Name: 大鼠舌的机械和粘弹性的体内评估 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: 学习在麻醉大鼠中通过舌下神经刺激和被动Lissajous力/变形曲线评估舌肌张力与粘弹性特性的方法。该技术可为睡眠呼吸障碍研究提供定量数据，并适用于小鼠模型。

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本研究得到了美国国立卫生研究院两项基金的资助：HL089447（“肥胖与阻塞性睡眠呼吸暂停：舌脂肪与代谢功能的重要作用研究”）和 HL094307（“肥胖与舌脂肪之间关系的研究”）

所有涉及动物受试者的操作均已被宾夕法尼亚大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准（方案编号 805822）。所述操作为终末性操作，无需使用无菌条件或药品级产品。
1. 手术操作
<img alt="在动物舌头上进行手术步骤，使用器械，展示组织扩张与修复。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56006/56006fig1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图1"> 
图1：手术操作步骤。 
(A) 手术规划标记。红色虚线表示切口区域。两条黑色线表示下颌位置，底部黑色线标记胸廓位置。蓝色线表示舌骨。 (B) 钝性分离脂肪组织、舌下腺和颌下腺后，暴露二腹肌后腹（箭头所示）。 (C) 切除二腹肌后腹（绿色虚线），以暴露舌下神经（白色箭头）。 (D) 将舌下神经（白色箭头）从周围筋膜中游离出来。 (E) 通过轻轻牵拉气管周围的平滑肌（绿色箭头指示施力方向）暴露气管，并将其提起 (F) 以备插管。星号表示舌头在舌骨上的附着点。绿色虚线标记插管切口位置。白色箭头指示已预先打好的松结，用于在插管插入后固定导管。 (G) 切开气管以进行插管。 (H) 插入气管套管并用方结固定。 (I) 对舌头进行缝合。 <a href="http://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/56006/56006fig1large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<ol>
	<li>麻醉与手术准备
	<ol>
		<li>将大鼠放入含有4%异氟烷麻醉剂的诱导室中。</li>
		<li>将动物仰卧于热源上，通过鼻罩以1 - 3%异氟烷维持麻醉，确保呼吸频率至少为每分钟70次。</li>
		<li>用电动推剪和脱毛膏剃除颈部区域的毛发。使用脱毛膏时，用棉签将脱毛膏均匀涂抹于毛发区域，直至毛发完全去除。脱毛膏接触皮肤时间过长可能引起皮肤刺激。</li>
		<li>用70%酒精清洁手术区域（图1A).</li>
		<li>在进行初始切口前，检查动物的呼吸模式和反射（如脚趾夹捏反射消失）。持续监测和评估麻醉深度至关重要（每10分钟记录一次呼吸频率和反射消失情况）；在整个手术过程中，动物必须维持在深度外科麻醉水平。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>舌下神经识别
	<ol>
		<li>用手术剪沿图中红色虚线所示位置切开并去除皮肤，以暴露手术区域 图1A.</li>
		<li>钝性分离穿过脂肪组织、舌下腺和下颌下腺以及气管周围的肌肉层。 
		注意：解剖时应谨慎操作，尽可能使用钝性分离，并注意避免损伤颈部血管。</li>
		<li>在气管外侧辨认二腹肌后腹（PD）图1B - 白色箭头）。舌下神经走行于该肌肉下方（图1C - 白色箭头）。使用电灼器在舌骨近端切除甲状软骨（图1C - 虚线）。 
		注意：切勿让神经或其周围组织变干。在神经上滴加一滴矿物油以保护之。为避免刺激从电极场传播引起肌肉收缩，请仔细烧灼神经周围可能接触部位的肌肉组织。</li>
		<li>使用一对精细镊子，将舌下神经从周围的筋膜中分离出来。借助钩子，确保至少有3 mm的神经暴露，以便连接双极电极。图1D).</li>
		<li>使用微型止血钳，在远离舌骨的位置压榨舌下神经（图1D - 白色箭头）尽可能避免刺激的逆向传导。用显微止血钳对神经施加压力，持续5秒，以压榨神经。当止血钳夹住神经时，应可见舌根部出现短暂的抽搐。</li>
		<li>对另一侧重复该操作步骤。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>气管插管
	<ol>
		<li>通过钝性解剖轻轻分离周围平滑肌，暴露气管（图1E - 如绿色箭头所示）。 
		注意：操作应谨慎，优先使用钝性分离。将套管的直径与气管直径进行比较。套管应与气管匹配良好，并在按照步骤1.3.2至1.3.5所述缝合后能稳定留置。</li>
		<li>使用持针器轻轻提起气管，并将一根4-0缝线从气管下方穿过，靠近胸腔。在距喉部第6与第7软骨环之间打一个初始的松结图1F - 白色箭头）。插入套管后将此结扎紧，以固定其位置。</li>
		<li>将移液管的管 stem（用矿物油润滑移液管以方便插入）从气管下方滑入，以抬起气管并便于插入套管（IV 14 g × 3.25" 套管）。</li>
		<li>从喉部起第4与第5环之间切开一个小切口图1G - 白色箭头）。首次切开后，切口往往会扩大，因此初始切割需保守操作，以避免气管被完全切除。 
		注意：在切开气管前，确保导管已准备就绪，且麻醉输送系统已开启。</li>
		<li>通过套管开始麻醉给药，轻柔地将套管插入切口，并在气管内推进约5个气管环的长度。用缝线固定套管，以形成密闭的气道密封。图1H). 
		注意：确保液体不进入切开的气管，以避免窒息。一旦切开气管，动物将呼吸室内空气，因此应迅速插入套管以维持麻醉气体的供给。在移动动物时（如有必要），需监测套管在气管内的正确位置。</li>
		<li>轻轻地将动物从鼻罩中取出。 
		注意：使用注射类麻醉剂替代异氟烷可省去气管插管步骤，并减少实验操作区域的管路干扰，从而简化实验流程。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>舌部缝合
	<ol>
		<li>将一段20 cm长的5/0缝合线（建议使用黑色编织丝线）浸泡在PBS中。</li>
		<li>在保持大鼠口腔张开的同时，用打结镊子轻轻夹住舌尖。</li>
		<li>将缝线从舌尖向内侧穿过（图1I - 白色箭头）注意用生理盐水保持舌头湿润，以避免潜在的组织损伤。</li>
		<li>打一个直径约4厘米的环（直径可根据动物与力传感器之间的距离进行调整）。 
		注意：确保缝线和舌头保持湿润，以利于插入并避免对组织造成不必要的损伤。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 实验设置
<img alt="大鼠脑部手术方法；电极插入、神经刺激实验、详细设置。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56006/56006fig2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图2"> 
图2：动物的定位与固定。 
(A) 小鼠被放置在实验平台上。通过施加垂直张力（绿色箭头）固定下颌并保持口腔张开。缝合线环连接至力传感器（白色箭头）。(B) 连接电极。(C) 每个安装在显微操作器上的电极均稳定地连接至神经。插图显示钩状电极的末端结构。(D) 使用游标卡尺测量舌头的最佳长度，从舌骨水平处的附着点至舌尖。本图中，电极为清晰显示解剖结构已被移除。<a href="http://cloudfront.jove.com/files/ftp_upload/56006/56006fig2large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
注意：将动物仰卧于仪器的加热托盘上，并采取以下固定措施，以避免实验过程中动物移动。
<ol>
	<li>使用一根直接连接到加热平台的塑料涂层金属扎带，将大鼠的鼻部固定在托盘上（图2A，2B）。</li>
	<li>通过施加垂直张力保持大鼠口腔张开（使用一个三向转环连接9 kg测试单丝线，并用相机支架固定）（图2A - 绿色箭头）。 
	注意：稳定大鼠的另一种方法是使用啮齿类动物开口器或其定制改装装置。必须保持口腔持续张开且稳定，以避免颈部移动，从而影响测量质量。</li>
	<li>将缝合环连接至力传感器（图2A - 白色箭头）。</li>
	<li>使用手术胶带固定大鼠的四肢和腹部，以限制在刺激过程中的运动。</li>
	<li>将两个刺激用钩状双极电极放置在已解剖的舌下神经上，位置位于压伤部位近端（图2C）。
	<ol>
		<li>使用自行制作的刺激双极电极，该电极由一对外科级不锈钢29号针电极组成，通过塑料支撑物将其固定在一起，间距为2 mm（此处我们使用了用胶带绑在一起的两支1 mL移液器）。</li>
		<li>将针电极的尖端弯成钩状，钩的尺寸应足够小，以便与神经形成稳定接触（直径约1 mm）（图2C - 插图）。</li>
		<li>将每个电极的两根导线连接至可堆叠的双接线柱（香蕉插头转BNC插头），然后通过BNC分路器连接至原位肌肉测试系统（in situ Muscle Test System）的刺激模块（表3）。 
		注意：确保动物状态稳定，颈部和舌头与力传感器杠杆对齐。持续监测呼吸频率，并确保固定装置不影响呼吸。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 最佳长度（L0）与最大等长收缩力的测定
<ol>
	<li>逐渐调整舌头的长度，并施加等长单收缩刺激，直至获得最大收缩力。
	<ol>
		<li>将 L0 定义为等长单收缩力（表 1）达到最大值时的长度，并记录该长度用于后续力测量值的标准化，因为该长度因动物个体而异。使用游标卡尺测量从舌骨水平处的附着点到舌尖的舌头长度（图 2D）。 
		注意：电极的正确放置至关重要，以确保与神经之间的最佳接触。在分别刺激两条神经中的一条或同时刺激两条神经时，理想的位置应产生相似且具有叠加效应的力。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>实验开始前，将两个电极连接至刺激器，并施加一次测试性强直刺激（表 1）。在此收缩过程中，监测动物以确保其体位稳定，并检查是否存在颈部肌肉的非预期可见收缩。</li>
	<li>通过施加一次单收缩，20 秒后再施加一次强直刺激，来测量等长收缩力。每轮刺激循环包含一次单收缩和一次强直刺激，共重复 3 次，每次刺激循环之间间隔 4 分钟以恢复，并记录最大单收缩力和最大强直收缩力。</li>
	<li>在每次收缩之间滴加少量 PBS，始终保持舌头湿润。 
	注意：若出现颈部肌肉收缩，应仔细调整电极位置，使其不接触任何周围肌肉组织；必要时，可对与电极接触的组织进行电灼处理。</li>
</ol>
4. 黏弹性性质测定（利萨茹曲线）
<ol>
	<li>在等长力测定后，让舌头休息 3 - 5 分钟。从 L 开始绘制利萨如曲线0因此，动物和力传感器的位置绝不能改变。</li>
	<li>不刺激舌下神经，施加被动拉伸循环（表 2）随着位移（d）的增加 即 5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50% 的 L0 （更高的振幅可能需要使用双模式控制器，其行程值需超过305C-LR型号的规格）。例如，40% L的振幅0 将导致舌头从+20%L处发生变形0 至 -20% L0.
	<ol>
		<li>使用固定的2 Hz正弦频率，每个周期内重复10次，每个周期总持续时间为5秒。过去曾对膈肌等组织采用过改变正弦频率的方法。24 并可被采纳以修改实验方案。</li>
		<li>每次循环之间间隔30秒，并确保整个过程中舌头保持湿润。 
		注意：操作过程中需保持舌头湿润，可添加数滴 PBS。在拉伸过程中，尤其是位移达到 40% 或更高时，应确保固定下颌的夹具稳定不动。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>实验结束后，动物仍处于深度外科麻醉状态时，立即根据批准的IACUC动物实验方案实施安乐死。解剖舌组织以进行后续处理（即 冰冻切片或用于生化分析的储存。</li>
</ol>

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作者无任何利益冲突需要披露。

舌部代谢和/或成分的变化，例如肥胖导致的舌脂肪浸润，预计会引起本方案所评估参数的可量化改变。量化舌肌力量具有重要意义，因为伸舌与缩舌活动之间的失衡或整体舌肌力量减弱可能导致上气道闭塞15。旨在增强舌肌力量的锻炼技术已在大鼠中成功应用25,26，也在人类中得到应用27,28,29，并有效减轻了睡眠呼吸暂停的严重程度。此外，舌下神经刺激现已成为阻塞性睡眠呼吸暂停的一种外科治疗方法22,23,30。
本实验方案旨在指导用户分析舌肌的力学和...

舌头在咀嚼、吞咽、味觉感知和言语中提供重要的支持作用。舌部具有独特的外在和内在肌肉结构，其神经支配及解剖与功能各不相同，这构成了这一肌肉性流体静力骨骼系统的独特性。近年来成像技术的进步为人们更详细地了解其复杂解剖结构提供了可能1。舌功能减退、舌萎缩、吞咽困难以及言语障碍也是多种肌病的常见表现，例如帕金森病2、肌萎缩侧索硬化症（ALS）3、强直性肌营养不良症（MD）4以及其他肌病。
与常见疾病状态相关的肌肉成分变化会影响舌的力学和黏弹性特性。例如，对舌力的功能分析揭示了与衰老5,6、缺氧7,8和肥胖9,10相关的收缩特性改变。在肌营养不良的情况下，纤维化程度增加导致肌肉刚度升高，这在应用利萨茹变形协议时表现为对变形的顺应性降低11。相反，肌肉脂肪含量的变化（如在肥胖患者中所记录的）会改变骨骼肌的代谢12和力学特性13,14，并预计会提高肌肉对变形的顺应性。舌脂肪含量增加也与人类阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）的发展相关17，其机制是通过增加舌体积至部分上气道阻塞（呼吸暂停）的程度15,16。与人类相似，在肥胖Zucker大鼠中也已观察到舌内脂肪浸润现象10，提示该模型是研究脂肪浸润对舌生理影响的有力工具。
测量舌肌力量需要精细的外科技术，以分离并双侧刺激舌下神经17,18。此类技术此前已在大鼠5,17,19,20、兔21和人类22,23中描述，但对研究者而言缺乏足够的可视化辅助。由于该技术具有高度专业性，提供一份详尽的操作方案将显著提升该技术的可及性与可重复性。本实验范式的目标是展示一种在大鼠模型中测量舌肌力量及其黏弹性特性的有效且可靠的技术。为实现该目标，首先对大鼠实施麻醉，暴露舌下神经，并对气管进行插管，以确保能够自由接触动物的舌体。随后，使用缝合线环将舌尖连接至一个能够同时控制力和长度的力传感器，同时采用两个双极钩状电极刺激舌下神经，以诱发舌肌收缩。完成力量测量后，利用力传感器的长度控制功能，按照固定振幅（李萨如曲线）、持续时间和频率的正弦波协议快速改变舌的长度，从而推导其黏弹性特性11,24。本方案将指导研究者完成解剖步骤、动物在实验平台上的定位、电极放置，以及最终的力和黏弹性数据采集与分析。

<table><tbody><tr><td>加热手术托盘（SurgiSuite）</td><td>Kent Scientific</td><td>SurgiSuite-LG</td><td>包含加热平台</td></tr><tr><td>LED照明与放大装置套件</td><td>Kent Scientific</td><td>SURGI-5003</td><td></td></tr><tr><td>RC&lt;sup&gt;2&lt;/sup&gt; 啮齿类动物电路控制器</td><td>VetEquip</td><td>922100</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>Butler Schein 动物健康供应公司</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>酒精消毒棉</td><td>Webcol</td><td>6818</td><td></td></tr><tr><td>棉签</td><td>MediChoice</td><td>WOD1002</td><td></td></tr><tr><td>毛发修剪器</td><td>Conair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>脱毛膏</td><td>Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>医用胶带</td><td>Transpore</td><td>3M</td><td></td></tr><tr><td>D-PBS</td><td>Corning</td><td>21-030-CM</td><td></td></tr><tr><td>手术剪</td><td>World Precision Instruments</td><td>503717-12</td><td></td></tr><tr><td>止血钳</td><td>Merit</td><td>97-458</td><td>可使用任何组织钳代替</td></tr><tr><td>微解剖镊，弯头，带齿，10.2 cm，不锈钢</td><td>World Precision Instruments</td><td>504479</td><td></td></tr><tr><td>打结镊</td><td>Fine Science Tools</td><td>18025-10</td><td></td></tr><tr><td>钝头微钩</td><td>Fine Science Tools</td><td>10062-12</td><td></td></tr><tr><td>微型止血夹</td><td>Fine Science Tools</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>热灼器</td><td>WPI</td><td>501292</td><td>一次性灼器成本较低，可供选择</td></tr><tr><td>静脉用14号×3.25&quot;套管</td><td>BD</td><td>B-D382268H</td><td>用于气管插管</td></tr><tr><td>编织型不可吸收丝线，4-0规格</td><td>Harvard Apparatus</td><td>SP104</td><td>用于固定气管套管</td></tr><tr><td>编织型不可吸收丝线，5/0规格</td><td>Surgik LC, USA</td><td>ESILRC15387550</td><td>用于缝合舌头</td></tr><tr><td>塑料包被金属扎带（或电线）</td><td></td><td></td><td>用于将大鼠鼻部固定在平台上</td></tr><tr><td>相机支架</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>三向旋转接头及Trilene 9 Kg张力单丝线</td><td>Berkley</td><td></td><td>用于固定下颌并保持口腔张开</td></tr><tr><td>带角度调节功能的相机支架</td><td></td><td></td><td>用于支撑三向旋转接头并保持口腔张开</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;in situ&lt;/em&gt; 肌肉测试系统</td><td>Aurora Scientific</td><td>809C</td><td>该系统专为小鼠设计，通过延长平台进行改装；也可使用专用于大鼠的806D系统</td></tr><tr><td>双模式肌肉杠杆（力传感器）</td><td>Aurora Scientific</td><td>305C-LR</td><td>309C比305C-LR具有更高的位移能力。更多信息和规格链接：http://aurorascientific.com/products/muscle-physiology/dual-mode-muscle-levers/</td></tr><tr><td>针状电极（外科级不锈钢，29号规格）</td><td>AD Instruments</td><td>MLA1204</td><td>推荐在小鼠中使用300C型号</td></tr><tr><td>磁力支架</td><td>World Precision Instruments</td><td>M10</td><td>用于制作双极刺激钩状电极</td></tr><tr><td>Kite手动显微操作器</td><td>World Precision Instruments</td><td>KITE-R 和 KITE-L</td><td>需配合钢制底板使用</td></tr><tr><td>可堆叠双接线柱，带香蕉插孔×BNC插孔</td><td>McMaster Carr</td><td>6704K13</td><td></td></tr><tr><td>碳纤维复合材料数显卡尺</td><td>VWR</td><td>36934-152</td><td></td></tr></tbody></table>

体内评估大鼠舌组织的力学与黏弹性特性

In Vivo Evaluation of the Mechanical and Viscoelastic Properties of the Rat Tongue

舌头是大多数脊椎动物口腔底部高度神经支配和血管化的肌肉性流体静力结构。其主要功能包括辅助咀嚼和吞咽，以及味觉感知和发音。因此，舌头的强度和体积可影响脊椎动物完成摄食、交流和呼吸等基本活动的能力。患有睡眠呼吸暂停的人类患者常表现为舌体增大，其特征为肌张力降低和肌内脂肪增加，这些变化可通过磁共振成像（MRI）进行可视化和量化。测量舌头力量生成能力及其黏弹性特性的方法，是获取功能信息并与影像数据相关联的重要工具。本文介绍了在麻醉的Zucker大鼠中测量舌力产生的技术。 通过 对舌下神经进行电刺激，并通过施加被动李萨如力/形变曲线来测定舌头的黏弹性特性。

<img alt="肌肉收缩曲线图与三维图，显示强直收缩实验中的力-位移相关性" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56006/56006fig3.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图3"> 
图3：代表性结果。 
（A） 成功记录的肌肉抽搐力和强直收缩力曲线示例。相应的刺激信号以红色曲线表示。 （B） 由于次最大收缩（蓝色迹线）及颈部肌肉的间接刺激，导致舌肌强直收缩失败的示例。上述两种情况均可通过重新放置刺激电极，或避免电极末端与周围肌肉组织接触而得到改善。 (C) L 的正弦波位移示例0 （L 的 25%）0用于测定舌头的黏弹性特性。平均伸长力（蓝色方块）和缩短力（绿色方块）可用于计算峰-峰值力。24红色方框表示用于分析的范围...

我们描述了一种在麻醉大鼠模型中进行的外科手术操作，用于测定舌肌的肌张力及黏弹性特性。该操作包括对舌下神经进行特异性刺激，并对肌肉施加被动李萨如力/形变曲线。

舌头是大多数脊椎动物口腔底部一个高度神经支配和血管化的肌肉性流体静力结构。其主要功能包括……

本实验的总体目标是评估麻醉大鼠舌肌的强度及其黏弹性特性。该方法有助于回答睡眠呼吸障碍领域中关于阻塞性睡眠呼吸暂停的关键问题。该技术的主要优势在于能够提供有关肌肉功能的定量数据，且经过适当培训后，可利用大多数肌肉力学实验室中常见的离体肌槽装置轻松开展实验。这些方法可以揭示大鼠舌部的生理学和力学特性，也可应用于其他系统，包括小鼠模型。我们最初是在评估舌根部脂肪沉积如何改变该肌肉力学特性时，提出了这一方法学思路。通过脚趾夹捏无反应确认达到适当的镇静程度后，使用手术剪在大鼠颈部皮肤上切除一个椭圆形区域，并去除该处皮肤。钝性分离任何脂肪组织、舌下腺和颌下腺以及气管周围的肌肉层。使用电灼器，在可能与神经接触的部位，切除靠近舌骨的二腹肌近端部分。然后，在神经上滴加一滴矿物油，以防止其脱水。使用一对精细镊子将舌下神经从周围组织中分离出来。使用钩子确保有至少三毫米的神经可用于连接双极电极。使用微型止血钳，在尽可能远离舌骨的位置夹伤舌下神经，以避免刺激发生逆行传导，施加五秒钟的轻柔压力。当止血钳夹住神经时，应可见舌根部出现短暂的抽搐。随后，在另一侧重复上述神经识别与损伤操作。进行气管插管时，首先应轻柔地钝性分离气管周围平滑肌，以暴露气管组织。接着，使用持针钳小心提起气管，并在靠近胸腔的位置将4-0缝线穿过气管下方。在距喉部第六与第七气管环之间打一个初始松结，然后将一支经矿物油润滑的移液管管柄从气管下方滑入。当移液器就位后，在靠近喉部的第四与第五软骨环之间做一个小切口。将连接麻醉机的套管轻轻插入切口，深度约为五个软骨环的距离。将套管固定于缝线上以形成密闭密封，并使用打结镊子小心夹住舌头。然后，将一根浸有PBS、长20厘米的黑色丝线编织五零号缝合线从舌尖向内侧穿过，并在缝合线上打一个约4厘米宽的环形结。为测定舌头的等长收缩力和黏弹性特性，将动物仰卧置于肌力测试系统的加热托盘中，并使用带塑料涂层的金属扎线将动物的鼻部固定在托盘上。插入一个连接在9千克张力单丝线上的三通旋转接头，以保持动物口腔处于张开状态，再将缝合线环连接至力传感器。用胶带固定四肢和腹部，以在刺激过程中固定动物，并使用定制的刺激钩通过极性电极连接每侧舌下神经。使用可堆叠的双接线柱将每个电极的两个香蕉插头转换为单个BNC连接器。然后，使用BNC分路器将电极连接至仪器的刺激模式。在确认舌部和颈部与力传感器的杠杆对齐后，逐渐调整舌肌长度并施加单次电刺激，直至获得最大收缩力。一旦获得最大单收缩力，使用游标卡尺测量从舌骨附着点至舌尖的舌肌长度。为测量等长收缩力，先施加一次单刺激，20秒后再施加强直刺激，记录最大单收缩力和强直收缩力。为了在不改变动物位置的情况下测定舌头的黏弹性特性，在等长力测定后三到五分钟，对舌体施加被动拉伸循环，拉伸位移从最适长度开始逐渐增加，且不刺激舌下神经。此处展示了三个月大Zucker大鼠的抽搐力和强直收缩力的预期值。刺激后产生的强直收缩力应迅速达到峰值。随后逐渐缓慢下降，直至刺激停止。在此图中，可观察到一些不成功的收缩，表现为第四次收缩在刺激结束前未能达到平台期，或刺激引发了颈部肌肉的收缩。这些具有代表性的长度与力轨迹的李萨如功环，是通过将舌头从其最适长度的5%拉伸至50%获得的。随后可将这些回路组合，生成典型的利萨茹回路轨迹。一旦掌握该技术，若操作得当，可在大约一个半小时内完成。观看本视频后，您应能充分理解如何暴露并分离舌下神经，以及如何测定舌头的机械黏弹性特性。感谢观看，祝您的实验顺利。

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大鼠舌的机械和粘弹性的体内评估

本文介绍了用于制备大鼠尾腱以进行生物力学和力生物学研究的实验步骤。演示了制备过程中主要步骤的多个关键环节，包括组织提取、横截面积测量、冲洗以及装入生物反应器腔室。...

大鼠尾腱的制备用于生物力学与力生物学研究

来源：Canovic, E. P., 等. 利用原子力显微镜、冲击压痕和流变学表征脑组织的多尺度力学特性。J. Vis. Exp. (2016)在本视频中，使用流变仪对脑组织施加受控的振荡旋转运动，以产生剪切应变，并评估组织的黏性和弹性特性。流变仪作为一种功能性工具，可为脑组织在损伤或神经退行性疾病过程中的力学行为提供...

使用流变仪测量小鼠脑组织的黏弹性特性

在本研究中，使用了 原位 将讨论用于纤维关节生物力学的加载装置与微米级X射线计算机断层扫描技术的结合应用。可通过整体关节生物力学变化识别的实验读数包括：1）反作用力与位移的关系， 即 牙槽窝内牙齿的移位及其对载荷的反应性响应，2）三维（3D）空间构型与形态测量学 即 牙齿与牙槽窝之间的几何关系，以及加载轴线改变导致的读数1和读数2的变化 即...

in situ 骨-牙周膜-牙齿纤维关节的压缩加载与相关无创成像

电子 von Frey 测量法是对传统 von Frey...

使用电子 von Frey 仪器测量小鼠后肢触觉敏感性的变化

本文介绍了一种用于体内连续记录诱发性和自发性肌电位的可植入系统的制造方案。该系统应用于喉部肌肉在神经损伤后重新神经支配过程的研究。...

一种用于慢性活体肌电图记录的可植入系统

本研究描述了一种评估舌尖中线触觉感知的标准方法。利用冯·弗雷毛（Von Frey Hair,...

使用Von Frey单丝纤维评估中线舌部点压觉体感功能

本文介绍了一种用于味觉功能细胞成像的 µTongue（舌上微流控）装置 体内...

µTongue：一种基于微流控技术的舌部功能成像平台 在体 内

本研究展示了一种利用光栅方向辨别测试评估舌部空间触觉敏感性的标准操作流程，并通过R指数法确定感知阈值。...

使用栅格方向测试评估空间性舌部触觉敏感度

本文展示了制备模拟软组织的明胶仿体的实验方法及步骤总结，并介绍了利用压痕法和磁共振弹性成像对其进行相应的黏弹性表征。...

利用压痕法和磁共振弹性成像对模拟软组织的明胶仿体进行黏弹性表征

本方案描述了使用基于操作行为的口面部疼痛评估装置，在神经病理性口面部疼痛大鼠模型中评估机械性痛觉过敏的方法。...

利用口面部操作性疼痛检测法评估大鼠神经损伤诱导的机械性痛觉过敏

体积性肌肉丧失（VML）损伤超出了机体自身的再生能力，导致永久性功能缺损。目前的 VML 研究主要集中在四肢和躯干肌肉。为了将 VML 的机制研究扩展到颅面肌肉，本文描述了一种用于在 VML 损伤前后对咬肌功能进行纵向评估的 in vivo...

大鼠咀嚼肌在容积性肌肉缺损失伤（VML）手术构建后的体内功能评估

学习在麻醉大鼠中通过舌下神经刺激和被动Lissajous力/变形曲线评估舌肌张力与粘弹性特性的方法。该技术可为睡眠呼吸障碍研究提供定量数据，并适用于小鼠模型。

体内评估大鼠舌组织的力学与黏弹性特性

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