导管内送货到兔乳腺

在这里，我们描述了一种通过导管内注射将试剂局部输送到兔乳腺的技术。此外，我们还描述了一种通过造影剂的高分辨率超声成像进行可视化和确认递送的方案。

该程序的总体目标是将水溶液输送到兔子的乳腺导管，并通过超声成像可视化导管内输送。这种方法可以帮助回答乳腺生物学领域的关键问题，例如与其他给药部位相比，治疗药物与乳腺导管环境的相互作用有何不同。该技术的主要优点是成像造影剂或任何要评估的潜在治疗方法都可以在乳房病变出现的组织局部施用。

演示该技术的是我实验室的技术人员 Amelia Clark。要开始此过程，请小心地剃掉第三对和第四对腹股沟周围区域的麻醉兔子的尾腹部。去除大部分毛发后，将脱毛霜涂抹在剃光的部位，涂抹 10 分钟后，用湿纸巾蘸温水去除乳霜。

然后用浸有酒精的纱布垫擦拭该区域以清洁注射部位。将兔子放在它的背上，放在一个 V 形槽中，槽内衬有吸水垫中的循环温水毯。要制备造影剂，请按照制造商的说明重新配制。

然后轻轻摇动小瓶混合。这里使用的造影剂在重建后在室温下可稳定保存 4 至 6 小时。在此过程中，找到要注射的第三对和第四对腹股沟奶嘴。

然后将 0.2 毫升无菌 0.9 盐水装入带有 22 号针头的 1 毫升鲁尔锁结核菌素注射器中。盐水进入注射器后，丢弃 22 号针头，并用无菌 25 号针头更换。接下来，在 guaze 垫上用 85% 异丙醇轻轻擦拭该区域。

将针头的斜面向上，注射器与动物的身体平行，将针头插入的侧面，缓慢注入 0.1 至 0.2 毫升生理盐水，以便更好地观察导管开口。然后将 0.2 毫升注射液装入 1 毫升鲁尔锁结核菌素注射器中。用拇指和食指轻轻握住奶嘴，然后轻轻抬起它以进行导管内注射。

在保持的抬起位置的同时，使用 25 号钝尖针头小心地插管感兴趣的导管。插管后，轻轻扭动钝头输液针座上的鲁尔锁注射器，直至其锁定到位。提起奶嘴并缓慢注入溶液，以尽量减少管道内快速移动的液体造成的潜在损害。

现在将大量离心的超声凝胶涂抹在感兴趣区域的皮肤上。确保凝胶中没有气泡，因为这些气泡会影响图像质量。接下来，将成像深度设置为 6 毫米。

将 21 兆赫兹传感器与凝胶接触，并在 B 模式下扫描感兴趣区域。观察扫描区域的造影剂，包括导管开口和整个导管，以确认导管内给药成功。然后捕获并保存图像。

用纱布垫从动物皮肤上去除超声凝胶。之后检查注射部位，确保区域或周围组织没有外伤迹象。周围区域的肿胀可能表明乳房脂肪垫注射而不是成功的导管内注射。

造影剂在分娩后立即定位，并在分娩后 30 分钟和分娩后 45 分钟进行可视化。试剂在乳腺导管内的持久性允许在整个过程中进行可视化。该图显示了导管内注射 0.2 毫升埃文思蓝溶液后的外观。

打开皮肤后，伊文思蓝允许看到整个乳腺导管树，并确认完整的导管结构。这张图片显示了用胭脂红明矾固定和染色后腹股沟乳腺区域的整个镶嵌标本。一旦掌握了这项技术，可以在大约 15 分钟内完成，不包括麻醉生效所需的时间。

在尝试此程序时，请务必记住在导管内分娩期间提起奶嘴以拉直导管。始终遵循您所在机构的动物福利指南。在此程序之后，可以执行其他方法，如高级成像或终点组织分析，例如 lizo 或免疫组织化学，以回答有关治疗剂递送引起的药效学或组织水平形态变化的其他问题。

开发后，这项技术为乳腺生物学研究人员未来探索乳腺导管中显像剂的递送和治疗方法铺平了道路。看完这个视频，你应该对如何进行导管内分娩到兔乳腺有了很好的了解。