跑步机疲劳试验:疲劳类似的行为，为鼠标操作简单，高通量检测

该程序的总体目标是测量小鼠的疲劳样行为以建立疲劳模型，并测试干预是否可以逆转疲劳。这种方法可以帮助回答与疲劳相关的关键问题，例如哪些干预措施可以帮助减轻疲劳或逆转疲劳模型。这种技术的主要优点是它可以使用单个硬件快速评估类似疲劳的行为和/或抗疲劳干预。

这种方法的视觉演示至关重要。为了成功执行这项任务，观察和了解老鼠的行为非常重要。在训练和测试小鼠之前，请确保跑步机位于平坦的表面上，并将其设置为所需的倾斜角度，通常为 10 度。

接下来，确保将触电频率和强度设置得当，通常为 2 赫兹和 1.22 毫安。在跑步机下方，放一张纸或吸水垫来收集粪便和尿液。然后，在距离减震网格最远的跑步机外壳的三分之一处放置一个垫子，以创造一个黑暗的空间并吸引老鼠留在该区域。

现在，继续训练小鼠。关闭跑步机并将速度设置为零，快速将鼠标放在跑步机皮带上，抓住它们的尾巴，直接将它们装载到跑步机皮带上。放置每个鼠标后，立即打开其相应的减震网格。

首先，让老鼠自由探索。一旦每只鼠标至少受到一次电击，或大约三分钟后停止探索时间。然后，打开跑步机并慢慢提高速度，直到它开始以每分钟约 1.5 至 3.0 米的速度移动。

确保所有鼠标都开始行走。如果鼠标没有开始行走，或没有走向减震格栅，请用钢丝刷敲击鼠标或使用尾巴挠痒痒来鼓励它在跑步机上行走。现在，随着所有老鼠的行走，慢慢地将跑步机的速度提高到每分钟 8 米。

尝试确保小鼠在跑步机上向前行走，同时在第一次训练期间提高速度。如果正在探索的老鼠正在转向面对冲击网格，请停止增加跑步机的速度，直到它们恢复行走。然后启动计时器并继续监控行为。

5 分钟后，将速度提高到每分钟 9 米。7 分钟后，将速度提高到每分钟 10 米。10 分钟后，停止跑步机以结束训练。

让老鼠在跑步机上短暂探索一会儿，然后将它们放回自己的笼子里。没有必要让一个笼子中的所有小鼠同时运行，但要尽量减少从任何给定笼子中取出小鼠的次数。在两次训练之间，用酒精湿巾清洁跑步机和减震格栅。

此外，更换跑步机下方的纸张或吸水垫。在训练的第二天，重复第一天使用的过程，但在启动计时器之前将跑步机速度提高到每分钟 10 米。5 分钟后，将跑步机的速度提高到每分钟 11 米。

10 分钟后，将速度提高到每分钟 12 米，让跑步机运行直到 15 分钟结束。然后，结束训练运行。如果小鼠在任务中遇到问题，可以进行额外的训练。

训练完成后，在疲劳测试前至少休息一整天。如果不进行再次培训，最多可以间隔 7 天。在此测试中，疲劳样行为定义为在疲劳区连续花费 5 秒。

清除老鼠的正确技术包括抓住尾巴底部附近并立即将它们从跑步机上抬出。疲劳区是跑步机皮带在减震格栅体长度内的区域，也是格栅本身。测试前，在跑步机车道的顶部或侧面贴上标记，以划定疲劳区。

接下来，将跑步机的速度设置为每分钟 12 米，但不要启动跑步机。此外，请确保减震网格已关闭。现在，将鼠标单独放入各自的通道中，并在加载每个鼠标后立即打开相应的减震网格。

要开始测试，请同时启动跑步机和秒表。按照指示提高跑步机的速度。此时间表基于对雌性 C57 Black 6 小鼠的测试，可能需要修改以适应不同能力的小鼠。

在整个测试过程中仔细观察所有小鼠，但不要干预以帮助或激励进入疲劳区的小鼠。不要使用钢丝刷或尾巴挠痒技术。仅当鼠标连续处于疲劳区 5 秒时进行干预。

发生这种情况时，请立即将鼠标从跑步机上移开并记录它运行的持续时间和距离。至关重要的是，实验者要仔细观察跑步机上的所有小鼠，并迅速清除那些在疲劳区连续呆了 5 秒的小鼠。一旦跑步机上没有老鼠，就为下一次跑步做准备。

小鼠训练 5 天，然后，为了诱导疲劳，给予 5-氟尿嘧啶 5 天。已知这种药物会导致人类疲劳和小鼠出现疲劳样行为。在运动能力测试中，在测试过程中使用尾巴挠痒痒和空气吹气来激励小鼠，组间没有观察到差异。

然而，在第二天，使用跑步机疲劳测试对小鼠进行了测试。该测试显示化疗治疗小鼠和对照小鼠在测试期间的跑步距离存在显着差异。为了验证跑步机疲劳测试是否在测量疲劳样行为，在 5-氟尿嘧啶治疗的 5 天期间，在单独的实验中测量了小鼠自主轮式跑步，并在治疗最后一天后额外

也得到了类似的结果。在另一项实验中，跑步机疲劳测试还能够检测到接受不同剂量的 5-氟尿嘧啶治疗（每周一次，持续两周）的小鼠的疲劳样行为。当未经治疗的小鼠定期进行测试时，它们在重复测试后变得不太愿意跑步。

该数据表明，使用该方案的测试应仅限于单次测试，以避免高不依从性小鼠的发生率。在尝试此程序时，在训练和测试期间密切观察您的小鼠非常重要。在满足疲劳标准之前不要干预。

观看此视频后，您应该对如何使用此方案测量小鼠的疲劳样行为、小鼠在跑步机上的行为以及如何快速将小鼠从跑步机上移出有一个很好的了解。