一种诱导实验性尿毒症心肌病的小鼠 5/6^th肾切除模型

该程序的总体目标是建立一个简单的小鼠 5-6 肾部分切除术模型，采用杆结扎，存活率优于传统模型。这种方法可以帮助回答慢性肾脏病领域关于尿毒症心肌病的发展和潜在治疗的关键问题。该技术的主要优点是它是一种简单且始终可重复的动物模型，可以模拟人类患者慢性肾病的病理学。

通常，由于小鼠的肾脏、血管和输尿管要小得多，刚接触这种方法的个体会很挣扎。首先通过对脚趾捏没有反应并在小鼠的眼睛上涂抹润滑剂来确认适当的镇静水平。将鼠标放在加热垫上并插入直肠温度计，以在手术过程中将体温保持在 37 摄氏度左右。

然后，将动物放在右侧并剃掉手术区域的毛发。用去毛膏去除任何残留的毛发，并用多羟基溶液和 70% 乙醇对裸露的皮肤进行消毒。将高压灭菌器手术布草对准手术部位。

并在皮肤和肌肉组织中做一个大约 1 厘米的腰椎切口。使用手术刀和镊子，分离肌肉和筋膜，露出左肾。然后，使用小钝钳轻轻拉动肾周脂肪，从腹腔中取出肾脏。

从肾脏的上端轻轻梳理结缔组织和肾上腺，朝向血管进出肾组织的器官的幽门中部。在结缔组织内隔离肾下半部周围的输尿管，轻轻地将结缔组织与肾脏分开，以确保输尿管未结扎。必须小心分离结缔组织，以免输尿管受损且不会出血。

在结缔组织内隔离肾下半部周围的输尿管。然后，使用三根零丝缝合线在距离上部约 0.4 厘米处结扎肾脏，朝向幽门中部，从下部朝向幽门约 0.4 厘米处结扎肾脏。拧紧缝合线时，施加足够的张力以损害肾脏远端部分的血液供应，而不会导致两侧出血。

如果两分钟后没有观察到出血，轻轻地将肾脏恢复到原来的解剖位置，并分别用四根零和三根零缝合线闭合肌肉层和皮肤层。然后，在手术区域涂抹抗生素软膏，并用加热灯单独饲养小鼠并监测直到胸骨斜躺。极结扎后 7 天，如刚刚所示暴露右肾。

用钝钳清除周围的脂肪和结缔组织，并在肾动脉和静脉周围松散地放置两根三零丝缝合线。轻轻梳理结缔组织和肾上腺，从肾脏的上端向幽门中部。轻轻地将输尿管从组织下端移位，将所有血管解开在一起，而不会引起出血。

接下来，将一个松散的结扎线向腹主动脉侧移动，将第二个松散的结扎线向肾脏侧移动。并用双结系住腹主动脉结扎。实心结会改变右肾的颜色。

用双结系住第二个结扎，在结之间留出空隙，以便可以切割血管，并切断肾血管。切除肾脏后，如刚才所示，闭合肌肉和皮肤层。然后，用无菌纱布擦干肾脏并称量收获的肾组织。

在手术后 4 周，与假手术动物相比，肾部分切除术小鼠血浆中 cyctatin C、肌酐和血尿素氮水平显着增加。部分肾切除术刺激的贫血也很明显，极地结扎动物的血细胞比容水平显着降低证明了这一点。部分肾切除术小鼠的心脏肥大和舒张功能障碍表现为心重比增加和经胸超声心动图分析，该分析显示后壁和前壁厚度、心肌性能指数和左心室质量指数显着增加。

肾部分切除术介导的心脏纤维化也表现为左心室匀浆和左残余肾匀浆中 1 型胶原表达的增加。此外，氧化应激在实验性尿毒症心肌病中起重要作用，显着刺激多种蛋白质的直接蛋白质羰基化修饰和左心室匀浆中的原癌基因酪氨酸蛋白激酶激活。一旦掌握，如果执行得当，这项技术可以在 40 分钟内完成。

在尝试此程序时，重要的是要记住检查动物的呼吸频率并适当调整异氟醚。在此程序之后，可以进行其他实验，例如比较特定药物治疗对肾部分切除术恢复的影响，以回答有关感兴趣的特定治疗的传统问题。该技术发展后，为慢性肾脏病领域的研究人员探索尿毒症心肌病的病理学和潜在的药物筛选铺平了道路。

看完这个视频，你应该对如何在鼠标中设置肾部分切除术模型有一个很好的了解。