使用一种新方法在自由活动的新生大鼠中记录脑电图

本方法的总体目标是利用一种新型电极装置，记录自由活动的新生大鼠幼崽的脑电图（EEG），该装置可稳定工作一周或更长时间。该方法将解答神经科学领域中的关键问题，并有助于新生儿癫痫的研究。通过使用该技术，可在更长的时间范围内记录高质量且稳定的脑电图信号。

这将有助于各种神经病理学疾病的诊断。通常，刚接触该方法的研究人员会遇到困难，因为出生后8至15天的新生大鼠非常难以操作，需要格外小心。电极需要带有叉状接触端，以作为与通信设备之间的信号接口。

计算机排针可充当此作用。使用镊子小心地从计算机排针中分离出公头和母头引脚。然后将公头和母头引脚连接在一起形成电极，并用氰基丙烯酸酯胶水固定连接处。

制作多个此类电极。待焊点完全固化后，将电极置于盛有蒸馏水的烧杯中浸泡十分钟。随后将电极放入超声波清洗器中进行清洗。

然后，将烧杯转移至设定为45摄氏度的烘箱中，加热半小时。最后，将电极置于紫外线下照射30分钟进行灭菌。在生物安全柜中，首先准备好已灭菌的手术器械和已灭菌的立体定位仪用于手术。

然后，使用2.5%异氟烷对新生大鼠幼崽进行麻醉。当幼崽深度麻醉后，将异氟烷浓度降至1%。在继续操作前，通过夹捏脚趾检查以确认幼鼠已充分麻醉。

接下来，将幼鼠的头部固定在立体定位仪上。将耳杆插入耳道，并轻轻拧紧耳杆。注意：新生鼠的颅骨非常柔软。

现在，在颅骨中线处做一个15毫米的切口。然后用镊子轻轻分开头皮以扩大切口。为保持切口开放，使用一块浸有生理盐水的棉球。

现在，找到前囟和人字缝，并用铅笔标记。接下来的电极植入步骤至关重要，必须精确执行。首先，使用26号针头在前囟前方2毫米、距中线0.5毫米以内的前额叶皮层处钻出一个环钻孔。

接下来，在冠状缝后方1.8毫米、中线外侧0.5毫米处的海马区钻一个骨孔。针头插入深度不得超过皮层表面以下2毫米，以尽量减少脑组织损伤。现在，使用镊子将参考电极插入皮层孔中，并将记录电极插入海马区孔中。

然后，在电极周围涂抹红霉素软膏，并用氰基丙烯酸酯将电极固定到位。在胶水固化的同时，将牙科水泥调配至黏稠状。牙科水泥的黏稠度至关重要。

如果牙科水泥过稀，可能会在电极下方形成不理想的绝缘层。如果水泥过于致密，由于质量过大，电极将更容易脱落。在涂抹水泥前，务必彻底干燥颅骨和电极。

然后，使用牙科水泥将电极固定在颅骨上。接着，在电极上涂抹一些苦味酸，以增加额外的保护层。现在，将动物从立体定位仪上取下，并皮下注射300微升10%葡萄糖溶液。

然后，将动物转移至加热垫上，保持其体温在37摄氏度，直至其能够自主活动。一旦动物恢复自主活动能力，给予布托啡诺以缓解术后疼痛，并将其幼崽与其母鼠一同放回原饲养笼。在使用植入物前，需等待至少两天，以确保幼崽充分恢复。

恢复期结束后，将幼崽单独饲养，进行约十分钟的记录，使其适应环境。将电极连接至放大器，并将放大器连接至计算机上的AD转换器。注意不要使这些连接线缠绕在一起。

接下来，在数据采集单元上选择至少 10,000 赫兹的采样率进行记录，并检查数据传输是否正常。采集一段基线记录。在获取基线记录后，通过腹腔注射将红藻氨酸注入幼鼠体内，以诱导癫痫发作。

注射后15分钟，观察并记录癫痫样放电。保存数字化数据，并使用信号处理软件进行分析。通过功率谱分析揭示新生儿脑电图中不同频率成分的功率水平。

通过计算1至100赫兹（即脑电图频带）范围内一分钟时间窗的均方根振幅，来确定功率。在注射红藻氨酸10分钟后，记录到反复出现的发作间期和发作期脑电图放电模式。记录到的最常见癫痫发作为强直-阵挛型。

强直性发作持续时间约为十五秒。还观察到强直性放电之后出现阵挛性爆发。观看本视频后，您应充分了解如何植入电极，并从出生后第8至第15天的新生大鼠幼崽中获得高质量的脑电图记录。

一旦准备就绪，根据手术的复杂程度，颈椎植入可在十分钟内完成。