2017年6月1日
传统的平板凝胶电泳(SGE)实验需要复杂的装置和高的化学消耗。这项工作提出了一个协议,描述了一种在短时间内分离DNA片段的低成本方法。
本文介绍了一种关于 SNAP 凝胶电泳的新系统。该系统不仅可以大大减少化学构思实验时间,还可以通过智能手机实现琼脂糖凝胶中分离的实时跟踪。这三张图片代表了分子量标准中 50、100 和 1, 000 个碱基对凝胶电泳后的典型结果。
每个 DNA 片段都得到了很好的分离。SNAP 凝胶电泳是 DNA 片段分离最具创造性的方法,因此,它被认为是生化和生物分析的容器导师。这次我将向您展示一种关于 SNAP 凝胶电泳实验的新方法。
好,让我们开始吧。首先,我们称取 0.1 克琼脂糖凝胶,将其放入培养瓶中,将 TPE 缓冲液放入培养瓶中。制备的溶液的体积应不超过培养瓶容量的三分之一。
用防腐剂烟雾密封培养瓶,然后用微波炉加热琼脂糖缓冲液混合物。在将烧瓶放入微波炉之前,我们会在防腐剂烟雾上打一些孔,以防爆炸。将封固的琼脂糖溶液放入 SNAP 凝胶电泳管的通道中。
将梳子放入溶液中。封固的溶液将在室温下冷却并在几分钟后变成凝胶状态。从梳子中取出以创建孔并加入 TBE 缓冲液。
我们构建了一个简单的实时跟踪 DNA 片段分离系统,通过智能手机观察 DNA 片段的运动状态。首先,通过离心机将 DNA 分子量标准与 SYBR Green One 混合。将混合物加载到琼脂糖凝胶的孔中。
其次,打开 LED 光源并在 LED 上方放置带通滤光片,然后将电极放入芯片的两个通道中。接下来,将其他带通滤波器放在其上方。等待电源。
将电瓦数设置为 180 瓦。打开智能手机记录 DNA 片段分离过程。例如,我们使用智能手机来追踪 50 个碱基对 DNA 分子量标准品的分离。
SNAP 凝胶电泳是分离 DNA 片段的最有效方法。然而,废弃的实验表明,SNAP 凝胶电泳受到问题全长的限制。第一:分离需要很多小时甚至几天。
二:化学感知非常高。三:因为它需要很多设备。四:凝胶成像系统只能在实验完成后观察分离出的 DNA 片段。
此外,SNAP 凝胶电泳中常用的铱和溴具有致突变性和致癌性。实验结束后,每个 DNA 片段都得到了很好的分离。此外,我们在 SNAP 凝胶电泳芯片的四个通道中分离了相同的样品,并且 DNA 片段大小相同的问题在每个实验中移动了相同的距离。
从图片中可以看出,DNA 片段分离得很好,尽管有人怀疑 DNA 片段在图中看起来是白色的 B.It 可以通过优化芯片的参数和琼脂糖凝胶的浓度来改善。看完这个视频后,您一定会看到我们关于 SNAP 凝胶电泳的新信息。此外,所得 DNA 片段看起来是白色的。
这可以通过优化 SNAP 凝胶电泳芯片的参数和琼脂糖凝胶的浓度来改善。重要的是,在进气过程中必须非常小心,因为它需要高电压并且可能会成为试剂。
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本文介绍了一种新型的DNA片段分离方法——SNAP凝胶电泳,该方法显著减少了化学试剂的消耗和实验时间。该系统可利用智能手机实时追踪DNA分离过程。
利用智能手机支持的SNAP凝胶电泳实现实时DNA片段分离,可减少化学品消耗和检测时间,支持早期发现阶段的快速假设验证。该方法通过为目标验证工作流程提供定量且可重复的读出结果,提高了预测的可信度。该技术解决了核酸分析在发现阶段的低效问题,能够在先导化合物识别流程中实现更快的决策判断。
该方法位于早期发现与先导物识别之间,可支持以核酸为重点的研究中的假设验证和检测准备。