通过沉淀法分离混合物

1. 碳酸钙（CaCO₃）的沉淀

1. 配制 5 mL 的 1 M CaCl₂ 溶液。
2. 配制 5 mL 的 1 M Na₂CO₃ 溶液。
3. 在小型离心管（1.5 mL）中，加入 750 µL CaCl₂ 和 750 µL Na₂CO₃。
4. 静置 2 分钟，使反应发生。溶液应变得浑浊。
5. 将混合物在 10,000 × g 条件下离心 5 分钟。
6. 倾去上清液。
7. 向沉淀中加入 1 mL 冷水。
8. 通过涡旋振荡器混匀 10 秒，重悬沉淀。
9. 将混合物在 10,000 × g 条件下离心 5 分钟。
10. 倾去上清液。

2. 牛奶蛋白质的沉淀

1. 将牛奶倒入烧杯中，并加入搅拌子。
2. 在搅拌加热板上缓慢加热牛奶至 40 °C，切勿超过 40 °C。
3. 通过混合 7.5 mL 乙酸并加水稀释至总体积 50 mL，配制 15% (v/v) 的乙酸溶液。
4. 将 pH 计的电极浸入温热的牛奶中，监测其 pH 值。
5. 逐滴加入乙酸至牛奶中，直至 pH 达到 4.6。
6. 牛奶的过滤
   1. 将一张滤纸折叠成褶皱状（扇形），放入漏斗中。
   2. 将漏斗置于锥形瓶上，将酸化后的牛奶溶液倒入漏斗中。
   3. 在倾倒过程中，滤纸可能会堵塞。使用玻璃棒不时搅动溶液和滤纸，以防止堵塞。若未改善液体通过情况，则更换滤纸。
   4. 在实验台上放置一张新的滤纸，将尽可能多的湿固体转移至新滤纸上，以进一步吸收固体中的水分。
   5. 若新滤纸变得过湿，请持续更换，直至滤纸上残留的湿气最少。必要时可轻轻按压以吸收更多水分。
   6. 取干燥后的固体，重新悬浮于约 70% 乙醇中，并按照步骤 2.6.1 至 2.6.5 再次过滤该固体。
7. 牛奶的离心（作为过滤的替代方法）
   1. 将 50 mL 的混合物分装至 50 mL 离心管中。
   2. 在 4,500 × g 条件下离心 10 分钟，然后弃去上清液。
   3. 向沉淀中加入 50 mL 70% 乙醇。
   4. 使用玻璃棒将沉淀在乙醇中重新悬浮。
   5. 将此悬浮液按照步骤 2.7.2 进行离心。
8. 将沉淀重新悬浮于缓冲液中，用于后续分析（如 SDS-PAGE），否则在 4°C 下保存。

3. 氯化钾的重结晶

1. 在锥形瓶中称取 50 g KCl，并加入 100 mL 水
2. 加热混合物至水沸腾，确保所有 KCl 粉末完全溶解。某些杂质可能不溶于水。
3. 同时加热另一个（空的）锥形瓶，并使其保持较高温度。
4. 将带有滤纸的漏斗置于该预热过的空锥形瓶上。
5. 将溶液通过滤纸过滤，以去除未溶解的杂质。接收滤液的锥形瓶需保持温暖，以确保过滤过程中无温度变化，否则会析出粗结晶。若发生析出，需重新加热混合物直至所有结晶重新溶解。
6. 将盛有溶液的锥形瓶从热源移开。
7. 将其置于室温较冷处，缓慢冷却约 30 分钟，或直至瓶壁不再有温感。
8. 待溶液冷却至室温后，将锥形瓶放入冰浴中进一步降温。也可将锥形瓶置于冰箱或 4 °C 恒温环境中。
9. 可通过过滤收集晶体，操作步骤同 3.4–3.5（使用室温下的锥形瓶和漏斗）。