Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Adelina Curaj; Wu Zhoujun; Mareike Staudt; Elisa A. Liehn

doi:10.3791/54571

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医学

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小鼠加速动脉硬化的诱导:"电线损伤"模型

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The “Wire-Injury” Model

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Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The “Wire-Injury” Model

小鼠加速动脉硬化的诱导:"电线损伤"模型

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00:05 min

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August 25, 2020

DOI:

10.3791/54571-v

DOI:

10.3791/54571-v

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August 25, 2020

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Adelina Curaj¹, Wu Zhoujun¹, Mareike Staudt¹, Elisa A. Liehn^1,2

¹Institute for Molecular Cardiovascular Research,RWTH Aachen University, ²Human Genetic Laboratory,University of Medicine and Pharmacy

成績單

该程序的总体目标是模仿小鼠再血管化治疗后人类再治疗的状况，以研究损伤反应所涉及的分子机制。这些技术的主要优点是，它具有高度可重复性和易于执行，使研究人员能够将该方法应用于小型动物模型中。演示程序将是阿德琳娜库拉伊，我的实验室博士后。

为了诱发高脂血症，在手术前一周，在动脉硬化斑块分析之前，给6至8周大的18至20克Apoe敲除小鼠一种致畸饮食。手术当天，在确认对手趾捏没有反应后，在心颈区域剃掉麻醉小鼠，用Betadine对裸露的皮肤进行消毒。在气管上颈部的中位区域进行一厘米的皮肤切口，并分离两个脂肪体，以获得气管区域的完整视图。

使用一个缩回器保持肌肉层打开，暴露胡萝卜动脉，并使用尖锐的弯曲钳子将动脉与迷走神经和血管分开，直到内部和外部胡萝卜动脉的分叉区域可见。松散地，将一个7厘米长的0-5丝线放在主动脉的外动脉下，然后将一根松散放置的1.5厘米长0-7丝线放在靠近分叉点的外部胡萝卜动脉周围，一个松散放置的1.5厘米长的0-7丝线尽可能远离两面。将另一个打开的1.5厘米长0-7丝线在内皮德动脉下。

然后将头部的动物定位在六点钟的位置。立即，紧密关闭内胡萝卜动脉上的缝合环和外胡萝卜动脉上的特密友缝合线。使用血肉钳拉上0-5缝合线末端，以阻止血液流经普通心肌动脉。

使用小剪刀，使一个小动脉直径的一半，在两个环之间的外部胡萝卜动脉，并插入一个14英寸酒精抛光柔性导丝湿润与下降0.9%氯化钠到常见的胡萝卜动脉通过切口。为了避免在Y切口期间动脉喷发，请使用精心抛光的导丝。通过沿血管传递导线，同时旋转三次，然后紧密关闭外侧胡萝卜动脉上的近端环，并切断公共和内部胡萝卜动脉周围的缝合线，以恢复血液流动。

接下来，取出缩回器，将肌肉层和两个脂肪体返回到生理位置。用金属夹合合皮肤，然后让鼠标在红外光下在左侧恢复，并进行监控，直到完全卧床。可以使用移动染色评估新丁岛的形成。

根据外科医生的技能，每个样品的斑块大小，根据外科医生的技能，可以变化在7万到10万微米平方之间。发育的斑块类似于即时性休息，它主要由从介质中扩散和迁移的平滑肌肉细胞组成。平滑的肌肉细胞含量约占斑块的30%至40%，而在受伤血管的新细胞内发现的巨噬细胞占细胞总数的15%至25%。

重新内皮化通常达到80至90%后三个星期，应该几乎完成后四个星期。为了跟踪斑块在发育过程中的生长，根据实验问题，可以在电线损伤后多个时间点重复分析。一旦掌握，这项技术可以在15分钟内完成，如果它执行得当。

在尝试此程序时，重要的是要记住，手术区域应不断水合，以防止干燥，使电线操作更容易。