April 24th, 2017
行为测试是确定脑损伤后的结果的黄金标准,并可以识别发育障碍的婴儿和儿童的存在。神经反射是这些异常的早期指标。在新生儿啮齿动物很容易地完成发育反射测试的主机进行了开发和说明。
这种新生大鼠反射方法的总体目标是学习如何快速、准确和可比较地执行这些任务。这种方法可以回答脑瘫等神经发育障碍领域的关键问题。该技术的主要优点是它提供了一种测试新生大鼠幼崽早期发育反射的方法。
与人类一样,新生啮齿动物具有早期发育反射,这为以后的发育提供了窗口。刚接触这种方法的人会很挣扎,因为反射发生得很快并且很难得分。尽可能保持一致很重要。
该技术的意义延伸到脑瘫和发育障碍的治疗和诊断。反射行为的确定是确定治疗干预和疗效的金标准。这种方法的视觉演示至关重要,因为这些步骤很难通过书面文字来学习。
首先,使大鼠适应环境和人类处理,如随附的文本协议中所述。适应后,与大鼠交配以产生一窝幼崽进行测试。从产后第三天开始,每天在固定的时间将幼崽转移到一个安静的房间。
让他们适应至少一小时,然后再进行一系列神经发育反射测试。在房间里,设置加热灯或加热垫,将幼犬的体温保持在 36.5 摄氏度。此外,每天记录幼犬的体重。
接下来,设置快门速度至少为 1/1000 秒的摄像机,以逐帧分析反射测试。放置摄像头,使其在每次测试期间位于大鼠幼崽和测试材料的正上方或旁边。对于以下每个测试,请每天执行测试,直到 pup 能够连续两天执行任务。
首次出现的日期是应记录以进行数据量化的日期。从产后第 3 天开始,进行前肢抓握反射测试。对于此测试,将一根钝棒放在幼犬每只前爪的手掌上,一次一根,然后手动施加轻微压力。
压力应略微移位前爪以确保接触,并且幼犬可以感觉到杆。抓握表现为杆周围所有手指的弯曲。当双只前爪连续两天抓住杆时,就会成功获得这种反射。
接下来,将一根钝棒靠在每个后爪的底部,并手动轻轻按压以进行后肢抓握反射测试。轻微的压力应略微移动后爪,以确保接触并且幼犬可以感觉到杆。成功抓住杆表现为杆周围的手指弯曲。
当两个后爪连续两天抓住杆时,就会获得这种反射。同样从产后第 3 天开始,进行扶正反射测试。对于此测试,将幼犬牢牢地保持在仰卧位置,使所有四只爪子都直立。
放开小狗并立即启动计时器。当幼犬能够翻转或翻身到所有四只爪子并且每只爪子都垂直于身体时,就可以实现扶正。给每只小狗最多 15 秒来实现这个目标。
从出生后第 4 天开始,进行后肢放置反射测试。对于此测试,请通过躯干将幼崽垂直置于空中。用钝面轻轻抚摸后爪的背侧,例如桌子的边缘。
正确的放置反射是当大鼠幼崽撤回受刺激的后肢,然后将后肢向下放置在该表面上时。同样从产后第 4 天开始,进行悬崖避让测试。对于此测试,将大鼠幼崽放在平坦表面的边缘,使幼崽的前爪和鼻子超过边缘。
正确的结果是保护性反应,即老鼠幼崽转身离开悬崖边缘。在产后第 6 天开始评估步态。对于此测试,将幼崽放在直径为 15 厘米的圆圈的中心,并让幼崽 30 秒离开圆圈。
当老鼠幼崽能够在不到 30 秒的时间内将两个前爪移动到圆圈外时,就会执行成功的步态。在出生后第 10 天开始分析听觉惊吓。在这里,需要能够产生巨大噪音的东西,例如铃铛。
将铃铛直接放在幼犬上。按铃,然后评估是否存在惊吓反应。当幼犬表现出远离声音的抽搐动作时,会观察到积极的惊吓反应。
从出生后第 12 天开始,将幼崽放在防滑的开放表面上,并观察幼崽移动时的姿势。不成熟的姿势表现为移动时腹部的拖动,以及前爪和后爪相对于身体的垂直指向。当幼犬可以从表面抬起腹部并且在移动时前爪和后爪都笔直或平行于身体时,就会获得成熟的姿势。
同样从出生后第 12 天开始,开始观察幼犬的眼睑。记录双眼睑睁开的那一天。在产后第 14 天,开始加速扶正测试。
对于此测试,将幼犬置于泡沫着陆垫上方 30.48 厘米的仰卧位置。放下小狗并观察它自我扶正的能力。正确扶正是指幼犬能够翻身到俯卧姿势并用爪子着地。
暴露于子宫内炎症的新生幼崽出生时明显小于对照组。膳食补充西兰花芽能够增加这些幼崽的出生体重。与出生体重一样,神经发育反射测试是异常皮质发育和成熟的预测性指标,这在明显的神经病理学不明显的情况下可能具有重要意义。
出生后,对这些组的新生儿反射后肢放置的检查显示,与对照组相比,暴露于子宫内炎症的幼崽获得这种反射的获得显着延迟。西兰花芽的膳食补充剂防止了延迟。新生儿反射悬崖回避试验的结果显示,暴露于子宫内炎症的幼仔在获得保护性反应方面显着延迟。
同样,西兰花芽的消费防止了显着的延误。在检查新生儿反射步态后也观察到相同的结果。在此过程中,可以执行其他方法,例如每日体重记录,以回答其他问题,例如每日生长速度、追赶性增长、受伤的严重程度和生长受限的影响。
开发后,这项技术为神经科学领域的研究人员探索新生啮齿动物的发育反射测试铺平了道路。看完这个视频,你应该对如何对新生大鼠幼崽进行早期发育反射测试有一个很好的了解。此外,您应该了解早期行为反射的重要性,因为它们提供了损伤的早期生物标志物和治疗干预的效果。
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本文介绍了一种评估新生大鼠早期发育反射的方法,该方法可提供关于潜在发育障碍的见解。该技术旨在促进这些反射的准确和一致测试,这对于理解神经发育问题至关重要。