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DOI: 10.3791/55489-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
在这里,我们介绍一种设计用于记录脑电图(EEG)在自由移动的新生儿癫痫幼仔中的新技术,并描述其程序,特征和应用。这种方法允许一个记录EEG超过1周。
这种方法的总体目标是使用稳定一周或更长时间的新型电极设置来记录自由移动的新生大鼠幼崽的脑电图。这种方法将回答神经科学领域的关键问题,并将有利于新生儿癫痫的研究。通过使用这种技术,人们可以在更长的时间范围内记录高质量和稳定的脑电图信号。
这将有助于诊断各种神经病理学疾病。一般来说,刚接触这种方法的个体会很挣扎,因为 p8 到 p15 的新生大鼠非常难以处理并且需要非常小心。电极需要一个叉形触点作为通信设备的信号接口。
计算机 pin lo sai 填补了这个角色。使用钳子小心地将公针和母针与计算机针脚 lo sai 分开。然后,将公母引脚连接在一起,形成电极,并用氰基丙烯酸酯固定连接。
制作几个这样的电极。键硬化后,将电极放入装满蒸馏水的烧杯中 10 分钟。然后,将它们放入超声波清洗机中以清洁电极。
然后,将烧杯转移到设置为 45 摄氏度的烤箱中,加热半小时。最后,用 30 分钟的紫外线照射对电极进行消毒。在生物安全罩中,首先设置消毒的手术工具和用于手术的消毒立体定位装置。
然后,使用两点 5% 的异氟醚麻醉新生大鼠幼崽。当幼犬被深度麻醉时,将异氟醚减少到 1%。在继续之前,使用脚趾捏确保鼠标被充分麻醉。
接下来,将幼犬的头部固定在立体定位装置中。将耳杆放在耳道中,然后轻轻拧紧耳杆。注意:新生儿的头骨很软。
现在,在颅骨上做一个 15 毫米的中线切口。然后,用镊子轻轻拉开头皮以扩大切口。为了保持切口开放,请使用一块浸有盐水的棉花。
现在,找到前囟和 lambda,并用铅笔标记它们。以下电极植入步骤至关重要,必须精确执行。首先,使用 26 号针头,在前囟前两毫米处,在中线 5 毫米的零点内,在前额叶皮层上打一个毛刺孔。
接下来,在前囟后方 8 毫米处和中线外侧 5 毫米处在海马体上打一个钻孔。针头不应穿透皮质表面以下超过 2 毫米,以尽量减少脑损伤。现在,使用镊子将参比电极插入皮层孔中,然后将记录电极插入海马孔中。
然后,在电极周围涂抹红霉素软膏,并用氰基丙烯酸酯将电极固定到位。当胶水粘合时,以胶水和粘稠的稠度准备牙科粘接剂。牙科粘结剂的粘度至关重要。
如果牙科粘接剂太薄,可能会导致在电极下形成不需要的绝缘层。如果粘接剂太密,由于质量过大,电极将更容易脱落。在涂抹粘接剂之前,彻底擦干头骨和电极。
然后,用牙科水泥将电极固定在颅骨上。在此之后,在电极上涂抹一些苦味酸,为它们添加另一层保护。现在,从立体定位框架中取出动物,皮下注射 300 微升 10% 的葡萄糖溶液。
然后,将动物转移到加热的毯子上,使其保持在 37 摄氏度,直到它可以走动。一旦可以走动,施用丁丙诺啡以缓解术后疼痛,并将幼崽与母犬一起转移到笼子里。在使用植入物之前,请至少等待两天让幼犬恢复。
恢复期过后,将幼犬单独饲养进行记录约十分钟,以便幼犬熟悉环境。将电极连接到放大器,然后将放大器连接到连接到计算机的 AD 转换器。小心不要纠缠这些连接。
接下来,在数据采集单元上,选择至少 10, 000 赫兹的采样率进行记录,并检查数据传输是否正确。收集基线记录。进行基线记录后,向幼犬腹膜内注射红藻氨酸以诱导癫痫发作。
注射后 15 分钟,观察并记录癫痫放电。保存数字化数据,并使用信号处理软件进行分析。使用功率谱分析揭示新生儿脑电图中不同频率分量的功率水平。
通过找到从 1 到 100 赫兹的均方根振幅(即 EEG 波段)来计算一分钟时间帧的功率。红藻氨酸注射后 10 分钟,记录复发性发作间期和发作期脑电图放电模式。记录的最常见的癫痫发作是强直阵挛型。
发作强直持续时间约为 15 秒。还观察到强直性放电后是阵挛性爆发。看完这个视频,你应该对如何植入电极和获得 p8 到 p15 新生大鼠幼崽的高质量脑电图记录有了很好的了解。
一旦集合起来,宫颈植入可以在不到 10 分钟的时间内完成,具体取决于手术的复杂程度。
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