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猪中枢神经系统的组织学分析的曝光:一个手册斩首,颅骨打开,并去除脑
猪中枢神经系统的组织学分析的曝光:一个手册斩首,颅骨打开,并去除脑
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JoVE Journal Neuroscience
Exposure of the Pig CNS for Histological Analysis: A Manual for Decapitation, Skull Opening, and Brain Removal

猪中枢神经系统的组织学分析的曝光:一个手册斩首,颅骨打开,并去除脑

Full Text
16,963 Views
08:38 min
April 13, 2017

DOI: 10.3791/55511-v

Carsten R. Bjarkam1, Dariusz Orlowski2, Laura Tvilling2, Johannes Bech2, Andreas N. Glud2, Jens-Christian H. Sørensen2

1Department of Neurosurgery, Clinical Institute of Medicine,Aalborg University Hospital, 2Center of Experimental Neuroscience (Cense), Department of Neurosurgery, Institute of Clinical Medicine,Aarhus University Hospital

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

本文和视频教学的目的是描述如何揭露和删除死后猪脑和垂体处于完整状态,适合后续宏观和组织学分析。

在本视频中,我们介绍了如何通过打开颅骨和硬脑膜来暴露和切除完整的猪脑和完整的垂体。伦理声明: 动物麻醉和安乐死按照实验动物护理原则进行,并经丹麦动物研究伦理委员会批准。通过肌肉注射咪达唑仑和氯胺酮在雄性哥廷根小型猪中诱导麻醉。

5 到 10 分钟后,当动物被深度镇静时,耳静脉插管,并静脉注射致命的过量戊巴比妥钠。为了确保动物被完全安乐死,如前所述测试了指间疼痛反射。适当安乐死后,用 5 升等渗盐水经心脏灌注动物。

因此,所有演示的程序都是在尸检后进行的,不包括长期麻醉和术后生存所必需的福利预防措施。使用的工具。4 号重型手术刀手柄和非无菌手术刀刀片 23 号。

适用于皮肤切口和软组织去除。7 号手术刀手柄和11 号非无菌手术刀刀片。最适合硬脑膜切口和精密工作。

手术钳,咬合确保牢固抓握。KAIRison 骨头拳。必须坚固,咬合大小为 3 到 5 毫米。

骨咬合器。必须坚固且咬合大小约为 5 至 15 毫米,用于精细的骨骼工作。较大的骨咬骨。

咬合大小约为 25 乘以 15 毫米,用于去除较厚的骨块。骨凿。头部不应大于 20 毫米。

一个木槌,适合做骨凿。微型剪刀,尖端锋利。解剖.斩首。通过在下颌角下方做一个高圆颈椎切口将猪斩首。

继续切开,穿过颈部的软组织。切开喉部和食道,直到到达骨骼和脊柱。大约在颅颈交界处的水平。

从颅颈交界处的前侧推进切口,穿过寰枕前膜。脊髓由此暴露。同时,助手会将猪体从猪头上拉开,因为这将简化颅底和第一颈椎之间的通道。

确保脊髓完全切断,然后在颅颈交界处用力伸展以完成斩首。颅骨开口。在皮肤和下面的软组织上放置一个背侧纵向切口。

从鼻子后部到头部顶点,向下穿过枕骨区域的后部。通过去除位于初始切口外侧的软组织,暴露颅骨的背侧和后部。从颅骨中释放颞肌。

从软组织中清洁枕骨后骨。使用枕骨大孔的后部兴趣去除枕骨,以露出硬脑膜覆盖的小脑。回到颅骨的前侧,在额骨中选择一个入口点,就在眼睛前面。

此时,使用骨凿穿透颅骨,进入额窦。利用额窦的范围进一步去除另一个颅骨板。覆盖大脑的内部薄颅骨板暴露在外。

轻轻打开这个板,露出覆盖大脑前部的硬脑膜。继续横向去除骨头,穿过颞骨和顶骨。为了释放位于大脑和小脑已经暴露的部分之间的颅骨的最后部分。

用凿子从一侧劈开剩余的后颅骨,就像打开门一样。大脑切除。提起硬脑膜,在矢状窦附近轻轻切开。

使用硬脑膜开口进一步去除覆盖大脑的硬脑膜囊。去除位于大脑和小脑之间的硬脑膜时必须特别小心。因为保留这种硬脑膜叶可以防止随后的大脑切除。

最后,将覆盖小脑和下脑干的硬脑膜切开。将猪头垂直放置,并通过从硬脑膜覆盖的颅底上钝性解剖嗅球来释放大脑。切片暴露的视交叉。

随后进行垂体柄和动眼神经的暴露和切片。通过切开下颅神经来释放脑干。使用凿子将大脑从颅底释放出来。

垂体切除术。在颅底,识别垂体柄和周围的硬脑膜叶。将硬脑膜叶横向切到垂体柄。

使用解剖器释放垂体,并将其从垂体窝中取出。结果和结论。所描述的技术可以在大约 15 到 20 分钟内安全地取出死后猪脑和垂体。

可以将获得的组织提交进行显微镜分析,然后定向切片,形成更小的脑板。这些板片适用于化学分析或进一步的组织学处理。

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