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DOI: 10.3791/55193-v
Emmett E. Whitaker1,2, Christopher Z. Zheng1, Bruno Bissonnette1,2,3, Andrew D. Miller4, Tanner L. Koppert1,2, Joseph D. Tobias1,2, Christopher R. Pierson5,6, Fedias L. Christofi1
1Department of Anesthesiology,Ohio State University College of Medicine, 2Department of Anesthesiology and Pain Medicine,Nationwide Children's Hospital, 3Department of Anaesthesia and Critical Care Medicine,University of Toronto, 4Department of Biomedical Sciences, Section of Anatomic Pathology,Cornell University College of Veterinary Medicine, 5Department of Pathology and Anatomy,Ohio State University College of Medicine, 6Department of Pathology and Laboratory Medicine,Nationwide Children's Hospital
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
麻醉诱导的发育神经毒性(AIDN)研究集中在啮齿动物,其不广泛适用于人类。非人灵长类动物模型更相关,但成本高昂,难以用于实验。相比之下,仔猪是一种临床相关的实用动物模型,是研究麻醉神经毒性的理想选择。
该实验程序的总体目标是在临床相关的转化仔猪模型中评估麻醉剂对新生儿大脑的影响。这种方法可以帮助回答麻醉诱导的神经毒性领域的关键问题,例如毒性是如何发生的以及伴随这种毒性的发育变化。该技术的主要优点是它为研究麻醉诱导的发育神经毒性提供了一种翻译相关的动物模型,其中在整个实验过程中保持生理稳态。
在麻醉诱导期间和整个手术过程中,监测以下内容:脉搏血氧饱和度、无创血压、心电图和体温。在此过程中最关键的一步是维持生理稳态。这包括监测、温度管理、机械通气和血液化学分析。
为了准备仔猪进行手术,首先在边缘耳静脉中放置一根 24 号的外周静脉导管。用加热的强制空气加热仔猪。使用直肠温度计监测其温度,并以维持率持续输注含有等渗液体的葡萄糖。
然后将仔猪置于背侧卧位进行气管插管。接下来,用 0.5 毫升 2% 利多卡因喷洒声带,以防止插管过程中痉挛,然后将 3 毫米带囊的气管插管推进气管。固定管子,然后用听诊器听诊胸部检查双侧呼吸音,并检查持续的呼气末二氧化碳。
接下来,将眼药膏涂抹在眼睛上。在手术开始前,通过外周静脉导管施用广谱抗生素,以防止手术部位感染。现在,使用至少两次洗必泰磨砂膏对两个腹股沟进行消毒,以确保适当的无菌区域。
让手术工作人员戴上帽子、口罩、手套和护目镜。然后给动物披上窗帘。首先,在腹股沟皱褶处触诊股动脉搏动。
然后使用手术刀,做一个 1.5 厘米的浅表颅尾切口。接下来,在股薄肌的两个头部之间进行钝解剖。现在,找到股神经血管束。
它通常位于两块肌肉之间。然后用血管环或丝带隔离近端和远端的动脉。接下来,使用近端的环,将动脉向上拉至远端皮肤水平,并在近端系带上施加牵引以中断血液流动。
在保持牵引力的同时,使用肌腱切开剪刀做一个小动脉切开术。然后将导管或聚乙烯管直接推进到血管中。应立即观察血液回流情况。
现在,立即连接并固定连接到压力传感器的导管。然后用无菌纱布覆盖完成的切口,并用生理盐水冲洗导管。在整个麻醉剂暴露过程中,监测仔猪的生命体征。
寻找可能表明低血压、心律失常、低体温或高热或缺氧的扰动。在实验期间,至少每小时一次,从股动脉导管中抽取动脉血样。然后使用自动分析系统从样本中收集血液值。
充分麻醉后,取出股动脉导管并小心系紧近端血管丝线,以永久闭塞股动脉并防止出血。接下来,用 10 到 20 毫升生理盐水冲洗切口,以帮助预防感染。一旦确认完全止血,使用 3-0 丝线以简单的间断模式闭合切口。
现在,用布比卡因和肾上腺素浸润伤口以控制疼痛。然后用无菌手术皮肤粘合剂涂在切口上,停止麻醉剂,让仔猪醒来。研究了 40 头雄性仔猪。
对照组和实验组之间,年龄或体重没有显著差异。所有患者在手术过程中都受到了全面监测,并且都耐受性良好。异氟醚组实验期间的平均实验室值说明了该程序的内部一致性和可重复性。
在两年的时间里,从不同的运营商汇集了数据,观察到了这种一致性。观看此视频后,您应该对如何使用生理上适当的转化仔猪模型来回答几乎所有临床前儿科研究问题有很好的了解。不要忘记,使用麻醉剂可能很危险,因此在执行此程序时应始终采取预防措施,例如适当的麻醉剂气体清除。
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