺肿瘤类器官的实验方案。...

利用前列腺癌基因工程小鼠模型生成肿瘤类器官

本文描述了一种快速、稳定地对啮齿类动物进行睾丸切除术和卵巢切除术以维持其存活的方法。...

小鼠睾丸切除术和卵巢切除术以降低性激素产生

学习小鼠前列腺显微解剖与手术去势技术，用于研究激素剥夺对前列腺癌发生的影响。该方法可单独分析各前列腺叶，观察病理过程与激素变化，为癌症研究提供可重复实验方案。

小鼠前列腺显微解剖与外科去势手术

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