快速分子检测与区分甲型和乙型流感病毒

本检测方法的总体目标是诊断或排除以呼吸系统症状就诊的患者是否感染流感病毒。该方法有助于解答临床诊断领域中的一些关键问题，例如诊断呼吸道感染的主要病因。该技术的主要优势在于其快速性，可在门诊护理环境中使用。

演示该操作的是我们实验室的技术员 Sam Kaplan。采集鼻拭子样本时，将拭子插入分泌物最明显或堵塞最严重的鼻孔。轻轻旋转拭子，将其推入鼻孔直至遇到阻力，然后在鼻壁上旋转数次，再缓慢从鼻孔中取出。

随后，将拭子放入含有 3 mL 病毒转运培养基的试管中保存并运输。接下来，在检测前将样本和蓝色样本接收器恢复至室温。橙色检测底座无需升温至室温即可进行检测。

将所有测试样品用铝箔包裹，直至即将使用前再取出。然后打开仪器，输入用户编号，按“确定”键。要开始测试流程，请触摸仪器屏幕上的“运行测试”按钮。接着使用屏幕键盘或条形码扫描仪输入患者编号，然后按“确定”键。之后打开盖子，将橙色测试底管插入橙色测试底座插槽中。

确认屏幕上显示的是正确的检测项目，然后按“确定”。接着将蓝色样本接收器插入蓝色样本接收器支架中，并等待样本接收器预热。预热完成后，用两根手指按住样本接收器边缘，以确保其保持原位，随后撕去封口铝箔。然后将待检测的患者拭子放入样本接收器中。

用力混合拭子和液体10秒，并将拭子头部按压在样本接收器的侧壁上，以帮助将样本从拭子上脱离。如果检测拭子保存在病毒运输培养基中，则将病毒运输培养基涡旋震荡10秒，并取200 µL加入样本接收器中。然后按“确定”继续。

然后将白色转移 cartridge 插入蓝色样本接收器中。持续按压样本接收器，直至橙色指示条上升。随后提起转移 cartridge 并将其连接至检测底座。

当正确安装试剂盒转移装置后，橙色指示剂应会下降。关闭盖子，在结果界面出现之前不要打开。现在触摸主屏幕上的“运行质控测试”按钮。

选择要运行的质控测试。然后单击“确定”并根据屏幕提示确认测试类型与拟用于测试的质控样本一致，以完成测试。测试运行完成后，观察屏幕上显示的测试结果，结果将提示甲型流感、乙型流感或未知亚型的存在情况；对于无效结果，需重复测试。

随后使用70%乙醇或10%漂白剂溶液清洁仪器及周围台面。该图显示了通过RP检测法测定的每种流感亚型阳性与阴性样本的平均CT值。结果表明，流感A和B检测法所确定的假阴性样本是由于病毒载量较低所致。

熟练掌握后，若操作得当，该技术可在 15 分钟内完成。在进行此实验时，需牢记：初始设置检测时，转移盒必须连接至测试底座，直至听到咔嗒声锁定到位。如果这两个部件未正确固定，运行将失败，并需从头重新开始。

观看本视频后，您应能够充分了解如何进行流感诊断检测。请务必注意，处理可能感染流感的患者样本具有极高的危险性，在进行本操作时，必须采取适当的预防措施，例如穿戴合适的个人防护装备。