Name: 在女小鼠害保留神经的中期尿道梗阻（NEMO） (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: 了解一种保留神经的中期尿道梗阻手术技术，该方法在雌性小鼠中实现低死亡率和高可重复性，用于研究膀胱重塑的基因表达模式及恢复机制。

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本工作由 CHIR 运行拨款（DJB）资助。

以下实验方案已获得本机构动物护理委员会的批准。
1. 雌性大鼠中的 NeMO
<ol>
	<li>准备
	<ol>
		<li>将一只体重约200 g的雌性Sprague-Dawley大鼠置于3%异氟烷麻醉下，称量动物体重，并使用碘伏外科擦洗液对耻骨上区域进行3次剃毛和消毒。</li>
		<li>将大鼠置于加热垫上，用胶带固定后肢和尾巴，使用20号套管针进行膀胱插管，并轻轻用胶带固定套管针以防止滑动。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>解剖
	<ol>
		<li>使用手术刀从可触及的耻骨联合处向尿道外口做一条8 mm的纵向皮肤切口。将切口两侧皮肤掀开，以便后续伤口闭合。</li>
		<li>使用精细剪刀纵向钝性分离，以识别带支架的尿道。放置精细的自持式皮肤牵开钩，以更好地暴露尿道。</li>
		<li>在尿道背侧使用弯剪进行轻柔的纵向分离，以建立尿道与阴道之间的解剖间隙。然后，将4-0丝线钝性穿过尿道后方，并准备外科结的双结扣。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>部分尿道梗阻
	<ol>
		<li>移除套管针，将一根0.9 mm的金属棒平行置于尿道旁，然后收紧结扎线，使结扎线环绕尿道和金属棒，确保金属棒之后仍可轻松抽出。</li>
		<li>在抽出金属棒前，以轻柔张力再打3个结加固结扎线。将缝线末端剪至约3 mm长；若实验设计中包含后续解除梗阻，则剪至4 mm长。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>伤口闭合
	<ol>
		<li>使用4-0可吸收编织缝线做一针埋藏缝合，对合尿道旁腺体。</li>
		<li>使用相同的可吸收缝线做埋藏水平褥式缝合关闭皮肤。注意：&#160;尽管使用可吸收缝线进行穿透皮肤的缝合看似非常规，但我们未观察到伤口感染等并发症，且可避免拆线操作。&#160;</li>
	</ol>
	</li>
	<li>术后护理
	<ol>
		<li>在将大鼠放入恢复笼之前，皮下注射0.1 mg/kg的丁丙诺啡。</li>
		<li>术后最初24小时内为单独饲养的大鼠提供软质恢复饮食。此后，若动物状态良好且属于同一处理组，则可恢复术前的配对饲养方式。</li>
		<li>每日检查大鼠膀胱大小及整体健康状况；至少每周记录一次体重。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 雌性小鼠中的 NeMO
<ol>
	<li>准备
	<ol>
		<li>取一只体重约为18 g的雌性C57bl/6小鼠，并按照步骤1.1.1所述进行操作。</li>
		<li>按照步骤1.1.2所述进行操作，但使用24号套管针。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>解剖
	<ol>
		<li>使用手术刀从可触及的耻骨联合处向尿道外口做一条长约6 mm的纵向皮肤切口。</li>
		<li>用精细剪刀纵向钝性分离，以识别带支架的尿道；通过类似的钝性解剖方法，将沿尿道腹侧走行的神经血管束分离并抬起。</li>
		<li>在尿道背侧使用弯剪进行轻柔的纵向分离，以建立尿道与阴道之间的解剖间隙。随后，将一根5-0不可吸收编织缝线钝性穿过尿道后方，并准备外科结的双圈结扎。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>部分尿道梗阻
	<ol>
		<li>将套管针连接1 mL注射器，向膀胱内注入0.1 mL生理盐水。</li>
		<li>将26号套管平行置于尿道旁，一边缓慢撤出套管针，一边轻轻收紧围绕尿道和套管的结扎线。</li>
		<li>在移除套管前，再以轻柔张力打三个结加固结扎。</li>
		<li>轻压小鼠膀胱，观察尿道外口是否有尿液流出；若无法排出尿液，则说明结扎过紧，需适当松解。否则，将缝线末端剪至约3 mm长。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>伤口闭合
	<ol>
		<li>使用5-0编织可吸收缝线，采用皮下水平褥式缝合法关闭皮肤。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>术后护理
	<ol>
		<li>在将小鼠放入恢复笼之前，皮下注射0.1 mg/kg的丁丙诺啡。</li>
		<li>术后前48小时内为单独饲养的小鼠提供软质恢复饮食。此后，若小鼠状态良好且属于同一处理组，则可重新按术前方式群养。 
		注意：术后24小时后触诊发现膀胱明显膨胀且在操作时无法排尿的小鼠，提示梗阻过度，如不立即在麻醉下拆除结扎线，将在接下来的1–2天内死亡。</li>
		<li>每日检查小鼠膀胱大小及整体健康状况；至少每周记录一次体重。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Storage+and+voiding+symptoms%3A+pathophysiologic+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li>
<li>Boyle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+in+men+and+women+in+four+centres.+The+UrEpik+study%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study.</a> BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).</li>
<li>Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence+in+the+United+States%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Manag+Care+Pharm%22%5BJournal%5D)">Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review.</a> J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).</li>
<li>Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+bladder+outlet+obstruction+and+molecular+insights+into+the+basis+for+the+development+of+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Urol%22%5BJournal%5D)">Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction.</a> Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).</li>
<li>Mattiasson, A., Uvelius, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+contractile+properties+in+hypertrophic+rat+urinary+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder.</a> J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).</li>
<li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alteration+of+the+PKC-mediated+signaling+pathway+for+smooth+muscle+contraction+in+obstruction-induced+hypertrophy+of+the+urinary+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder.</a> Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).</li>
<li>Moore, J. A., Brading, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+porcine+model+of+bladder+outlet+obstruction+incorporating+radio-telemetered+cystometry%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry.</a> BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).</li>
<li>Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+sildenafil+citrate+on+bladder+outlet+obstruction%3A+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Inte%22%5BJournal%5D)">The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model.</a> BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).</li>
<li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li>
<li>Kang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Sequential+Changes+in+Bladder+Function+after+Partial+Bladder+Outlet+Obstruction+in+Awake+Sprague-Dawley+Rats%3A+Focus+on+the+Decompensated+Bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder.</a> Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).</li>
<li>Schroeder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+an+oral+endothelin+converting+enzyme+inhibitor+on+rat+detrusor+function+after+outlet+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction.</a> J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).</li>
<li>Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., Bägli, D. <a target="_blank" href="http://www.jurology.com/article/S0022-5347(16)01357-4/abstract">"sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment.</a> J Urol. 195 (4), e379(2016).</li>
<li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

动物死亡率是传统近端尿道部分膀胱出口梗阻（pBOO）模型的主要问题之一，在许多研究报告中死亡率高达15%或更高10,11,13。NeMO在雌性大鼠中应用时表现出极低的死亡率。小鼠的近端尿道梗阻在技术上比大鼠更具挑战性，因此更易出现并发症。采用26号套管作为中段尿道操作的占位器时，动物死亡率极低。在一项正在进行的研究中，我们仅使用26号套管对雌性小鼠实施NeMO，18只小鼠中仅有2只因过度梗阻而死亡（数据未显示）。若使用更小的占位器（如27号套管），则超过一半的梗阻小鼠会因过度梗阻导致尿潴留或膀胱破裂而死亡。因此，我们认为对于体重约18 g的雌性小鼠，26号套管是较为合适的占位器规格。
膀胱质量增加是人类下尿路梗阻（pBOO）疾病的标志性特征之一。我们发现，NeMO 在大鼠和小鼠中仅用 2 周即可有效诱导膀胱质量显著增加。在近端尿道...

部分膀胱出口梗阻（pBOO）具有较高的发病率，可导致严重的膀胱功能障碍1；其病因谱包括先天性畸形（如后尿道瓣膜或尿道下裂）、获得性尿道狭窄以及良性前列腺增生。其中，良性前列腺增生影响超过60岁男性的30%2。由于pBOO给患者带来沉重负担并造成巨大的医疗成本，因此针对膀胱在流出阻力增加情况下的重塑过程开展了大量研究3。2006年至2015年间，PubMed收录的关于pBOO对膀胱影响的研究文章已超过220篇。
尽管已在多种物种中建立了部分膀胱出口梗阻（pBOO）的动物模型4，例如大鼠5、兔6、猪7和小鼠8,9，但目前应用最广泛的动物模型仍是通过部分结扎雌性大鼠近端尿道来建立；然而，这种传统的近端尿道梗阻技术不可避免地需要开腹、暴露膀胱，并对膀胱颈周围组织进行解剖分离。梗阻程度的不一致以及动物死亡率高等问题，仅仅是该操作方法所面临的问题之一10,11；我们先前的研究表明，在假手术动物中，对近端尿道周围的解剖操作会引起生理变化，且这些变化与膀胱颈处神经纤维的丢失相关12。这一发现提示，目前最常用的pBOO动物模型——即在雌性啮齿类动物中对近端尿道进行手术干预——会导致去神经损伤，从而引起膀胱结构和功能的改变，影响假手术组和梗阻组动物。因此，亟需一种可避免去神经损伤的替代方法。我们实验室开发并评估了一种保留神经的中段尿道梗阻（NeMO）技术，该方法能有效诱导膀胱出现预期的梗阻相关改变，如器官质量增加和残余尿量升高，而假手术动物则与未手术对照动物无明显差异。此外，由于横纹尿道括约肌位于解剖平面的近端，因此在该术式中得以完整保留。更重要的是，与传统近端尿道梗阻模型相比，NeMO模型中梗阻所致的膀胱质量增加变异性显著更低，且动物死亡率为零。
我们还成功地将NeMO应用于雌性小鼠，梗阻动物的死亡率低于10%，而迄今为止报道的所有小鼠pBOO模型的死亡率均约为50%。在小鼠pBOO背景下研究膀胱重塑将受益于全套转基因修饰技术的可应用性。
在雌性啮齿类动物中，围绕尿道中段进行分离不会引起传统近端梗阻模型中所观察到的膀胱结构或功能上的不良和混杂性改变。然而，在尿道中段水平诱导部分梗阻仍会如预期般导致膀胱肥厚和残余尿量增加，符合部分膀胱出口梗阻（pBOO）动物模型的特征。重要的是，在小鼠中实施NeMO手术使得利用转基因方法研究pBOO中的膀胱重塑成为可能，而此类方法在较大的啮齿类动物中几乎无法实现。

<table><tbody><tr><td>雌性大鼠&amp;nbsp;</td><td>Charles-River Canada</td><td>Sprague Dawley 大鼠 (Crl:SD)；品系编号：400</td><td>约 200 g</td></tr><tr><td>异氟烷蒸发器</td><td>Benson Medical Industries Inc.</td><td>TEC III 异氟烷；产品编号：53-T3ISO&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>Fresenius Kabi 动物健康公司</td><td>异氟烷；产品编号 CP0406V2</td><td>&amp;nbsp;250 mL 瓶装</td></tr><tr><td>一次性手术刀</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>#15 无菌不锈钢手术刀；目录编号 549-9-15S</td><td></td></tr><tr><td>显微镊</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Aesculap 显微镊，精细尖端，115 mm；产品编号 5443</td><td></td></tr><tr><td>Adson 镊子</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Aesculap Adson 解剖镊，弯曲型，120 mm；产品编号 5002-9</td><td></td></tr><tr><td>弯曲手术剪</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>手术剪，弯曲型，不锈钢，105 mm；目录编号 1376</td><td></td></tr><tr><td>0.9 mm 不锈钢金属杆</td><td>goodfellow.com</td><td>不锈钢 - AISI 316L，线径：0.9 mm；订单编号 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>皮肤牵开钩 - 自制，由不锈钢制成</td><td>goodfellow.com</td><td>不锈钢 - AISI 316L，线径：0.9 mm；订单编号 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>4-0 丝线缝合线</td><td>esutures.com</td><td>4-0 Sofsilk 黑色 98&quot; 单股；产品编号 LS640</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Vicryl 缝合线</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Vicryl 未染色 27&quot; RB-1 锥形针；产品编号 J213H</td><td></td></tr><tr><td>持针器</td><td>Medsupplier.com</td><td>Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner 持针器 - 5 1/2&quot;；产品编号 SKU NEE4484-8-40TC&lt;br/&gt; SKU NEE4484-8-40TC&lt;br/&gt; SKU NEE4484-8-40TC&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Temgesic（布托啡诺）</td><td>First Veterinary Supply</td><td>Buprenex 0.3 mg/mL 注射剂安瓿；货号 #075701</td><td></td></tr><tr><td>带 27 G 针头的 1 mL 注射器</td><td>Fisher Scientific</td><td>BD&amp;nbsp;结核菌素注射器，BD 309623</td><td></td></tr><tr><td>20 G 安全留置针（Angiocath）</td><td>Fisher Scientific</td><td>Andwin Scientific&amp;nbsp;ANGIOCATH 20 GA；目录编号 NC9561906</td><td></td></tr><tr><td>恢复期饮食</td><td>clearh2o</td><td>DietGel 31M；72-08-5022</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl/6 雌性小鼠</td><td>Charles-River Canada</td><td>C57BL/6 小鼠 (C57BL/6NCrI)；品系编号：027</td><td>约 18 g</td></tr><tr><td>24 G 安全留置针（Angiocath）</td><td>Fisher Scientific</td><td>Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&amp;nbsp;IV CATH ANGIOCATH 24G×3/4IN；目录编号 NC9814340</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Ethibond 缝合线</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Ethibond 绿色 30&quot; RB-1 锥形针；产品编号 X550H</td><td></td></tr><tr><td>26 G 注射器针头</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>BD PrecisionGlide 注射器针头，规格 26；z192392</td><td></td></tr><tr><td>生理盐水</td><td>Baxter</td><td>0.9% 氯化钠注射液，USP，100 mL MINI-BAG；产品编号 2B0043</td><td></td></tr></tbody></table>

雌性小型啮齿类动物保留神经的中段尿道梗阻术（nemo）

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

部分膀胱出口梗阻（pBOO）具有高发病率，给患者带来显著负担，并导致巨大的医疗成本。研究pBOO中膀胱重塑最常用的动物模型是雌性啮齿类动物，在其近端尿道处建立部分梗阻。近端梗阻的主要问题在于梗阻程度的变异性以及动物死亡率较高。此外，在近端尿道和膀胱颈周围进行解剖可能损害膀胱的神经支配。
我们开发了一种避免传统模型缺点的保留神经的中段尿道梗阻（NeMO）模型，用于部分膀胱出口梗阻（pBOO）研究。我们从耻骨联合下方入路接近尿道，从而无需进行剖腹手术，也无需在此区域进行解剖；此外，横纹尿道括约肌得以完整保留。我们在雌性Sprague-Dawley大鼠（12只梗阻模型，6只假手术动物）以及雌性C57/bl6小鼠（20只梗阻模型，18只假手术动物）中实施了NeMO手术。术后两周，我们评估了膀胱功能、膀胱质量和体质量。
在梗阻组和假手术组的雌性大鼠中均未出现死亡病例；按照传统的近端膀胱出口梗阻（pBOO）方法，我们在近端尿道及临时放置的0.9 mm金属杆周围结扎缝线。NeMO模型在两周后导致膀胱质量增加85%，部分梗阻大鼠的平均残余尿量为0.4 mL，而假手术动物仅为0.03 mL。在小鼠实验中，我们测试了三种不同规格的导管，在结扎缝线时将其沿尿道放置。我们发现，使用27号导管导致超过50%的动物死亡率；使用25号导管未能引起膀胱质量的预期增加；而采用26号导管则获得了理想结果，动物死亡率极低（1/8），且膀胱质量显著增加至原来的2倍。

雌性大鼠保留神经的中段尿道梗阻模型（NeMO）
死亡率
迄今为止，我们对40多只雌性大鼠进行了中段尿道梗阻手术，未出现任何死亡病例。
膀胱肿块
假手术组动物在术后两周的平均相对膀胱质量（膀胱质量与体重之比）为0.33%，而梗阻组大鼠的平均相对膀胱质量为0.60%，相当于增加了85%（p = 0.004；图1）。
<p class="jove_content" fo:keep-together...

传统的啮齿类动物部分膀胱出口梗阻建模方法常伴随较高的动物死亡率。此外，由于在近端尿道和膀胱颈部周围进行解剖所导致的去神经损伤也是一个主要问题。我们建立并评估了一种安全可靠的中段尿道梗阻模型，避免了传统模型的上述缺陷。

雌性小型啮齿类动物保留神经的中段尿道梗阻术（NeMO）

部分膀胱出口梗阻（pBOO）具有高发病率，可导致显著的患者负担和巨大的医疗费用。最常见的动物模型……

该技术的总体目标是在雌性小型啮齿类动物中通过手术建立部分膀胱出口梗阻模型，同时保留膀胱出口的神经支配，具有动物发病率低、几乎无死亡率以及梗阻程度变异小的优点。该方法有助于回答关于梗阻诱导膀胱重塑的关键问题，例如：与出口梗阻相关的基因表达模式和表观遗传学改变有哪些？该技术的主要优势在于其可靠性高，并且无需在膀胱颈周围进行解剖，从而避免损伤膀胱出口的神经支配。该技术对膀胱梗阻治疗具有重要意义，因为梗阻解除后的恢复阶段可以以可重复的方式进行评估。在人类中，膀胱梗阻的恢复过程难以预测。利用该技术，可去除梗阻，从而评估与梗阻恢复相关的细胞和组织反应。当我们注意到传统的、更近端的梗阻方法在假解剖（未实施实际手术梗阻）后与明显的不良膀胱功能障碍和形态异常相关时，我们改进了这一方法。首先将一只200克重的雌性大鼠置于加热垫上，并用胶带固定其四肢和尾巴。随后进行消毒，并铺放无菌毛巾，注意不要遮盖下腹部。然后使用20号套管针进行膀胱插管，并用胶带固定导管。接下来，在解剖显微镜下，用手术刀从可触及的耻骨联合处向尿道外口做一条8毫米长的纵向皮肤切口。将切口两侧的皮肤掀起，以便后续缝合，并使用精细剪刀钝性分离纵向扩展的组织，以辨认发育短小的尿道。使用精细的自持式皮肤拉钩以充分暴露尿道，采用类似的钝性分离方法将腹侧走行的神经血管束向上抬起。使用弯剪刀并轻柔地纵向撑开，分离尿道与阴道之间的间隙，位于尿道背侧。随后用4-0丝线在尿道后方钝性穿过，并准备外科结的双重结扣。然后移除套管针，将一根0.9毫米的金属杆平行置于尿道旁。在尿道和金属杆周围打结，确保结扎松紧适度，使金属杆仍可轻松抽出，再以三个轻柔的加固结固定。最后一个结打好后，抽出金属杆，用可吸收编织4-0缝线采用间断单缝法缝合尿道旁腺组织，将缝线两端剪至长约3至4毫米。然后使用相同的可吸收缝线，采用多种水平褥式缝合法关闭皮肤，并注射适当的镇痛药物。对于小鼠的保留神经的中段尿道梗阻（NeMO）模型，将一只18克重的雌性C-57黑六小鼠仰卧置于加热垫上，并用胶带固定其四肢。随后进行消毒，并铺设无菌毛巾，注意不要遮盖下腹部。接下来，在解剖显微镜下，使用24号套管针插入膀胱，并用胶带固定套管。在解剖显微镜下，用手术刀从可触及的耻骨联合处向尿道外口做一条6毫米长的纵向皮肤切口。然后用精细剪刀进行钝性分离，以辨认发育不全的尿道。沿尿道背侧轻柔地纵向分离，建立尿道与阴道之间的间隙。然后用5-0不可吸收编织缝线钝性穿过尿道后方，并准备外科结的双圈打结。现在将1毫升注射器连接至套管针，向膀胱内注入0.1毫升生理盐水。当所有生理盐水注入完毕后，利用结扎线轻轻固定一根26号导管，使其与尿道平行，同时撤出套管针。再以三个轻柔的结加固 knot，随后移除导管，并对膀胱施加轻柔压力，观察尿道口是否有尿液流出。将缝线末端剪至约三毫米。然后使用5-0编织可吸收缝线，

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科研

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Medicine

医学

在女小鼠害保留神经的中期尿道梗阻（NEMO）

本文描述的 spared nerve injury（SNI）动物模型是一种小鼠模型，通过损伤坐骨神经的胫神经和腓总神经分支，保留剩余的腓肠神经完整，从而建立外周神经病理性疼痛模型。由机械性异常性疼痛引起的行为学改变通过 von Frey...

小鼠中诱导机械性异常性疼痛的 spared nerve injury（SNI）模型

膀胱压力测定是一种用于测量小型动物膀胱功能的有效技术...

在小型啮齿动物中使用膀胱压力测定法：膀胱化学感受研究

在美国，约有300万至800万人患有间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征（IC/BPS），这是一种以盆腔疼痛为主要特征的致残性疾病。为了研究神经系统对该疾病的作用，研究人员在小鼠和大鼠中采用了一种尿路膀胱疼痛的生理学模型。...

由膀胱扩张诱发的内脏运动反应作为小鼠膀胱疼痛模型

我们介绍了一种通过大鼠脊髓圆锥横断建立逼尿肌活动低下模型的方法。在这些动物中成功诱导了逼尿肌活动低下。该模型可用于泌尿系统功能的研究。...

通过脊髓圆锥横断建立大鼠逼尿肌活动低下模型

这种改良手术是一种简化的用于小鼠或大鼠的保留神经损伤模型的方法，仅需一次结扎和一次切割即可同时损伤腓总神经和腓肠神经。...

小鼠神经病理性疼痛的改良部分神经结扎手术模型

坐骨神经部分结扎可诱导产生持续时间较长的慢性神经病理性疼痛，其特征是对热和机械刺激的反应显著增强。该神经病理性疼痛小鼠模型常用于研究疼痛管理方面的创新疗法。本文详细描述了手术操作步骤，以提高实验的标准化程度和可重复性。...

部分坐骨神经结扎：一种用于研究新型疗法镇痛效果的慢性神经病理性疼痛小鼠模型

本文提供了一种从小鼠体内手术切除腹后神经节腰段交感神经元的实验方案。该操作将有助于开展多种研究，以探究交感神经支配在远端组织靶标中的作用。...

小鼠腰交感神经切除术

本方案提供了使用氰基丙烯酸酯对皮肤进行防水处理以防止毛发和皮肤吸收尿液的操作指南。内容包括将胶水涂抹于皮肤、植入膀胱导管，以及在清醒小鼠中进行膀胱测压和尿道外括约肌肌电图记录所需电极的安装说明。...

优化小鼠尿动力学技术以提高准确性

本方案详细描述了一种单侧输尿管梗阻的逐步、可重复的模型。...

一种可逆性单侧输尿管梗阻的幼年小鼠模型

本方案介绍了一种可重复的利用感觉神经模拟人类神经瘤疼痛并评估手术治疗方法的大鼠模型，为转化神经瘤研究提供了有价值的工具。...

一种用于研究通过隐神经靶向肌肉再神经支配治疗神经瘤疼痛新方法的新型手术啮齿动物模型

了解一种保留神经的中期尿道梗阻手术技术，该方法在雌性小鼠中实现低死亡率和高可重复性，用于研究膀胱重塑的基因表达模式及恢复机制。

雌性小型啮齿类动物保留神经的中段尿道梗阻术（NeMO）

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