A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

外科手术的总体目标是为研究心肌肥大、重塑和功能障碍提供一个简单的平台。这种方法可以帮助回答心血管领域的关键问题，例如涉及心脏肥大和重塑的信号传导。以及在高血压心脏病中发现新的治疗靶点。

该技术的主要优点是它是一种微创方法，需要非常简单的手术技术，但结果具有高度可重复性。这些技术的影响延伸到我们对高血压心脏病的治疗。由于腹主动脉收缩会引起压力超负荷，最终导致心脏肥大、重塑和心力衰竭。

首先，使用珩磨石钝化尖端，准备一个 22 号注射器针头。然后使用钳子将针头以直角折叠。准备所需的手术材料，包括恢复笼和高压灭菌手术器械。

将大鼠保持在 200 克左右，并在受控温度下保持 12 小时的明暗循环，并自由获取食物和水。将大鼠仰卧在带有加热垫的手术平台上以维持体温。完全剃除手术区域，以避免因接触毛皮而污染伤口。

然后，用 betadine 或其他清洗剂擦洗剃干净的腹部。接下来，使用手术刀沿腹部中线切开两厘米。然后，使用生理盐水润湿腹部器官，并在手术过程中保持器官湿润。

使用棉球小心地将消化器官移位到一侧，以暴露下腔静脉和后腹膜区域。然后确定腹主动脉，它位于下腔静脉并列且通常位于下腔静脉的左侧。现在，用镊子刺穿腹膜以露出下面的血管。

轻轻隔离与肾动脉相邻的腹主动脉，并在左右肾动脉起点之间的血管下方通过一根 8 厘米长的 4/0 丝线缝合线。用缝合线打一个松散的双结，留下一个直径为 3 毫米的环。然后将钝弯曲的 22 号针头放入环内。

收紧主动脉和针头周围的结，然后立即取下针头以实现 0.7 毫米直径的收缩。用 6/0 缝合线闭合腹腔。然后使用简单的间断缝合闭合肌肉和皮肤切口。

使用碘酊擦洗手术部位以防止感染。为防止术后疼痛，用对乙酰氨基酚治疗动物并密切观察动物，直到它恢复足够的意识（如自由运动和食物摄入所示）并保持胸骨卧位。术后 10 周给大鼠称重。

麻醉动物并确认麻醉深度后，将大鼠放在金属托盘上。现在在剑突中线周围的胸部区域做一个 5 厘米的切口。使用锋利的镊子刺穿隔膜。

然后，用剪刀沿着两侧的锁骨中线剪断并去除胸腔，露出心脏。小心地沿心脏和血管边界切除心脏。然后轻轻地取出心脏，不要抓住组织。

通过将主动脉干系在灌注针上，将心脏安装在改良的 Langendorff 灌注器上。然后使用 Krebs 缓冲液灌注心脏并冲洗血液。称量心脏并计算心脏重量与体重的比率。

然后，戴着口罩，将器官放入 4% 多聚甲醛中，并在冰上固定过夜。固定心脏组织后，将其放在组织切片设备上，将其切成两毫米厚的切片，然后将切片放入包埋盒中。根据文本方案进行石蜡包埋和额外切片后，将载玻片放入装有二甲苯的罐中 30 分钟，使其脱蜡。

然后在依次稀释的酒精系列中对组织进行再水化，然后加入蒸馏水。接下来，使用足够的 picrosirius 红溶液完全覆盖组织切片并孵育 1 小时。然后使用 0.5% 乙酸溶液冲洗载玻片两次。

并用无水酒精冲洗样品两次。风干样品并用盖玻片将它们安装在合成树脂中。然后在显微镜下以 200 倍放大倍率使用可见光对载玻片进行成像。

最后，计算 picrosirius 红色阳性区占总面积的百分比，这表明纤维化的程度。如图所示，腹主动脉缩窄手术后心脏容量增加。正如较高的心脏重量与体重比所证明的那样，这是心脏肥大的一个指标。

通过使用 picrosirius 红染色，可以将胶原蛋白含量增加的纤维化心肌与正常区域区分开来。如这些染色样本所示，与对照组相比，腹主动脉缩窄手术后心脏纤维化增加。一旦掌握，如果作得当，可以在 30 分钟内完成手术。

按照此程序，可以执行其他方法，如超声心动图，以回答有关心脏功能的其他问题。经过开发，这项技术为高血压心脏病领域的研究人员探索涉及心脏肥大、重塑和衰竭的机制铺平了道路。看完这个视频，你应该对如何进行腹主动脉收缩以诱导大鼠的心脏肥大和心肌重塑有一个很好的了解。