Name: 游离组织移植的模型:鼠上腹部游离皮瓣 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
Description: 学习大鼠上腹部游离皮瓣移植技术，掌握显微外科血管吻合与皮瓣制备方法。该模型为整形外科与显微外科培训提供标准化实验方案，帮助外科医师提升游离组织移植操作技能。

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其中一位作者（Diogo Casal）获得了由葡萄牙卡洛斯·古尔本基安基金会、尚帕利莫德基金会、卫生部以及科学技术基金会共同资助的“先进医学教育计划”项目资助。
作者谨此感谢 Alberto Severino 先生在视频拍摄与编辑过程中提供的技术支持。作者还感谢 Octávio Chaveiro 先生、Marco Costa 先生和 Carlos Lopes 先生在准备本文所展示的动物标本过程中给予的帮助。
最后，作者谨向 Gracinda Menezes 女士致以诚挚感谢，感谢她在动物获取与饲养相关的各项后勤工作中提供的帮助。

所有涉及动物受试者的实验程序均经葡萄牙里斯本新诺瓦大学医学院机构动物护理与使用委员会及伦理委员会批准（08/2012/CEFCM）。
1. 手术操作准备说明
<ol>
	<li>使用体重为250至350克的成年Wistar大鼠。</li>
	<li>保持大鼠有食物和水 随意摄取 12&#160;手术前7天的明暗循环</li>
	<li>称重小鼠以确定所需麻醉剂的剂量。</li>
	<li>手术前对所有外科器械进行高压灭菌。</li>
	<li>将手术所需的所有外科用品和器械按布局摆放（参见材料表）。</li>
	<li>在手术显微镜下使用常规和显微外科器械进行手术。</li>
	<li>放置恒温毯、直肠探头和加热灯。</li>
	<li>放置一个20&#160;37 ºC 温水浴中的含 0.9% 氯化钠溶液的灭菌小瓶</li>
	<li>佩戴无菌手套，使用酒精溶液对操作环境的所有表面进行消毒。随后脱去手套。</li>
	<li>戴上刷手帽和口罩。</li>
	<li>用清水和肥皂消毒双手，并戴上另一副灭菌手套。</li>
	<li>穿戴无菌手术衣。</li>
</ol>
2. 麻醉与皮肤准备
注意：由于需穿戴无菌手术衣和手套，以下四个步骤请由助手协助完成。
<ol>
	<li>通过腹腔注射给予氯胺酮和地西泮混合物使大鼠麻醉。剂量为每千克体重5 mg氯胺酮和每千克体重0.25 mg地西泮。在整个操作过程中，通过夹捏脚趾以及观察呼吸频率来判断麻醉深度8,14,15,32。</li>
	<li>在眼睛前表面涂抹眼用凝胶，以防止角膜擦伤。</li>
	<li>使用脱毛膏去除腹部腹侧表面的毛发。脱毛后，用温盐水清除残留的脱毛膏。</li>
	<li>在手术区域喷洒足量的酒精溶液。让液体保留在手术区域，不要擦拭。等待至少15秒。重复此操作3次。在继续手术前，确保接触时间至少为2分钟。其他研究单位可能采用其他方案来预防手术部位感染。</li>
	<li>佩戴无菌手套，在大鼠两侧各放置一块手术巾。</li>
</ol>
3. 供体部位手术操作
<ol>
	<li>设定上腹部皮瓣的边界，范围约为长 5 cm、宽 3 cm。
	<ol>
		<li>使用外科皮肤标记笔，从胸骨剑突沿大鼠腹部腹侧中线画线至耻骨联合，以标记腹侧中线。</li>
		<li>在大鼠左侧，使用外科皮肤标记笔画两条与第一条线垂直的线：一条位于胸廓后方紧邻处，另一条与前者平行，位于腹股沟褶前方紧邻处（图 3 和 图 6）。</li>
		<li>用外科皮肤标记笔在距中线约 3 cm 处画一条与中线平行的线，标记侧方切口位置。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>皮瓣切取
	<ol>
		<li>使用 15 号手术刀片切开皮肤，直至达到panniculus carnosus层。</li>
		<li>在panniculus carnosus平面深部，使用电凝设备继续切开，直至达到肌肉筋膜层。</li>
		<li>从内侧向外侧、从头侧向尾侧掀起皮瓣，暴露皮瓣的血管蒂。</li>
		<li>仔细结扎并切断从深层肌肉层发出并进入皮瓣深面的穿支血管。</li>
		<li>在皮瓣尾侧放置牵开器，轻柔分离周围疏松组织，小心解剖皮瓣的血管蒂（图 7）。</li>
		<li>使用 9/0 尼龙线结扎并切断股外侧旋动脉和静脉。</li>
		<li>游离股动脉和静脉。若存在向邻近肌肉发出的分支，使用 9/0 尼龙线结扎并切断这些分支。</li>
		<li>首先使用双极血管夹夹闭股静脉近端，随后夹闭其远端；然后夹闭股动脉远端，最后夹闭其近端。</li>
		<li>夹闭股动脉远端，最后夹闭其近端。</li>
		<li>在浅腹壁静脉和浅腹壁动脉各放置一个单极血管夹。使用直显微外科剪分别在浅腹壁动脉和静脉的起始端和终止端将其剪断。</li>
		<li>用含肝素生理盐水（10 IU/ml）充分冲洗这些血管的管腔，直至管腔内无血液或残余物可见33。</li>
		<li>在血管断端附近牵拉并修剪一圈外膜组织。</li>
		<li>使用艾里森钳将腹壁下动脉皮瓣转移至颈部（图 8）。</li>
		<li>用间断皮下 5/0 可吸收缝线关闭供区创面。</li>
		<li>用间断 5/0 尼龙缝线缝合皮肤。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. 受体部位手术操作
<ol>
	<li>暴露受区血管
	<ol>
		<li>使用外科皮肤标记笔，在左侧胸锁乳突肌（SCM）外侧缘画一条线。</li>
		<li>使用外科皮肤标记笔，在左侧锁骨上方紧邻处画另一条与之平行的线。这两条线必须在左侧胸锁关节处相交。</li>
		<li>使用15号手术刀片切开皮肤。</li>
		<li>使用电凝设备切开皮下组织。</li>
		<li>使用解剖剪在胸锁乳突肌外侧游离出颈外静脉。</li>
		<li>分离并结扎颈外静脉的属支（见图9）。</li>
		<li>使用9/0尼龙缝线在下颌下方结扎颈外静脉。</li>
		<li>在上述结扎线远端放置单个静脉夹，并使用直显微外科剪剪断颈外静脉。</li>
		<li>用浓度为10 IU/ml的肝素化生理盐水冲洗静脉管腔。</li>
		<li>分离胸锁乳突肌内侧缘，并将其向外侧牵拉，从而暴露颈总动脉和迷走神经（见图10）。</li>
		<li>使用电凝设备在胸锁乳突肌中三分之一处做横向切口。</li>
		<li>将牵开器置于胸锁乳突肌深面与带状肌之间。</li>
		<li>小心分离迷走神经与颈总动脉，注意避免损伤这些结构。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>血管吻合
	<ol>
		<li>在颈总动脉上放置双动脉夹。</li>
		<li>在颈总动脉外侧壁缝合一针9/0尼龙线，并利用此缝线牵拉血管壁。</li>
		<li>使用直显微外科剪在该部位血管壁上剪开一个开口。</li>
		<li>使用间断10/0尼龙缝线，将皮瓣的浅表腹壁下动脉与颈总动脉在刚创建的动脉开口处行端侧吻合。</li>
		<li>接近颈外静脉近端残端和皮瓣的浅表腹壁下静脉，检查这两条静脉的管径。
		<ol>
			<li>如果管径差异轻微至中等，使用扩张钳扩张浅表腹壁下静脉断端的管腔。</li>
			<li>如果管径差异非常明显，在使用钳夹扩张的同时，将浅表腹壁下静脉断端以30°至45°角斜剪成斜面。</li>
			<li>使用间断11/0尼龙缝线完成静脉吻合。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>移除放置在皮瓣血管上的单个血管夹。</li>
		<li>移除置于股静脉上的双血管夹。</li>
		<li>移除置于股动脉上的双血管夹。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>评估吻合口通畅性与功能
	<ol>
		<li>在移除血管夹后3分钟内，确认皮瓣的动脉和静脉是否充分扩张，且无明显出血（见图11）。
		<ol>
			<li>若在此期间出现出血，可在吻合口处覆盖湿盐水纱布并施加轻柔压力。</li>
			<li>若吻合口出血在3分钟后仍未停止，可在重新放置血管夹后，视需要添加额外的11/0尼龙间断缝线。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>将皮瓣连接至颈部血管，并用温盐水浸湿的纱布包裹，等待10分钟。</li>
		<li>评估皮瓣灌注情况及颈部创面止血效果。检查吻合口有无出血、血栓形成或过度牵拉迹象。</li>
		<li>从使用5/0皮内间断缝线开始，将皮瓣固定于受区。</li>
		<li>使用5/0尼龙间断缝线缝合皮肤（见图12）。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. 术后护理
<ol>
	<li>将大鼠置于其单独的笼内，保持右侧卧位恢复。在笼子下方放置调至低温的电热垫以保持笼内温暖，并在笼子与电热垫之间放置一层薄布，以防体温过高。</li>
	<li>持续观察动物，每5分钟将其翻转至对侧卧位，直至其恢复胸卧位并能够自主活动。</li>
	<li>术后将大鼠单独饲养，直至术后两周拆除手术缝线。</li>
	<li>术后3天内每日皮下注射一次抗炎药物（1 mg/kg），用于术后镇痛。</li>
</ol>
6. 瓣膜评估
<ol>
	<li>将食物奖励置于大鼠头部上方，通过肉眼观察评估皮瓣的存活情况。</li>
	<li>若按前述步骤操作时暴露不足，可让助手轻轻触压大鼠肩胛间区域，同时检查皮瓣情况。</li>
	<li>采用数码摄影结合ImageJ软件，对伤口裂开、皮瓣表皮剥脱、充血、淤血和/或坏死区域进行定量评估，具体方法详见Trujillo et al.15的详细说明。</li>
</ol>

<ol><li>Morain, W. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMorain%2C+WD+%22Plastic+Surgery%22">Plastic Surgery</a>. Mathes, S. J. 1, Saunders. 27-34 (2006).</li>
<li>Christoforou, D., Alaia, M., Craig-Scott, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+management+of+acute+traumatic+injuries+of+the+hand+and+fingers%5BTitle%5D)+AND+%22Bull+Hosp+Jt+Dis%22%5BJournal%5D)">Microsurgical management of acute traumatic injuries of the hand and fingers.</a> Bull Hosp Jt Dis. 71 (1), 6-16 (2013).</li>
<li>Santoni-Rugiu, P., Sykes, P. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSantoni-Rugiu%2C+P+%22A+History+of+Plastic+Surgery%22">A History of Plastic Surgery</a>. Santoni-Rugiu, P., Sykes, P. J. , Springer. 3 79-119 (2007).</li>
<li>Tamai, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTamai%2C+S+%22Experimental+and+Clinical+Reconstructive+Microsurgery%22">Experimental and Clinical Reconstructive Microsurgery</a>. Tamai, S., Usui, M., Yoshizu, T. , Springer-Verlag. Ch. 1 3-24 (2003).</li>
<li>Bettencourt-Pires, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+and+grafts+-+From+Ancient+Myths%2C+to+Modern+Reality%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Anat%22%5BJournal%5D)">Anatomy and grafts - From Ancient Myths, to Modern Reality.</a> Arch Anat. 2 (1), 88-107 (2014).</li>
<li>Casal, D., Gomez, M. M., Antunes, P., Candeias, H., Almeida, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defying+standard+criteria+for+digital+replantation%3A+A+case+series%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Surg+Case+Rep%22%5BJournal%5D)">Defying standard criteria for digital replantation: A case series.</a> Int J Surg Case Rep. 4 (7), 597-602 (2013).</li>
<li>Gomez, M. M., Casal, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconstruction+of+large+defect+of+foot+with+extensive+bone+loss+exclusively+using+a+latissimus+dorsi+muscle+free+flap%3A+a+potential+new+indication+for+this+flap%5BTitle%5D)+AND+%22J+Foot+Ankle+Surg%22%5BJournal%5D)">Reconstruction of large defect of foot with extensive bone loss exclusively using a latissimus dorsi muscle free flap: a potential new indication for this flap.</a> J Foot Ankle Surg. 51 (2), 215-217 (2012).</li>
<li>Plenter, R. J., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+heterotopic+heart+transplant+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Murine heterotopic heart transplant technique.</a> J Vis Exp. (89), (2014).</li>
<li>Pichierri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+set+up+a+microsurgical+laboratory+on+small+animal+models%3A+organization%2C+techniques%2C+and+impact+on+residency+training%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurg+Rev%22%5BJournal%5D)">How to set up a microsurgical laboratory on small animal models: organization, techniques, and impact on residency training.</a> Neurosurg Rev. 32 (1), 101-110 (2009).</li>
<li>Klein, I., Steger, U., Timmermann, W., Thiede, A., Gassel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+training+course+for+clinicians+and+scientists+at+a+German+University+hospital%3A+a+10-year+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Microsurgical training course for clinicians and scientists at a German University hospital: a 10-year experience.</a> Microsurgery. 23 (5), 461-465 (2003).</li>
<li>Fukui, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFukui%2C+A+%22Experimental+and+Clinical+Reconstructive+Microsurgery%22">Experimental and Clinical Reconstructive Microsurgery</a>. Tamai, S., Usui, M., Yoshizu, T. , Springer-Verlag. Ch. 1 35-43 (2004).</li>
<li>Ad-El, D. D., Harper, A., Hoffman, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+replantation+teaching+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Digital replantation teaching model in rats.</a> Microsurgery. 20 (1), 42-44 (2000).</li>
<li>Ruby, L. K., Greene, M., Risitano, G., Torrejon, R., Belsky, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experience+with+epigastric+free+flap+transfer+in+the+rat%3A+technique+and+results%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Experience with epigastric free flap transfer in the rat: technique and results.</a> Microsurgery. 5 (2), 102-104 (1984).</li>
<li>Edmunds, M. C., Wigmore, S., Kluth, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+transverse+rectus+abdominis+myocutaneous+flap%3A+a+rat+model+of+myocutaneous+ischemia+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">In situ transverse rectus abdominis myocutaneous flap: a rat model of myocutaneous ischemia reperfusion injury.</a> J Vis Exp. (76), (2013).</li>
<li>Trujillo, A. N., Kesl, S. L., Sherwood, J., Wu, M., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demonstration+of+the+rat+ischemic+skin+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Demonstration of the rat ischemic skin wound model.</a> J Vis Exp. (98), (2015).</li>
<li>Siemionow, M. Z. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSiemionow%2C+MZ+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%3A+Experimental+models+and+research+designs%22">Plastic and Reconstructive Surgery: Experimental models and research designs</a>. Siemionow, M. Z. , Springer - Verlag. Ch. 1-7 3-67 (2015).</li>
<li>Petry, J. J., Wortham, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomy+of+the+epigastric+flap+in+the+experimental+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">The anatomy of the epigastric flap in the experimental rat.</a> Plast Reconstr Surg. 74 (3), 410-413 (1984).</li>
<li>Tamai, S., Usui, M., Yoshizu, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHirase%2C+Y+%22Experimental+and+Clinical+Reconstructive+Microsurgery%22">Experimental and Clinical Reconstructive Microsurgery</a>. 6, Springer-Verlag. Ch. 6 111-114 (2004).</li>
<li>Zhang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+transfer+of+the+rectus+abdominis+muscle+and+myocutaneous+flap+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Microvascular transfer of the rectus abdominis muscle and myocutaneous flap in rats.</a> Microsurgery. 14 (6), 420-423 (1993).</li>
<li>Tonken, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+transplant+of+the+gastrocnemius+muscle+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Microvascular transplant of the gastrocnemius muscle in rats.</a> Microsurgery. 14 (2), 120-124 (1993).</li>
<li>Miyamoto, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Free+pectoral+skin+flap+in+the+rat+based+on+the+long+thoracic+vessels%3A+a+new+flap+model+for+experimental+study+and+microsurgical+training%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Free pectoral skin flap in the rat based on the long thoracic vessels: a new flap model for experimental study and microsurgical training.</a> Ann Plast Surg. 61 (2), 209-214 (2008).</li>
<li>Nasir, S., Aydin, A., Kayikcioglu, A., Sokmensuer, C., Cobaner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+experimental+composite+flap+model+in+rats%3A+gluteus+maximus-tensor+fascia+lata+osteomuscle+flap%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">New experimental composite flap model in rats: gluteus maximus-tensor fascia lata osteomuscle flap.</a> Microsurgery. 23 (6), 582-588 (2003).</li>
<li>Coskunfirat, O. K., Islamoglu, K., Ozgentas, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Posterior+thigh+perforator-based+flap%3A+a+new+experimental+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Posterior thigh perforator-based flap: a new experimental model in rats.</a> Ann Plast Surg. 48 (3), 286-291 (2002).</li>
<li>Ozkan, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+flap+model+in+rats%3A+iliac+osteomusculocutaneous+flap%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">A new flap model in rats: iliac osteomusculocutaneous flap.</a> Ann Plast Surg. 47 (2), 161-167 (2001).</li>
<li>Padubidri, A. N., Browne, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+in+flap+design+of+the+epigastric+artery+flap+in+rats--a+new+experimental+flap+model%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Modification in flap design of the epigastric artery flap in rats--a new experimental flap model.</a> Ann Plast Surg. 39 (5), 500-504 (1997).</li>
<li>Strauch, B., Murray, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+composite+graft+with+immediate+suture+anastomosis+of+its+vascular+pedicle+measuring+less+than+1+mm.+in+external+diameter+using+microsurgical+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Transfer of composite graft with immediate suture anastomosis of its vascular pedicle measuring less than 1 mm. in external diameter using microsurgical techniques.</a> Plast Reconstr Surg. 40 (4), 325-329 (1967).</li>
<li>Green, C. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGreen%2C+CE+%22Anatomy+of+the+Rat.+First+edn%22">Anatomy of the Rat. First edn</a>. , Hafner Publishing Company. 124-153 (1968).</li>
<li>Greene, E. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGreene%2C+EC+%22Anatomy+of+the+rat%22">Anatomy of the rat</a>. , Hafner. New York. (1959).</li>
<li>Langworthy, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+morphological+study+of+the+panniculus+carnosus+and+its+genetical+relationship+to+the+pectoral+musculature+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Anat%22%5BJournal%5D)">A morphological study of the panniculus carnosus and its genetical relationship to the pectoral musculature in rodents.</a> Am J Anat. 35 (2), 283-302 (1925).</li>
<li>Popesko, P., Ratjová, V., Horák, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPopesko%2C+P+%22A+Colour+Atlas+of+the+Anatomy+of+Small+Laboratory+Animals%22">A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals</a>. 2, Saunders. 13-104 (1992).</li>
<li>Brown, S. H., Banuelos, K., Ward, S. R., Lieber, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Architectural+and+morphological+assessment+of+rat+abdominal+wall+muscles%3A+comparison+for+use+as+a+human+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Architectural and morphological assessment of rat abdominal wall muscles: comparison for use as a human model.</a> J Anat. 217 (3), 196-202 (2010).</li>
<li>Harder, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+tissue+injury+in+the+dorsal+skinfold+chamber+of+the+mouse%3A+a+skin+flap+model+to+investigate+acute+persistent+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Ischemic tissue injury in the dorsal skinfold chamber of the mouse: a skin flap model to investigate acute persistent ischemia.</a> J Vis Exp. (93), e51900(2014).</li>
<li>Cox, G. W., Runnels, S., Hsu, H. S., Das, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+heparinised+saline+irrigation+solutions+in+a+model+of+microvascular+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">A comparison of heparinised saline irrigation solutions in a model of microvascular thrombosis.</a> Br J Plast Surg. 45 (5), 345-348 (1992).</li>
<li>Gurunluoglu, R., Siemionow, M. Z. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGurunluoglu%2C+R+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%3A+Experimental+models+and+research+designs%22">Plastic and Reconstructive Surgery: Experimental models and research designs</a>. Siemionow, M. Z. , Spronger. Ch. 6 53-62 (2015).</li>
<li>Nasir, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNasir%2C+S+%22Plast+Reconstr+Surg%22">Plast Reconstr Surg</a>. , Springer. 227-236 (2015).</li>
<li>Parsa, F. D., Spira, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+anastomotic+techniques+in+the+experimental+transfer+of+free+skin+flaps%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Evaluation of anastomotic techniques in the experimental transfer of free skin flaps.</a> Plast Reconstr Surg. 63 (5), 696-699 (1979).</li>
<li>Dunn, R. M., Huff, W., Mancoll, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Rat+Rectus+Abdominis+Myocutaneous+Flap%3A+A+True+Myocutaneous+Flap+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">The Rat Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A True Myocutaneous Flap Model.</a> Ann Plast Surg. 31 (4), 352-357 (1993).</li>
<li>Özkan, Ö, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+flap+model+in+rats%3A+iliac+osteomusculocutaneous+flap%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">A new flap model in rats: iliac osteomusculocutaneous flap.</a> Ann Plast Surg. 47 (2), 161-167 (2001).</li>
<li>Ozkan, O., Koshima, I., Gonda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+supermicrosurgical+flap+model+in+the+rat%3A+a+free+true+abdominal+perforator+flap+with+a+short+pedicle%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">A supermicrosurgical flap model in the rat: a free true abdominal perforator flap with a short pedicle.</a> Plast Reconstr Surg. 117 (2), 479-485 (2006).</li>
<li>Dorsett-Martin, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+models+of+skin+wound+healing%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Rat models of skin wound healing: a review.</a> Wound Repair Regen. 12 (6), 591-599 (2004).</li>
<li>Ghali, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treating+chronic+wound+infections+with+genetically+modified+free+flaps%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Treating chronic wound infections with genetically modified free flaps.</a> Plast Reconstr Surg. 123 (4), 1157-1168 (2009).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

获得稳定皮瓣存活的最重要方面是在显微外科技术的各个步骤中注重细节。例如，为了清晰观察血管、手术器械以及精细的缝合线，可在血管下方放置无菌的彩色塑料背景，这非常有帮助。与许多研究人员一样，我们更倾向于使用无菌的黄色或绿色气球碎片（图7 和 图11）。这种背景还有一个额外优点，即能最大限度减少缝合线与周围结构的粘连，而粘连有时会导致需要过度牵拉缝线，进而可能引起血管撕裂。最后，使用背景还有一个附加优势，即能够降低将潜在的促血栓组织碎片无意中带入吻合部位的可能性。
考虑到皮瓣的血管非常纤细且脆弱，操作时不应夹住血管的全宽，以免造成内膜损伤，进而导致血管内血栓形成和皮瓣失败。为防止意外损伤皮瓣血管及受区血管，更安全的做法是充分结扎并切断邻近的属支，从而便于对这些血管进行操作。
在开始吻合前，必须将血管置于最终位置，尽量避免血管扭曲或皮瓣蒂部发生扭转。由于这些血管管径细小且质地脆弱，通常难以明确辨认。一个有效的技巧是用3针缝线将皮瓣固定在最终位置，缝合点应远离吻合区域。随后，若存在疑问，可暂时打开位于皮瓣蒂部的血管夹，用浓度为10 IU/mL的肝素化生理盐水灌注血管腔，直至血管充盈。这样可使血管呈现出血流灌注后的形态，与吻合完成后撤除血管夹时的实际情况一致。
此外，在整个手术过程中，尤其是在打完最后的结之前，检测血管内是否存在气泡（即使很小）至关重要。如果气泡位于远离血管吻合段的部位，可用显微外科镊子轻轻挤捏血管，将气泡驱赶出去。如果气泡靠近吻合部位，简单的冲洗即可使密度较低的气泡轻松从血管腔内排出。若未能及时发现气泡的存在，极有可能因皮瓣血管管径纤细而导致皮瓣发生不可逆的缺血和坏死。
此外，在缝合和打结时必须格外小心，以确保：包含血管的三层结构（内膜、中膜和外膜）；实现良好的血管外翻，以保证充分的内膜接触，这对吻合口的封闭和内皮细胞再生至关重要；避免血管组织接触不紧密，否则会导致吻合口功能不全，即出血；避免夹持过多血管组织，否则会引起吻合口狭窄并易于形成血栓，进而可能分别导致静脉淤血或皮瓣灌注不良，当受累部位为静脉或动脉时尤为如此。
最后，整个手术过程中必须确保完全止血，尤其是在分离皮瓣的深面时。否则，很可能导致血肿形成和大鼠死亡。
技术的改进与故障排除
作者观察到，使用电凝器在胸锁乳突肌中段做横向切口，不仅有助于更好地暴露颈动脉，还能最大限度地降低未来动脉吻合口过度张力的风险。
另一个重要的技术要点是，应从血管的后壁开始吻合，以尽量降低在较易暴露的前壁缝合时意外缝住后壁的风险。如果后壁被缝合至吻合口的前侧，则几乎必然会导致血管通畅性丧失，这种闭塞可能立即因机械原因发生，也可能在数小时内因血栓形成而出现8。
如果由于大鼠腹壁上血管的管径过小而认为其吻合在技术上过于困难，则可在腹壁上血管起始处远端结扎股血管，并将其作为腹壁上皮瓣的血管蒂。这样可使用管径更大的血管（股动脉管径为1.0至1.2 mm；股静脉管径为1.2至1.5 mm）。此外，通过游离并结扎股血管的其他属支，可获得超过2 cm的血管蒂长度，从而有利于皮瓣的植入18,34,35。
可重复性
我们十多年的教学与研究经验强烈表明，大鼠腹直肌上血管皮瓣是一种可重复的游离组织移植模型11,13,17,18,26。该模型可轻松纳入显微外科课程，是显微外科培训学员良好的教学与训练模型11,13,17,18,26。根据我们的经验，尽管初学者在技术上起初面临一定挑战，但在经过一定训练后，70%至80%的病例可成功将游离的腹直肌上血管皮瓣移植至大鼠颈部，且术后仅出现轻微甚至无组织坏死。这些结果与文献中普遍报道的结果一致13,18,36。
相对于现有方法的意义
已有多种游离皮瓣在大鼠中被描述10,16,18,37-39。其中最常用于教学和科研的是横行腹直肌肌皮瓣、背阔肌和前锯肌肌瓣、后肢再植模型以及腹壁上皮瓣（腹股沟皮瓣）18,35。这些皮瓣因其解剖结构稳定且血管蒂较长而受到青睐。腹壁上皮瓣的供区并发症相对较少，因其分离位于肌筋膜上方18，可被认为是最具优势的皮瓣之一。此外，腹壁上皮瓣最早于1967年被描述，是大鼠中首个被报道的皮瓣模型34,35。这仅比Goldwyn首次描述动物实验皮瓣晚了4年。有趣的是，Goldwyn所描述的皮瓣为犬的腹股沟皮瓣34。
该技术的局限性
该模型的两个主要局限性在于：需要显微外科技术才能完成手术，以及根据不同研究者的报告，在20%至25%的病例中会出现明显的坏死13,18,36。本研究所呈现模型的另一个潜在局限性是皮瓣的自体吞噬现象。然而，与上述研究者所述一致，这种情况较为罕见，几乎仅发生在皮瓣完全坏死的病例中。
该技术的未来应用
大鼠上腹部游离皮瓣可用于组织灌注、组织修复和外科伤口感染的实验研究40,41。其营养血管特别适用于注射含有感兴趣物质（如药物、病毒载体或脂质体）的溶液，这些物质主要产生局部或区域性的效应30,31。此外，还可以在皮瓣下方放置病原体、异物、放射性粒子或化学物质，以模拟多种疾病过程及潜在治疗方法30,31。

自20世纪70年代以来，游离组织移植在临床实践中被越来越多地用于修复缺失的组织1-5。该技术使得因肿瘤切除、创伤、感染、畸形或烧伤等原因造成的复杂且原本无法治疗的缺损得以重建1-7。此类游离皮瓣尤其适用于头颈部、手部、足部以及会阴部等解剖结构高度复杂区域的重建1,4。
然而，即使在今天，外科住院医师在使用显微外科技术及器械进行游离皮瓣的切取、转移和嵌入时，仍常常被其中多个步骤的复杂性所困扰8,9。此外，普遍认为，要成为一名熟练的显微外科医生，必须在动物模型上进行大量的实验性训练4,8-13。
此外，游离组织移植领域的基础与转化研究具有重要的临床潜力8,14-16。然而，由于缺乏有关手术操作技术细节的信息，研究人员常对使用组织移植的显微外科模型望而却步4,8-14。大鼠是显微外科研究和培训的理想动物模型，因其相对成本较低、易于饲养，且便于频繁操作8,11,13,14,17,18。
尽管已有多种游离骨、肌肉和皮瓣在大鼠中被描述18-24，但用于教学目的最广泛使用的仍是游离脐旁筋膜皮瓣9,12,13,18,25。该游离皮瓣最早由 Strauch 和 Murray 于 1967 年描述，此后因其多种优势而日益普及，包括稳定的血管解剖结构、相对容易的解剖操作、较粗的营养血管，以及供区皮肤的冗余性，使得皮瓣切取后缺损能够直接闭合4,9-11,13,17,18,25-28。
皮瓣解剖与组织学 
腹壁上区皮瓣由浅腹壁上动脉和静脉供血（图1）。这些血管分别起源于股动脉并汇入股静脉。浅腹壁上静脉的平均管径为0.6至0.8 mm，而浅腹壁上动脉的管径为0.3至0.5 mm，两者形成对比（图2）17,18。浅腹壁上动脉发出两个主要分支：外侧支和内侧支，这两支进一步多次分叉，形成毛细血管网，供应腹壁上区大部分皮肤组织。这些毛细血管汇入浅腹壁上静脉的属支，其走行与动脉树平行（图2）13,17,18。 图3 中的示意图显示了腹外侧壁由浅腹壁上血管供血的区域，该区域可被游离形成腹壁上区皮瓣。该皮瓣最长可达5 cm，宽达3 cm13,17,18。
从组织学上看，皮瓣由覆盖腹外侧腹壁肌肉的皮肤组织构成（图4）13,17,18。其包含由真皮和表皮组成的表层皮肤。皮肤下方为一层脂肪组织，称为panniculus adiposus。此层下方还有一层横纹肌，称为panniculus carnosus18,28,29。panniculus carnosus下方为疏松的蜂窝组织，位于覆盖大块腹肌的深筋膜浅层。因此，该皮瓣是一个复合组织块，包含上述所有层次，但不包括深部肌肉筋膜（图5）13,17,18,27-31。

<table><tbody><tr><td>皮肤标记笔（Skin Skribe Surgical Skin Marker）</td><td>Moore Medical</td><td>31456</td><td>https://www.mooremedical.com/index.cfm?/Skin-Skribe-Surgical-Skin-Marker/&lt;br/&gt; &amp;amp;PG=CTL&amp;amp;CS=&lt;br/&gt; HOM&amp;amp;FN=ProductDetail&amp;amp;&lt;br/&gt; PID=1740&amp;amp;spx=1</td></tr><tr><td>微型牵开器</td><td>Fine Science Tools</td><td>RS-6540</td><td>http://www.finescience.de</td></tr><tr><td>尖端0.8 mm弯头Graeffe镊子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td>http://www.finescience.de</td></tr><tr><td>Acland夹钳</td><td>Fine Science Tools</td><td>00398 V</td><td>http://www.merciansurgical.com/aclandclamps.pdf</td></tr><tr><td>夹钳施加器</td><td>Fine Science Tools</td><td>CAF-4</td><td>http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf</td></tr><tr><td>高温电凝器</td><td>Fine Science Tools</td><td>AA03</td><td>http://www.boviemedical.com/products_aaroncauteries_high.asp</td></tr><tr><td>微型血管扩张器 11 cm 0.3 mm尖端 00124</td><td>Fine Science Tools</td><td>D-5a.2</td><td>http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>微型珠宝镊 11 cm弯头 00109</td><td>Fine Science Tools</td><td>JFA-5b</td><td>http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>微型珠宝镊 11 cm直头 00108</td><td>Fine Science Tools</td><td>JF-5</td><td>http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>Acland单夹 B-1V（成对）</td><td>Fine Science Tools</td><td>396</td><td>&amp;nbsp;http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>圆柄微型剪刀 15 cm直头</td><td>Fine Science Tools</td><td>67</td><td>&amp;nbsp;http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>虹膜剪 11.5 cm弯头 EASY-CUT</td><td>Fine Science Tools</td><td>EA7613-11</td><td>&amp;nbsp;http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>梅奥剪 14 cm直刃斜面刀片 EASY-CUT</td><td>Fine Science Tools</td><td>EA7652-14</td><td>&amp;nbsp;http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>Derf持针器 12 cm TC</td><td>Fine Science Tools</td><td>703DE12</td><td>&amp;nbsp;http://www.merciansurgical.com</td></tr><tr><td>Monosyn 5-0</td><td>B.Braun</td><td>15423BR</td><td>http://www.mcfarlanemedical.com.au/&lt;br/&gt; 15423BR/&lt;br/&gt; SUTURE-MONOSYN-5_or_0-16MM-70CM-(C0023423)-BOX_or_36/pd.php</td></tr><tr><td>Ethilon 5-0</td><td>Ethicon</td><td>W1618</td><td>http://www.farlamedical.co.uk/category_Ethilon-Suture-1917/Ethilon-Sutures/</td></tr><tr><td>Dafilon 10-0</td><td>B.Braun</td><td>G1118099</td><td>http://www.bbraun.com/cps/rde/xchg/bbraun-com/hs.xsl/products.html?prid=PRID00000816</td></tr><tr><td>Veet敏感肌肤脱毛膏 芦荟和维生素E 100 ml</td><td>Veet</td><td></td><td>http://www.veet.co.uk/products/creams/creams/veet-hair-removal-cream-sensitive-skin/</td></tr><tr><td>Instrapac - Adson有齿镊（超细）</td><td>Fine Science Tools</td><td>7973</td><td>http://www.millermedicalsupplies.com</td></tr><tr><td>Castroviejo持针器</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td>http://s-and-t.ne</td></tr><tr><td>直头蚊式钳</td><td>Fine Science Tools</td><td>91308-12</td><td>http://www.finescience.de</td></tr><tr><td>Cutasept F皮肤消毒剂</td><td>Bode Chemie</td><td></td><td>http://www.productcatalogue.bode-chemie.com/products/skin/cutasept_f.php</td></tr><tr><td>Lacri-lube眼膏 5g</td><td>Express Chemist</td><td>LAC101F</td><td>http://www.expresschemist.co.uk/lacri-lube-eye-ointment-5g.html</td></tr><tr><td>灌洗用生理盐水</td><td>Hospira, Inc.</td><td>0409-6138-22</td><td>http://www.hospira.com/en/search?q=sodium+chloride+irrigation%2C+usp&amp;amp;fq=contentType%3AProducts</td></tr><tr><td>肝素钠溶液（5,000 IU/ml）</td><td>B.Braun</td><td></td><td>http://www.bbraunusa.com/products.html?prid=PRID00006982</td></tr><tr><td>美洛昔康（Metacam）</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td></td><td>http://www.bi-vetmedica.com/species/pet/products.html</td></tr><tr><td>加热灯 HL-1</td><td>Harvard Apparatus</td><td>727562</td><td>https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/&lt;br/&gt; haisku3_10001_11051_39108_-1_&lt;br/&gt; HAI_ProductDetail_N_&lt;br/&gt; 37610_37611_37613</td></tr><tr><td>带柔性探头的恒温毯系统</td><td>Harvard Apparatus</td><td>507220F</td><td>https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/&lt;br/&gt; haisku3_10001_11051_39108_-1_&lt;br/&gt; HAI_ProductDetail_N_&lt;br/&gt; 37610_37611_37613</td></tr><tr><td>干热灭菌器</td><td>Quirumed</td><td>2432</td><td>http://www.quirumed.com/pt/material-de-esterilizac-o/esterilizadores</td></tr><tr><td>手术铺巾</td><td>Barrier</td><td>800430</td><td>http://www.molnlycke.com/surgical-drapes/</td></tr><tr><td>Biogel外科手套</td><td>Medex Supply</td><td>30465</td><td>https://www.medexsupply.com</td></tr><tr><td>手术显微镜</td><td>Leica Surgical Microsystems</td><td>10445319</td><td>http://www.leica-microsystems.com/products/surgical-microscopes/</td></tr></tbody></table>

一种游离组织移植模型：大鼠腹壁上动脉游离皮瓣

A Model of Free Tissue Transfer: The Rat Epigastric Free Flap

自20世纪70年代以来，游离组织移植在临床实践中应用日益广泛，可用于修复因肿瘤切除、创伤、感染、畸形或烧伤等原因造成的复杂且难以治疗的缺损。游离皮瓣尤其适用于头颈部、手部、足部及会阴部等解剖结构高度复杂的区域的重建。此外，游离组织移植领域的基础与转化研究具有重要的临床潜力。然而，由于缺乏有关手术操作技术细节的信息，外科培训人员和研究人员常常对使用显微外科组织移植模型望而却步。本文旨在介绍在大鼠中将腹壁浅筋膜皮瓣游离移植至颈部所需的操作步骤。
该皮瓣基于浅表腹壁上动脉和静脉，它们分别起源于股动脉并汇入股静脉。浅表腹壁上静脉的平均管径为0.6至0.8 mm，相比之下，浅表腹壁上动脉的管径为0.3至0.5 mm。组织学上，该皮瓣为复合组织块，包含皮肤（表皮和真皮）、一层脂肪组织（panniculus adiposus）、一层横纹肌（panniculus carnosus）以及一层疏松的结缔组织（疏松结缔组织层）。
简而言之，上腹部皮瓣通过其蒂部血管切取，随后将这些血管与大鼠颈部腹侧的颈外静脉和颈动脉进行吻合。根据我们的经验，该模型可确保约70%至80%的上腹部皮瓣移植至颈部区域后完全存活。该皮瓣可根据需要随时通过肉眼观察进行评估。因此，作者认为这是一种良好的显微外科研究与培训的实验模型。

根据作者在显微外科培训课程及科研工作中应用上腹部游离皮瓣作为游离组织移植模型十余年的经验，皮瓣存活率在一定程度上取决于术者的操作技巧与经验水平。一般而言，若充分遵循上述技术要点，约70%的皮瓣可达到近乎完全存活（皮瓣坏死率＜10%）。约10%的皮瓣出现部分坏死（坏死面积10%～50%），约20%的皮瓣发生完全坏死。第一作者（D.C.）最近完成的20例手术中，近乎完全存活率达到了80%（图13）。
术后前两天，游离的上腹部皮瓣通常会出现水肿，并伴有一定程度的静脉淤血。这些情况通常在术后3至5天内逐渐消退。通常在术后第一周内，大鼠会自行拆除大部分外部缝线以及部分皮下缝合线，常导致伤口出现散在的轻度裂开（图14）。术后第10天以后，皮瓣表面开始缓慢长出毛发。术后第一个月结束时，皮瓣通常已被毛发覆盖，但毛发长度略短于周围皮肤。术后两个月，皮瓣的存在主要表现为轻微隆起，以及皮瓣边缘周围一条相对不明显的瘢痕（图14）。皮瓣的自体啃咬是一种少见现象，据作者经验，几乎仅发生在皮瓣完全坏死的情况下。
<img alt="显示腹壁浅静脉和动脉、股动脉和静脉的解剖图" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 1"> 
图 1： 腹壁游离皮瓣的血管解剖结构。 
该照片显示了一只大鼠的左侧腹壁区域，该大鼠此前已在动脉系统中注入红色乳胶溶液，并在静脉系统中注入蓝色乳胶溶液。可以观察到，腹壁区域由腹壁浅动脉和静脉提供轴向血液供应。这些血管分别起源于股动脉和股静脉，并汇入其中。 <a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig1large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="腹壁上动脉和静脉分支的显微图像，含毛细血管网络，SEM结果。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 2"> 
图 2： 大鼠腹壁浅血管腐蚀铸型的扫描电镜图像，显示腹壁区域游离皮瓣的显微血管供血情况。 
该扫描电镜图像展示了大鼠腹壁浅血管的腐蚀铸型，可见静脉的管径大于动脉。腹壁浅静脉的平均管径为 0.6 至 0.8 mm，而腹壁浅动脉为 0.3 至 0.5 mm。该图像还显示腹壁浅动脉发出两个主要分支：外侧支和内侧支，后者又多次分支，形成毛细血管网络，供应大部分腹壁区域。这些毛细血管汇入腹壁浅静脉的属支，其走行与动脉分支平行。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig2large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="大鼠腹部皮肤灌注示意图；标注尺寸；血管研究；解剖学实验装置。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig3.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图3"> 
图3：大鼠左侧腹壁皮瓣的潜在区域。 
该示意图表示由浅表腹壁上血管供血的大鼠腹壁区域，此区域可在腹壁皮瓣中被游离。该皮瓣最长可达5 cm，宽达3 cm。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig3large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="显示腹壁皮肤、腹壁肌肉的腹上皮瓣显微图像；组织学切片。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig4.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 4"> 
图 4： 腹上皮瓣的苏木精-伊红染色切片照片。 
该腹上区域的苏木精-伊红染色切片显示，腹上皮瓣由覆盖腹壁肌肉的该区域皮肤组织构成。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig4large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="皮肤组织学层次示意图；表皮、真皮、脂肪层、筋膜；显微分析。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig5.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 5"> 
图 5： 上腹部皮瓣的组织学构成。 
左侧照片为上腹部皮瓣的苏木精-伊红染色切片，右侧照片则来自该皮瓣的马松三色染色切片。这两张图片表明，大鼠的上腹部皮瓣是一种复合组织块，包含一层由真皮和表皮构成的浅表皮肤层。皮肤下方为一层称为panniculus adiposus的脂肪组织。此层下方为一层称为panniculus carnosus的横纹肌。在panniculus carnosus下方，是一层覆盖着更大、更深部腹肌的深筋膜。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig5large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="显示手术部位标记的啮齿动物模型，适用于皮肤科或外科研究。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig6.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图6"> 
图6. 大鼠术前腹部表面的皮肤标记。 
该照片展示了用于切取左侧腹壁上区皮瓣，并将其移植至左侧颈部腹侧区域时的皮肤切口标记。
<img alt="腹股沟动脉和静脉分支的解剖图，标注用于教学研究。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig7.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图7"> 
图7. 在手术显微镜下（10倍放大）观察腹壁上动脉皮瓣营养血管的外科解剖结构。 
本照片显示了浅表腹壁上动脉和静脉分别起源于股动脉和汇入股静脉。旋股外侧动脉通常起源于浅表腹壁上动脉的尾侧。旋股外侧静脉走行路径相似，通常汇入浅表腹壁上静脉。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig7large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的放大版本。</a>
<img alt="白色背景上的手术标本，带有动脉和静脉夹，突出显示解剖结构。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig8.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 8"> 
图 8. 以营养血管为蒂的腹壁浅动脉皮瓣离体状态（即浅表腹壁动脉和静脉 — 分别标记为 A 和 V）。 <a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig8large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="显示颈外静脉的外科解剖示意图，用于解剖学研究的标注图。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig9.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图9"> 
图9. 颈部左侧受体静脉（即颈外静脉）解剖操作视野（6倍放大）。 
可以观察到颈外静脉位于胸锁乳突肌外侧的皮下走行路径。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig9large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="显示颈动脉、迷走神经、胸锁乳突肌和舌骨下肌群的解剖示意图。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig10.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Figure 10"> 
图10. 颈部左侧供体动脉（即颈总动脉）解剖操作视野（10倍放大）。 
如图所示，在牵开胸锁乳突肌和舌骨下肌群后，暴露颈动脉及其伴行的迷走神经。 <a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig10large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="动脉与静脉吻合示意图；标注颈总动脉、腹壁浅静脉。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig11.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图11"> 
图11. 在手术显微镜下（10倍放大）观察到的皮瓣血管与颈部受区血管之间血管吻合的实物照片。 
该照片显示了颈总动脉与腹壁浅动脉之间的端侧吻合。同时还可以观察到腹壁浅静脉与颈外静脉之间的端端吻合。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig11large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="大鼠手术模型，缝合实验；术后恢复；生物医学研究；腹侧视图。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig12.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 12"> 
图 12. 大鼠术后即刻腹侧外观照片。 
请注意，供区可直接轻松闭合。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig12large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="皮瓣存活面积（%）与大鼠的对比，散点图，比较实验结果，生存分析。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig13.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Figure 13"> 
图13. 第一位作者（D.C.）连续手术的20只大鼠的腹壁上动脉游离皮瓣存活情况。 
5只大鼠（20%）出现皮瓣完全坏死（病例1、4、8、13和15，以红色圆点表示）。皮瓣坏死面积采用Trujillo等人15详细描述的免费软件ImageJ进行测定。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig13large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="大鼠术后伤口愈合随时间变化的阶段；术后4、14、60天的研究结果。" src="/files/ftp_upload/55281/55281fig14.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Figure 14"> 
图14. 术后4、14和60天，置于颈部腹侧的上腹部皮瓣的外观照片。 
术后第4天，通常会出现一定程度的伤口裂开，这是由于大鼠自行撕扯缝线所致。然而，皮瓣通常仍能保持原位。通过简单的肉眼观察，可对皮瓣进行每日检查。<a href="https://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/55281/55281fig14large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的高清版本。</a>

本文介绍了在大鼠体内切取腹壁上腹直肌皮瓣并将其移植至颈部所需的操作步骤。

游离组织移植自20世纪70年代以来在临床实践中应用日益广泛，可修复复杂且原本无法治疗的缺损……

本文旨在介绍在大鼠身上实施上腹部游离皮瓣手术所需的步骤。自20世纪70年代以来，游离组织移植在临床实践中已越来越多地用于修复缺失的组织。然而，即使在今天，外科受训人员仍常常因游离皮瓣的切取、转移和植入过程中涉及的多个步骤的复杂性而感到畏惧。事实上，要成为一名熟练的显微外科医生，在动物模型上进行大量的实验性训练被认为是必不可少的。大鼠是显微外科研究与培训中最常用的模型，因其相对便宜、易于饲养，且其下颌常用于频繁的操作。本图显示了一只大鼠的左侧腹下区，此前已在动脉系统中注入红色乳胶溶液，静脉系统中注入蓝色乳胶溶液。可以观察到，腹上部区域由浅表腹壁浅动脉和静脉提供轴向血液供应。这些血管分别起源于股动脉并汇入股静脉。该皮肤区域代表腹壁的一部分，由浅表腹上血管供血，可在腹上皮瓣中进行游离。 该皮瓣长度可达五厘米，宽度可达三厘米。此为腹上区的苏木精-伊红染色切片，显示腹上区皮瓣由覆盖腹壁肌肉的该区域皮肤组织构成。因此，该皮瓣是一块复合的组织块。它包含由真皮和表皮构成的皮肤表层，皮肤下方是一层脂肪组织，称为脂肪层（panniculus adiposus）。在此层下方为一层横纹肌，称为肌性层（panniculus carnosus），在肌性层下方是覆盖腹部大肌群的深筋膜。关于术前准备，使用氯胺酮和地西泮混合物对大鼠进行麻醉，所用剂量为每千克体重5毫克氯胺酮和每千克体重0.25毫克地西泮。用脱毛膏去除腹部腹侧表面的毛发。使用酒精溶液对皮肤进行消毒。用外科皮肤标记笔在腹部表面标记皮瓣轮廓，颈部切口位置亦以同样方式标记。首先，抬起皮瓣边缘。使用电凝器从内侧向外侧游离皮瓣，并结扎通向皮瓣深面的穿支血管。然后，仔细解剖皮瓣的蒂部。将拉钩置于创口尾侧，以利于血管的解剖。通过轻柔分离松散、腐烂的组织，仔细解剖血管蒂。我们可以看到股动脉、股静脉、浅腹壁上动脉和静脉，最后是旋髂浅动脉和静脉。这些终末血管的起源存在变异，但在大多数情况下，它们起源于浅腹壁上血管。随后暂时夹闭股血管。对腐烂组织进行最后修剪，并为吻合口的后续放置做好准备。接着切断浅表腹壁动脉和静脉。随后进行颈部切口。首先暴露并游离颈外静脉，结扎其数条汇入支，以增加静脉的可移动性，便于后续吻合操作。接下来，在较深的层面，暴露胸锁乳突肌的外侧面，随后暴露该肌的深面，从而显露颈动脉和迷走神经。颈动脉与迷走神经进行钝性分离。此图片显示颈动脉与迷走神经。随后，将颈动脉与迷走神经分离，并在颈动脉下方置入一片无菌气囊。我们注意到，在胸锁乳突肌中段切开不仅有助于暴露，还能防止动脉及吻合口承受过度张力，从而避免皮瓣坏死。随后将皮瓣转移至颈部切口处。在放置9/0尼龙缝线后，我们在颈动脉侧壁进行侧向切开。在切断血管后、进行吻合前，用含肝素的溶液冲洗血管腔。使用9/0或10/0尼龙缝线，采用间断缝合法完成吻合。静脉吻合以相同方式实施。有时需要扩张浅表腹壁上静脉，使其管径与较粗大的外颈静脉相近。吻合完成后，先移除静脉端和皮瓣血管上的血管夹。可通过移动浅表腹壁上动脉来缓解已有的血管痉挛。可以观察到典型的开放且功能良好的动脉吻合以及灌注充分的静脉系统。该图像显示了皮瓣移植后的最终血管架构。浅表腹壁动脉以端-侧方式与颈动脉相连。最后，将浅表腹壁静脉与颈外静脉行端-端吻合。然后用间断的5/0尼龙缝线将皮瓣缝合至邻近皮肤。供区采用腹部松弛的皮肤关闭腹壁缺损，缝合方式与此类似。通常，术后五天，大鼠已将所有缝线自行拆除，如本例麻醉状态下的动物所示。此时，通常可以观察到整个皮瓣血运良好。术后14天，皮瓣表面的毛发已开始再生，如此处所示。术后两个月，仅颈部瘢痕处可见皮瓣的原始边界。可通过简单的肉眼观察随时评估皮瓣情况。为便于暴露颈部及皮瓣的最终外观，可在大鼠头部上方给予食物诱饵。或者，可在大鼠肩胛间区域施加轻柔触碰。此时由一位助手位于大鼠前方，观察并拍摄皮瓣情况。根据首位作者最近完成的20次手术操作，其皮瓣存活率接近完全存活，达到80%，如本图所示。皮瓣存活率在一定程度上取决于外科医生的经验。一般而言，若充分考虑上述技术要点，皮瓣存活率接近完全，预计约70%的皮瓣可完全存活。约10%的皮瓣会出现部分坏死。约有20%的皮瓣出现完全坏死。我们超过10年将该皮瓣用于教学与研究的经验表明，大鼠腹壁上皮瓣是一种可靠的游离组织移植模型。此外，它也是显微外科培训学员良好的教学与训练模型。此外，该模型还可用于组织灌注、组织修复及外科感染的研究。

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