2017年9月27日
本文介绍了通过新生期辣椒素处理在大鼠中诱导特应性皮炎的方法,以及通过暴露于气化甲醛来研究甲醛吸入对特应性皮炎影响的实验方案。
本实验的总体目标是通过新生期辣椒素处理诱导类似特应性皮炎的症状,并检测甲醛对这些类似特应性皮炎症状的影响。该方法有助于解答皮肤科领域中与特应性皮炎病理生理学相关的关键问题。
该技术的主要优势在于能够诱导出类似特应性皮炎的症状,并建立一个重要的递增暴露系统。制备5毫克/毫升辣椒素溶液时,将1毫升吐温80、1毫升100%乙醇和50毫克辣椒素加入一个15毫升锥形管中,然后向锥形管中加入8毫升生理盐水。
盖上管盖并剧烈振荡,直至看不到分层现象。必须在出生后12至48小时内给予辣椒素。将辣椒素溶液注射到新生Sprague Dawley大鼠颈部背面中线处的皮下组织。
为防止因辣椒素注射导致新生鼠呼吸停止,应将其置于氧气舱内,直至呼吸恢复正常。如有必要,可轻压新生鼠胸部以促进呼吸。首先准备带有镜子的塑料舱,以便全面观察,并打孔以确保大鼠能够呼吸。
将大鼠放入塑料箱中,并用重物压住箱体顶部,以防止盖子被打开。然后架设一台数码摄像机,同步记录大鼠的镜像视角和正面视角。随后记录大鼠一小时内的自发行为。
回放视频片段,统计大鼠抓挠行为的次数,例如右侧大鼠所表现出的行为,以及位于中央的大鼠的行为。在评估病灶时,需确定麻醉大鼠耳部及其他部位皮炎的范围和严重程度。
将皮肤病变范围的单位大小定义为 0.25 平方厘米,并使用下表评估皮肤病变的严重程度。准备一个在相对两侧各有一个接头的亚克力玻璃盒。
为使甲醛气体循环,排气口应高于进气口。将管道连接至两个接口,并将排气口管道引至通风橱或室外,以排放气体。
将另一根进气管连接至医用氧气调节器。将一个常规的大鼠笼子放入亚克力玻璃箱内。将出生一周的大鼠放入笼中,然后尽可能严密地密封亚克力玻璃箱,以防止气体泄漏。
使用保鲜膜包裹腔室,并用带橡胶密封圈的盖子盖紧,确保密封。向连接医用氧气调节器的加湿瓶中加入0.5%甲醛溶液。请注意,甲醛操作可能具有极高危险性。
进行此操作时,应始终采取防护措施,例如佩戴口罩和手套。接下来打开调节器,将流速设置为每分钟5升。让大鼠暴露于甲醛气体中,持续2小时。
此处展示的是辣椒素处理大鼠皮肤炎症的代表性照片。图中显示了辣椒素处理大鼠皮炎的时间进程。该图像展示了辣椒素处理大鼠搔抓行为的时间进程。
这是经辣椒素处理的16周龄大鼠复发性皮肤病变的代表性图像。辣椒素处理动物的血清IgE水平显著升高。在辣椒素处理的动物中,IL-4 mRNA表达也显著上调。
此处显示经辣椒素处理的动物体内 IL-13 mRNA 表达显著升高。这些代表性照片显示了使用 1.2 百万分之一浓度和 0.8 百万分之一浓度甲醛处理五周后出现的特应性皮炎情况,对照组则为空气处理。
暴露于1.2 ppm甲醛会显著加重辣椒素处理的特应性皮炎模型的瘙痒症状,而暴露于0.8 ppm甲醛则无此效应。在评估皮炎程度时也观察到类似结果。在经1.2 ppm甲醛暴露处理的辣椒素诱导AD大鼠模型中,血清IgE水平升高。
采用此方法后,还可使用其他材料(如乙二醇溶液)来探究特定物质对特应性皮炎的影响。随着这些进展,该技术为皮肤病学领域的研究人员探索环境因素在特应性皮炎发病机制中的作用铺平了道路。
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本文介绍了通过新生期辣椒素处理在大鼠中诱导特应性皮炎样症状的方法,并研究甲醛吸入的影响。该研究旨在加深对特应性皮炎发病机制的理解。
特应性皮炎中的环境诱因在转化皮肤科学中仍是关键的未知因素,影响着治疗开发的预测可信度。该大鼠模型可系统评估环境暴露(如甲醛)对疾病进展和生物标志物反应的影响。此方法支持机制层面的风险排除,并为皮肤科研发管线的早期阶段组合决策提供依据。
该模型通过在特应性皮炎进展过程中对环境因素进行可控的假设验证,架起了早期发现与临床前验证之间的桥梁。