2017年8月14日
提出了联合肝分型和门静脉结扎术 (ALPPS) 诱导肝脏快速肥大切除交界性切除肝肿瘤的方法。该模型可以阐明参与快速肥大的机制, 并允许对促进或阻止再生加速的药物进行检测。
这种手术干预的总体目标是通过结扎门静脉和实质横切来实现大鼠肝脏的快速肥大。该模型允许对肝脏快速再生进行详细的生理和分子评估。门静脉结扎后肝脏再生。
我们发现了一种在门静脉结扎的同时横切薄壁组织以加速再生的方法。该方法为加速肝脏再生提供了一个模型。这是一种用于临界可切除肝肿瘤患者的人体手术方法。
一旦动物完全麻醉并准备手术,使用小动物理发器沿从剑突到生殖器的中线剃掉腹部。彻底去除中线 2 厘米以内的毛发。对皮肤进行消毒后,在腹壁上做一个切口。
然后用 3-0 丝保持缝合线缩回两壁和剑突。接下来使用自制的小金属丝牵开器,将胃、结肠和小肠从肝十二指肠韧带上缩回。从而进入门静脉。
现在直截了当地解剖门静脉。用微型镊子提起腹膜,然后慢慢向内侧剥离。按以下顺序剖析门静脉分支。
首先,右后支。第二,左侧和左侧正中支在一起。第三,尾状核分支。
接下来,小心地用小动作剥下腹膜,以避免撕裂直接下方的肝叶的小动脉分支。一旦主门静脉裸露,就用缓慢向前的推动和扩张运动包围枝条。避免推挤阻力,以防止撕裂动脉或静脉。
这是该程序的重要组成部分。你必须避免推挤阻力。但通常,一旦您去除了腹膜表面,显微外科直角很容易在门静脉分支周围滑动。
如果出血,请用无菌棉签按压至少 1 分钟,然后重新评估。如有必要,重复此作几次。如果流血没有停止,那就献祭动物。
接下来,解剖右后叶支。首先,小心地移动直接穿过肺叶分支的动脉。然后使用弯曲的微型镊子,将动脉与腹膜颅侧拉在一起,露出右门静脉分支。
现在使用 6-0 丝结扎右后叶分支。观察右后叶。结扎后它会变得苍白。
接下来,剖析 LLL 和 LML 分支。它们共享一个公共中继。避免损伤在腹膜层内通向这些分支的动脉。
小心地将腹膜向后剥离,以保持这些动脉完好无损。然后解剖稍微独立的尾状叶分支。通向它的门静脉从主门静脉远端和内侧发至右叶支。
这与大型动物不同,后者的树枝严格低于 S。从主门静脉提起带有胆管的肝十二指肠韧带和动脉,以解剖并环绕尾状叶分支。使用弯曲的微型镊子并横向接近肺叶。
然后使用 6-0 真丝结扎。结扎后这个叶也会变得苍白。现在观察左右正中叶之间明显分界的外观。
这是由于仅 RML 的排他性门静脉丰富而形成的。对于门静脉结扎模型,手术可以在此处停止。要进行横断,请使用带有非常细的神经外科尖端的不粘双极银镊子。
首先,通过沿分界线创建一条短的烧灼条来预烧灼组织。接下来,用剪刀小心地剪下预烧灼的组织。切得足够深,以尽可能靠近肝内运行的腔静脉。
损坏腔静脉通常会导致牺牲动物,因此要格外小心。已经使用了不同的技术来横切薄壁组织。我们发现,使用带有细尖的银镊子,预先烧灼肝组织,然后用剪刀剪断它,效果最好,可以最大限度地减少失血。
横断后,将腹部拍干,确保没有出血。在关闭动物之前,请确保小肠已正确重新定位。然后使用 SH-3 针放置 0-1 丝缝合线来闭合腹膜和腹壁。
最后,使用 5-0 Maxon 缝合皮肤。手术后,与无横断面的 PVL 和有横断面的 PVL 相关的生长动力学明显不同,也称为 ALPPS。肝脏的每日体积测量显示,到第 3 天,PVL 后体积仅增加 100%,但 ALPPS 后体积增加 200%。
看完这个视频后,您应该对如何进行 75% 的门静脉流入薄壁组织的连接以及横切有一个很好的了解。掌握后,该过程不应超过 45 分钟。在尝试此程序时,重要的是要有麻醉师和在挥发性麻醉方面经验丰富的外科医生在场。
按照此过程的一般思路,您可以尝试其他类型的横切技术。例如,部分横断或结扎或射频消融,以确定横断的数量或类型对诱导快速肥大的重要性。不要忘记,在啮齿动物手术后,评估它们的疼痛并提供足够的镇痛作用很重要。
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本研究通过结合门静脉结扎与肝实质离断的手术模型,旨在诱导大鼠肝脏快速肥大,以加深对肝脏再生机制的理解,并评估潜在治疗药物的效果。
这种ALPPS大鼠模型为研究加速肝脏再生提供了一个机制性平台,而加速肝脏再生是实现临界可切除肝肿瘤切除的关键因素。通过模拟驱动肝细胞快速增殖的手术刺激,该模型支持再生医学中靶点的验证和信号通路的解析。它为临床前研究提供了一个系统,可用于降低旨在增强肝脏切除术后恢复的治疗策略的风险。
该模型适用于从靶点验证到临床前有效性测试的整个发现过程,尤其适用于调控肝脏再生通路的生物制剂或小分子化合物。