Name: 髓内锁钉股骨截骨标准化固定用于分析正常和有缺陷的骨愈合小鼠 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: 学习使用髓内锁钉标准化固定小鼠股骨截骨的方法，用于分析正常和缺陷性骨愈合过程。该技术为骨折愈合研究提供了可重复的实验模型，有助于深入理解骨修复机制。

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本工作由瑞士达沃斯的 RISystem AG 资助。

所有操作均经机构动物照护与使用委员会（IACUC）批准，并遵循相关机构指南（德国萨尔布吕肯消费者保护局，官方兽医服务中央机构）。镇痛和感染预防措施应符合实验所在国家和机构的相应指南。
1. 植入物和外科手术器械的准备
<ol>
	<li>从显微外科器械盒中选取手术刀片（15号）、小型解剖剪、精细镊子、敷料镊、小型钳子、24号（G）和27号（G）针头、不可吸收的5-0缝线以及持针器。</li>
	<li>取出髓内钉、交锁针、专用瞄准装置、Gigli锯、Gigli锯模板、中心定位钻头（直径1 mm）、钻头（直径0.3 mm）和手动钻（图2；参见材料清单）。 
	注意：髓内钉（直径0.8 mm，长度15.7 mm）为医用级不锈钢材质制成的髓内锁定钉，用于逆行植入股骨。该髓内钉近端带有螺纹（长度4 mm），并设有两个孔，用于插入交锁针（直径0.3 mm），以实现轴向和旋转稳定性（图1）。</li>
	<li>将植入物及所有手术器械浸入消毒液（例如，96%酒精）中5分钟，或进行灭菌处理（蒸汽灭菌，130 °C，25分钟）。消毒或灭菌后，将器械置于无菌手术巾上。将无菌手术巾紧邻小型动物手术台放置。</li>
</ol>
2. 动物、麻醉与镇痛
<ol>
	<li>根据研究目的和科学问题选择合适品系、年龄和性别的小鼠。 
	注意：本研究使用12至14周龄的雄性CD-1小鼠。用于指甲植入实验时，动物的理想体重为25–35 g。</li>
	<li>通过腹腔注射15 mg/kg的赛拉嗪和75 mg/kg的氯胺酮对小鼠进行麻醉。通过脚趾夹捏反应确认麻醉效果。使用眼用润滑剂保护动物在麻醉期间的眼睛，防止角膜干燥。麻醉诱导后，将小鼠置于加热灯下以维持恒定的体温。</li>
	<li>术前第1天至术后第3天，在饮水中添加盐酸曲马多（2.5 mg/100 ml）以提供镇痛作用。</li>
</ol>
3. 手术操作与指甲植入
<ol>
	<li>手术前，剃除整个右侧后肢的毛发，并涂抹脱毛膏。5分钟后，去除脱毛膏，用水清洗腿部。&#160;暴露植入物及所有外科手术器械于消毒液中（例如，96%酒精）或对其进行灭菌（蒸汽灭菌，130 °C，25 分钟）。</li>
	<li>在无菌条件下，将小鼠仰卧位固定于小动物手术台上。弯曲右侧膝关节，以便从前侧接近膝关节髁。使用手术刀片在右侧膝关节处行5 mm髌旁内侧切口。</li>
	<li>用精细镊子提起髌韧带，并用手术刀片小心游离该韧带。随后，用手术刀片将髌骨向侧方移位，以暴露股骨的髁间窝。</li>
	<li>通过钻孔打开髁间窝，直至到达髓腔。
	<ol>
		<li>以45º角偏离股骨轴线开始钻孔，使用1 mm中心钻头。在钻孔过程中缓慢调整钻头方向，直至其与股骨干骨轴平行。当到达髓腔时停止钻孔。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>在打开髁间窝处的骨组织后，将24 G针头插入股骨髓腔，贯穿股骨全长。通过24 G针头的旋转动作手动扩髓。取出24 G针头，将较细的27 G针头插入髓腔。推进针头，使其向前穿通股骨近端大转子处的皮质骨。</li>
	<li>从股骨中取出27 G针头。使用手钻，在持续旋转和轴向压力下，通过髁间切迹植入髓内钉，直至髓内钉远端到达髁部水平。 
	注意：可用一个小标记来识别钉子的远端。</li>
	<li>将小鼠置于左侧卧位。使用手术刀片沿股骨外侧骨干部分从膝关节至髋关节做纵向皮肤切口，以手术暴露股骨中段。</li>
	<li>使用小型手术剪从外侧沿股骨轴方向切开筋膜并分离肌肉。分离肌肉直至暴露股骨干部分。注意保护坐骨神经。
	<ol>
		<li>用持针钳从周围分离股骨全周，剥离骨膜。然后张开持针钳以牵开肌肉，暴露股骨。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将瞄准装置安装至髓内钉的远端。推进装置直至其与髓内钉的适配器法兰连接，并将瞄准装置旋转至股骨的前外侧位置。</li>
	<li>用近端和远端交锁钉将髓内钉固定。
	<ol>
		<li>从近端锁定钉开始。</li>
		<li>将中心钻头（1 mm 直径）装入手持电钻，在近端锁定孔位置进行锪孔。 
		注意：通过沉孔操作，可在不钻透骨皮质的情况下，在骨表面皮质骨中形成一个小凹腔。该凹腔有助于后续使用较细钻头（直径0.3 mm）时实现更准确的定位和引导。</li>
		<li>将钻头（0.3 mm 直径）装入手钻中。使用瞄准装置，穿过近侧和远侧皮质骨（双皮质）钻孔。通过瞄准装置插入第一枚交锁钉。当达到交锁扭矩时，交锁钉驱动轴即自动折断。</li>
		<li>对远端锁钉重复此操作步骤。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>进行骨干截骨术。
	<ol>
		<li>将锯导板固定在瞄准装置外侧的两个锁定钉之间。随后，在持续生理盐水冲洗下，使用Gigli锯进行骨切割。完成截骨后，在靠近骨骼的一端剪断锯线。小心移除锯线，避免对软组织造成损伤。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>取下瞄准装置，用小镊子在标记线处剪断髓内钉残余的杆部。</li>
	<li>关闭股骨外侧的肌肉层，并用单个缝线缝合皮肤。在膝关节前方，复位髌骨，并用一条单缝线将髌腱固定于肌肉。同样使用单个缝线闭合此伤口。</li>
	<li>将动物置于加热灯下直至从麻醉中恢复。在动物恢复足够意识以维持腹卧位之前，不得无人看管。将动物送回动物设施中的单个笼具内。&#160;</li>
	<li>每天仔细观察动物状况。术后前三天内维持镇痛治疗。若术后第四天动物仍表现出疼痛迹象，如发声、焦躁不安、活动减少、不梳理毛发、姿势异常以及对周围环境缺乏正常兴趣，则应继续给予镇痛治疗。当动物完全无痛时，可停止镇痛。</li>
</ol>

<ol><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+bone+healing+models%3A+standards%2C+tips%2C+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li>
<li>Claes, L., Augat, P., Suger, G., Wilke, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+size+and+stability+of+the+osteotomy+gap+on+the+success+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of size and stability of the osteotomy gap on the success of fracture healing.</a> J Orthop Res. 15 (4), 577-584 (1997).</li>
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<li>Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+intramembranous+ossification+during+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">A model for intramembranous ossification during fracture healing.</a> J Orthop Res. 20 (5), 1091-1098 (2002).</li>
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<li>Manigrasso, M. B., O'Connor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+closed+femur+fracture+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Trauma%22%5BJournal%5D)">Characterization of a closed femur fracture model in mice.</a> J Orthop Trauma. 18 (10), 687-695 (2004).</li>
<li>Lovati, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+mouse+model+of+orthopaedic+implant-related+Staphylococcus+aureus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Diabetic mouse model of orthopaedic implant-related Staphylococcus aureus infection.</a> PLoS One. 8 (6), e67628(2013).</li>
<li>Slade Shantz, J. A., Yu, Y. Y., Andres, W., Miclau, T. 3rd, Marcucio, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+macrophage+activity+during+fracture+repair+has+differential+effects+in+young+adult+and+elderly+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Trauma%22%5BJournal%5D)">Modulation of macrophage activity during fracture repair has differential effects in young adult and elderly mice.</a> J Orthop Trauma. 28, 10-14 (2014).</li>
<li>Claes, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mechanical+factors+on+the+fracture+healing+process%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Orthop+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of mechanical factors on the fracture healing process.</a> Clin Orthop Relat Res. 355 (Suppl), 132-147 (1998).</li>
<li>Gröngröft, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fixation+compliance+in+a+mouse+osteotomy+model+induces+two+different+processes+of+bone+healing+but+does+not+lead+to+delayed+union%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Fixation compliance in a mouse osteotomy model induces two different processes of bone healing but does not lead to delayed union.</a> J Biomech. 18 (13), 2089-2096 (2009).</li>
<li>Glatt, V., Matthys, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adjustable+stiffness%2C+external+fixator+for+the+rat+femur+osteotomy+and+segmental+bone+defect+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Adjustable stiffness, external fixator for the rat femur osteotomy and segmental bone defect models.</a> J Vis Exp. (9), e51558(2014).</li>
<li>Manassero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+femoral+segmental+critical-sized+defect+model+stabilized+by+plate+osteosynthesis+for+bone+tissue+engineering+purposes%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">A novel murine femoral segmental critical-sized defect model stabilized by plate osteosynthesis for bone tissue engineering purposes.</a> Tissue Eng Part C Methods. 19 (4), 271-280 (2013).</li>
</ol>

Romano Matthys 是瑞士达沃斯 RISystem AG 公司的员工，该公司生产植入物及与植入物配套的专用器械。其他作者无利益冲突。

手术技术中最关键的步骤是髓内钉、瞄准装置和锁钉的准确定位。髓内钉必须完全插入至其远端标记的凹槽处，因为若髓内钉在髁部水平突入膝关节腔，可能限制膝关节活动（图3 A）。因此，必须考虑股骨的大小以及相应动物的体重。外科医生还应特别注意连接髓内钉适配器法兰的瞄准装置的最终位置，以确保截骨部位始终位于骨干中段的相同位置。最后，交锁钉必须完全贯穿双侧皮质骨，以避免在观察期间发生钉移位（图3 B）。因此，应通过旋转动作并施加持续的轴向负荷将锁钉插入股骨。当达到交锁扭矩时，钉的驱动轴将自动折断。在将动物纳入研究方案之前，必须通过放射影像学检查确认髓内钉和锁钉的最终位置。
实验结束时，在取骨过程中最关键的步骤是从髓内钉中取出交锁螺钉。通常情况下，螺钉的末端会被新形成的骨组织覆盖。实际上，必须切除这些骨组织，直至能够顺利取出螺钉。此操作必须极为小心，因为任何对股骨的损伤都可能影响愈合后骨骼的生物力学特性。有时，从股骨的背侧更易于取出螺钉。使用普通的持针器即可轻松取出髓内钉本身。
<p class="jove_content"...

可利用细胞和球体培养在体外（in vitro）研究骨愈合的生物学过程，但也需要通过动物实验进行体内（in vivo）研究。尽管大动物实验在临床前测试中仍具有重要作用，但过去十年中，对产品或假设的早期测试已发生变化，如今通常在小动物模型中进行1。这一转变基于多种原因：与猪和羊相比，小鼠和大鼠的生产和维护成本更低；此外，小动物具有更短的繁殖周期和更短的正常愈合时间，这两点均有利于开展大规模的慢性实验。最后，基因靶向动物和特异性抗体的可获得性，使得能够分析骨愈合过程中的分子机制。然而，尽管先前在大动物模型中使用的骨固定技术可基本无变异地从人类或兽医临床护理中的类似操作直接转化应用，但在体型较小的大鼠和小鼠中开发和应用骨固定技术却面临挑战。
众所周知，生物力学环境对骨愈合过程具有显著影响2。根据人类骨折愈合的研究可知，骨折固定的稳定性差异会导致不同的愈合方式，包括刚性固定后发生的膜内成骨以及较不刚性固定并伴有微动时发生的软骨内成骨。完全的轴向或旋转不稳定可能会延缓愈合过程，甚至导致骨不连3。因此，我们认为有必要在小鼠和大鼠中开发先进的植入系统和骨固定技术。通过这种方式，可对生物力学条件进行适当标准化，从而在分析愈合过程时确保结果的有效性。
尽管近年来已引入多种高度复杂的鼠类固定技术，但目前最常用的技术仍然是简单的髓内针固定法。然而，该技术的主要缺点在于缺乏旋转稳定性和轴向稳定性4。为了提高旋转稳定性和轴向稳定性，已有研究引入髓内螺钉用于稳定小鼠股骨骨折5。然而，由于维持旋转稳定性需要骨碎片之间保持接触和加压，螺钉固定法无法用于分析骨缺损情况下的愈合过程。
与简单的骨针和髓内螺钉相比，髓内锁定钉可提供更高的轴向和旋转稳定性4。由于使用了Gigli锯导向装置，并能够精确创建指定大小的骨缺损间隙，因此可实现高度可重复的股骨截骨，从而可用于分析正常骨愈合及骨愈合缺陷的情况6。由于插入了交锁钉，髓内锁定钉可在整个愈合过程中保持间隙大小恒定，即使在完全负重的情况下亦是如此。本文报道了髓内锁定钉的设计及其应用，并探讨其在正常骨愈合与延迟骨愈合的实验研究中的优势与局限性。

<table><tbody><tr><td>MouseNail</td><td>RISystem AG</td><td>221,122</td><td></td></tr><tr><td>MouseNail 定位装置</td><td>RISystem AG</td><td>221,201</td><td></td></tr><tr><td>MouseNail 髓内固定针</td><td>RISystem AG</td><td>221,121</td><td></td></tr><tr><td>中心定位钻头</td><td>RISystem AG</td><td>592,205</td><td></td></tr><tr><td>钻头</td><td>RISystem AG</td><td>590,200</td><td></td></tr><tr><td>Gigli 丝锯</td><td>RISystem AG</td><td>590,100</td><td></td></tr><tr><td>缝线（5-0 Prolene）</td><td>Ethicon</td><td>8614H</td><td></td></tr><tr><td>镊子</td><td>Braun Aesculap AG &amp;amp;CoKG&amp;nbsp;</td><td>BD520R</td><td></td></tr><tr><td>敷料镊</td><td>Braun Aesculap AG &amp;amp;CoKG&amp;nbsp;</td><td>BJ009R</td><td></td></tr><tr><td>剪刀</td><td>Braun Aesculap AG &amp;amp;CoKG&amp;nbsp;</td><td>BC100R</td><td></td></tr><tr><td>持针器</td><td>Braun Aesculap AG &amp;amp;CoKG&amp;nbsp;</td><td>BM024R</td><td></td></tr><tr><td>24 G 针头</td><td>BD Mircolance 3</td><td>304100</td><td></td></tr><tr><td>27 G 针头</td><td>Braun Melsungen AG</td><td>9186182</td><td></td></tr><tr><td>15 号手术刀片</td><td>Braun Aesculap AG &amp;amp;CoKG&amp;nbsp;</td><td>16600525</td><td></td></tr><tr><td>钳子</td><td>Knipex</td><td>7932125</td><td></td></tr><tr><td>加热保温装置</td><td>Sanitas</td><td>605.25</td><td></td></tr><tr><td>脱毛膏</td><td>Asid bonz GmbH</td><td>NDXZ10</td><td></td></tr><tr><td>眼用润滑剂</td><td>Bayer Vital GmbH</td><td>2182442</td><td></td></tr><tr><td>赛拉嗪</td><td>Bayer Vital GmbH</td><td>1320422</td><td></td></tr><tr><td>氯胺酮</td><td>Serumwerke Bernburg</td><td>7005294</td><td></td></tr><tr><td>曲马多</td><td>Gr&amp;uuml;nenthal GmbH</td><td>2256241</td><td></td></tr><tr><td>消毒液（SoftaseptN）</td><td>Braun Melsungen AG</td><td>8505018</td><td></td></tr><tr><td>CD-1 小鼠</td><td>Charles River</td><td>22</td><td></td></tr></tbody></table>

一种用于小鼠股骨截骨术标准化固定的髓内锁定钉以分析正常与缺陷性骨愈合

An Intramedullary Locking Nail for Standardized Fixation of Femur Osteotomies to Analyze Normal and Defective Bone Healing in Mice

骨愈合模型对于开发临床骨折治疗的新治疗策略至关重要。此外，小鼠模型在创伤研究中的应用日益广泛。小鼠提供了大量突变品系和抗体，可用于分析骨愈合这一高度分化过程背后的分子机制。为了控制生物力学环境，在小鼠中必须采用标准化且特征明确的骨固定技术。本文报道了一种用于稳定小鼠开放性股骨截骨的髓内钉的设计与应用。该髓内钉由医用级不锈钢制成，具有较高的轴向和旋转刚度。该植入物还可实现从0.00 mm到2.00 mm之间精确且恒定的截骨间隙大小。当截骨间隙为0.00 mm和0.25 mm时，采用髓内锁定钉固定后可通过软骨内成骨和膜内成骨实现充分的骨愈合。而当截骨间隙为2.00 mm时，则导致萎缩性骨不连。因此，该髓内锁定钉可用于骨愈合与非愈合模型。与其它开放性骨愈合模型相比，使用该髓内钉的另一个优势在于能够稳定固定骨替代材料和支架，从而研究骨整合过程。其缺点是相较于闭合式模型，所有开放式手术本身更具侵入性。另一潜在缺点是所有髓内固定技术固有的问题，即可能对髓腔造成一定程度的损伤，相较于髓外固定技术而言更为明显。

从皮肤切开到伤口闭合，整个手术过程的总时长约为30分钟。使用所提供的外科植入物，手术可在无体视显微镜的条件下进行。术后每日对动物进行监测。术后镇痛在3天后停止，因为此后所有动物均未表现出疼痛迹象（如发声、躁动、活动减少、不梳理毛发、异常姿势或对周围环境缺乏正常兴趣）。动物在术后2天内即恢复正常负重。在整个观察期间，未发现伤口感染或继发性骨折。
可能出现的最重要并发症是锁定钉植入位置错误，导致钉端突出于膝关节髁部水平（图3 A）。这主要由于瞄准装置操作不当，或使用了股骨过小的动物所致，尤其常见于体重低于20 g的小鼠。另一并发症是交锁针发生移位（图3 B）。该并发症可通过术中或术后立即进行放射影像学检查，确认植入物位置正确而避免。此问题主要由交锁针插入不完全引起。最后，在实验结束时取骨过程中曾数次遇到困难，原因是难以取出交锁针，这通常是由于针周围形成骨性桥接所致。
<p clas...

本方案描述了一种使用髓内锁定钉进行股骨截骨标准化固定的骨接合技术，可用于分析小鼠正常及缺陷性骨愈合过程。

骨愈合模型对于开发临床骨折治疗的新治疗策略至关重要。此外，小鼠模型正日益成为……

该手术技术的总体目标是标准化小鼠骨愈合的分析。该手术技术有助于回答骨愈合研究中的关键问题，例如骨形态发生蛋白和肌肉生长因子的来源以及骨修复的机制。该技术的主要优势在于股骨截骨的可重复性，以及通过使用髓内锁定钉实现的高轴向和抗旋转能力。演示该操作的是本部门的同事 Tobias Fritz。手术前1天至术后3天，在动物的饮水中添加盐酸曲马多以进行镇痛。手术当天，通过脚趾夹捏无反应来确认25至35克小鼠达到适当的镇静水平，并将动物置于加热辐射器下。剃除动物右侧后肢的全部毛发，并涂抹脱毛膏。五分钟后，去除脱毛膏并用清水清洁腿部。随后用96%乙醇对手术部位进行消毒。在无菌条件下，将小鼠仰卧位固定于手术台上，右膝屈曲，以便对膝髁进行前侧入路。接着，使用灭菌的15号手术刀片在右膝内侧髌腱旁做一5毫米切口。然后用精细镊子提起暴露的髌韧带，并用刀片小心地游离该韧带。用手术刀向侧方移动髌骨以暴露股骨的髁间窝，使用配备1毫米中心钻头的手动钻，将钻头与股骨轴线呈45度角钻入髁间窝。缓慢改变钻头方向，继续钻孔直至钻头与股骨骨轴平行，当到达髓腔时停止。当髁间窝完全开放后，将一根24号针插入贯穿整个股骨长度的髓腔内，并旋转针头以手动清理髓腔内壁。然后将24号针头更换为27号针头，并向前推进27号针头，在股骨大转子近端穿通皮质骨。取出27号针头，使用手钻在持续旋转和轴向压力下，经髁间切迹植入髓内钉，直至钉的远端到达髁部。现在将小鼠置于左侧卧位，使用手术刀沿股骨外侧骨干区域从髋关节至膝关节做纵向皮肤切口，以手术暴露股骨中段。使用小型手术剪从外侧切开筋膜，并将肌肉向股骨轴方向分离，直至暴露股骨的骨干区域。用敷料镊子在骨周围进行分离。然后撑开敷料镊子并牵拉肌肉，以暴露股骨。将瞄准装置安装到髓内钉的远端，推进装置直至其连接到髓内钉的适配器法兰上。然后将瞄准装置调整至与股骨呈前外侧角度，使用直径为1毫米的居中钻头，在近端锁孔位置对应的皮质骨上钻出一个小凹腔。接着，使用直径为0.3毫米的钻头，通过瞄准装置在对应侧和对侧的皮质骨上钻孔。通过瞄准装置插入近端锁紧销。当达到锁紧扭矩时，锁紧销传动轴将自动断开。在近端和远端锁紧销均置入后，于两枚锁紧销之间的外侧位置将瞄准装置装配锯导引器，并在持续生理盐水灌注下，使用Gigli锯进行截骨。截骨完成后，将锯片末端靠近骨骼处切断，并小心取出锯片，以避免对软组织造成损伤。取下瞄准装置，使用小镊子在标记线处剪断髓内钉残余的尾端。随后缝合股骨外侧的肌层，并采用单个缝线缝合皮肤。在膝关节前侧，复位髌骨，并用单针缝合将髌腱固定于肌肉，随后用单针缝合关闭切口。最后，将动物置于加热灯下，在密切监测下使其完全恢复。可能出现的最严重并发症是锁定钉植入位置错误，导致钉端突出于膝关节髁部。这主要是由于瞄准装置操作不当，或使用了股骨过小的动物所致，尤其是在体重低于20克的小鼠中更为明显。另一个并发症是交锁钉的脱位，这主要由钉子插入不完全引起，可通过术中或术后立即进行影像学检查确认植入物的正确位置而避免。术后五周的影像学分析证实，0.25毫米的截骨间隙已完全愈合，此时骨膜痂已几乎完全重塑。相比之下，在使用2毫米间隙固定的股骨中，截骨部位不会愈合，并且在长达10周的骨愈合过程中稳定地表现出萎缩性骨不连的形成。当截骨间隙为0.25毫米并进行固定后，组织学分析显示典型的二期骨折愈合模式，伴有骨痂形成，包括膜内成骨和软骨内成骨，至第5周时重塑为板层骨。相反，在截骨间隙为2毫米的股骨中，10周后表现为萎缩性骨不连，截骨间隙内存在大量纤维组织，且无骨愈合或骨性连接的证据。一旦掌握，若操作得当，该技术可在20分钟内完成。观看本视频后，您应能够充分理解如何将该技术作为骨折愈合研究的标准模型加以应用。

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髓内锁钉股骨截骨标准化固定用于分析正常和有缺陷的骨愈合小鼠

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