使用径向水痕迷宫评估外伤性脑损伤小鼠模型中的空间记忆障碍

该径向水踏步迷宫协议的总体目标是使用不需要游泳的以小鼠为中心的认知任务在创伤性脑损伤的小鼠模型中测试空间记忆。这种方法对于测试小鼠模型的认知特别有用，其中运动缺陷和/或缺乏动力使得基于游泳的认知测试方案（如莫里斯水迷宫）不切实际。虽然这种方法可以深入了解小鼠创伤性脑损伤的受控皮层影响模型中的群体差异和认知，但它也可用于测量已知在基于游泳的测试中表现不佳的老年和转基因小鼠模型的认知。

在所有测试日，请执行以下准备步骤。首先，让小鼠适应测试室，同时在它们的家笼中至少 30 分钟。圆形迷宫沿内壁提供视觉提示。

可移动的逃生盒位于九个不同的出口孔之一。当小鼠适应时，使用 70% 乙醇喷雾剂对出口和盒子进行消毒。接下来，用大约一英寸的冷水填充迷宫。

在两次试验之间保持水温一致非常重要。因此，请准确测量，并根据需要进行调整。现在，将逃逸框放在 9 个出口孔之一。

使用加热源保持盒子温暖，最好使用加热垫。另外，将盒子密封避光。逃脱盒应始终是黑暗、温暖且相对无味的。

光源也可能是一个提示，因此不要在两次试验之间改变它的位置。轻轻地抓住尾巴将测试鼠标从笼子中取出，并将其放在设备的中央。然后立即开始计时鼠标找到出口所需的时间。

如果鼠标爬入终止孔，并且在 20 秒后没有自发地重新进入迷宫，请不要停止试验。相反，用手将鼠标引导回迷宫的中心，让鼠标完成试验。如果 3 分钟后鼠标仍未退出迷宫，则将 Trial 评分为 Failure，并将时间记录为 3 分钟。

然后用手小心地引导动物沿着最笔直的小路到达出口。进入逃逸框后，让鼠标在那里停留一分钟。然后在迷宫重置时将其转移回其主笼。

在试验之间，用 70% 乙醇喷雾对逃脱盒和出口进行彻底消毒，以防止老鼠使用旧的工厂提示来定位正确的逃生路线。这可以很快完成。现在，在同一只鼠标上再重复两次试验，总共连续三次试验。

每个测试日包括每只小鼠的 3 次试验。不多也不少。除了消毒外，在测试不同的小鼠之间，还要排空迷宫并刷新水。

请务必将水温保持在 12 到 14 摄氏度之间。使用装有冰或较冷热水的容器将自来水温度调节到此范围内。在测试日之间，重要的是要确保迷宫中和迷宫周围空间中的视觉线索保持一致。

完整的测试制度包括连续五个测试日，所有测试都以相同的方式进行。第 5 天被认为是内存保留的度量。如果在第 6 天和第 11 天之间没有进行测试，则可以使用第 12 天的测试来测量长期记忆。

径向水迷宫用于研究接受受控皮层冲击诱导的创伤性脑损伤或假损伤的小鼠的损伤依赖性空间记忆缺陷。TBI 手术在文本协议和 Romin、Gao 和 Chen 于 2014 年的 JoVE 文章中进行了详细描述。简而言之，损伤是使用螺线管驱动的皮质冲击产生的，带有 3 毫米凸起的尖端。

假手术进行了手术，但受到设备的影响。手术后 35 天，执行了所述的测试方案。所有小鼠都通过了逃离迷宫的愿望标准测试。

所以所有这些都被包括在分析中。结果显示 TBI 小鼠和假对照之间存在明显差异。受伤小鼠在训练的第一天和两个记忆测试日的逃逸潜伏期明显更长。

因此，所描述的 TBI 影响了动物的学习能力。观看此视频后，您应该对如何使用鼠标特定的空间认知测试正确执行认知测试有很好的了解。一旦掌握，如果执行得当，每只动物可以在不到 15 分钟的时间内完成这项技术。

在尝试此过程时，重要的是要记住，视觉线索的位置和水温必须在所有试验中保持一致。