A Robotic Platform for High-throughput Protoplast Isolation and Transformation

Elizabeth M. Dlugosz; Scott C. Lenaghan; C. Neal Stewart, Jr.

doi:10.3791/54300

JoVE Journal
Genetics

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JoVE Journal Genetics

A Robotic Platform for High-throughput Protoplast Isolation and Transformation

机器人平台的高通量原生质体分离和转型

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10:12 min

September 27, 2016

DOI: 10.3791/54300-v

Elizabeth M. Dlugosz¹, Scott C. Lenaghan^2,3, C. Neal Stewart, Jr.¹

¹Department of Plant Sciences,University of Tennessee, Knoxville, ²Center for Renewable Carbon,University of Tennessee, Knoxville, ³Department of Mechanical, Aerospace, and Biomedical Engineering,University of Tennessee, Knoxville

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

高通量，自动化，烟草原生质体的生产和改造的方法进行描述。该机器人系统可以在模型BY-2系统应该是翻译到非模式作物大规模并行基因表达和发现。

该方案的总体目标是开发一种快速、自动化、高通量筛选植物原生质体的方法，特别是解决当前早期筛选大量基因组编辑和基因沉默靶标的瓶颈。这种方法可以帮助回答植物生物技术领域的关键问题。该技术的主要优点是它能够实现高通量自动化原生质体生产和转化，以快速平行筛选基因表达中的启动子功能。

该程序将使用广泛使用的烟草亮黄色二（BY-2）悬浮培养物进行演示。首先在 Erlenmeyer 培养瓶中培养 BY-2 培养物，如方案文本中所述。在原生质体分离当天，充分混合培养物，因为细胞会迅速沉降，并将 6 毫升培养物转移到 15 毫升锥形底离心管中。

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