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DOI: 10.3791/56044-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
在这里提出的行为测试的目的是检测脑外伤后大鼠的功能性缺损。四具体的测试表明, 检测行为的缺陷, 以反映对特定脑区的损害, 有时延长到一年后受伤。
这里介绍的行为测试的总体目标是检测创伤性脑损伤后大鼠的功能缺陷。将介绍四种不同的测试,用于检测神经或认知功能的缺陷。这些方法可以帮助回答脑损伤研究领域的关键问题,例如受伤后大脑的哪些区域受损或实验性治疗是否有效。
这些技术的主要优点是它们在许多实验室中得到广泛认可,并被证明是可重复的,并且对不同类型的脑损伤(如爆炸伤和中风)敏感。这些技术有助于进一步了解创伤性脑损伤如何影响神经和认知功能,以及测试大鼠的实验性治疗。一般来说,由于大鼠处理经验不足,并且在训练和测试之前没有给足够的时间让大鼠适应,该方法的新手会很挣扎。
这是让老鼠平静下来所必需的,以使测试时间更有效。通过抓住大鼠的尾巴并将其保持在离桌面约 6 到 12 英寸的位置,从前肢屈曲测试开始训练。观察大鼠的前肢是否伸展或弯曲。
在评分表上,对存在屈曲进行评分,用 1 评分,或对无屈曲评分,评分为 0。接下来,对于后肢屈曲测试,再次用尾巴抬起大鼠,并保持在桌子表面上方约 6 到 12 英寸处。观察大鼠是否伸展或弯曲后肢,并用 1 分对有屈曲的存在用 0 分,用 0 分对无屈曲进行评分。
对于下一个测试,抓住老鼠的尾巴,然后慢慢地将其降低到桌子的边缘,直到鼻子距离边缘约 10 厘米。将老鼠慢慢地移向边缘,不要让胡须接触边缘。观察老鼠是否伸出前爪并伸向桌子。
对有无伸展的前爪进行评分。接下来,对于接触触发的放置测试,握住大鼠,身体和手与桌子边缘平行,前腿自由。慢慢地将大鼠放低到桌子边缘,直到一侧的胡须接触到桌子的边缘。
观察大鼠是否在胡须接触后立即将与接触桌子的胡须相同的一侧将前肢伸向桌面边缘。对是否有伸手向桌子进行评分。最后,对于后爪抓握反射测试,用一只手握住大鼠,拇指和食指在前肢下方的胸部周围。
用食指轻轻触摸每个后爪的手掌。观察大鼠是否抓住食指,并对有无抓住进行评分。手术后 24 小时,通过将大鼠放在光束上并启动计时器来开始光束平衡测试。
仔细观察大鼠 60 秒,并将分数记录在工作表上。让大鼠在试验之间短暂休息,无论是在实验者的手臂上还是在家笼中。首先将老鼠放入球门箱中一分钟。
一分钟后,移走大鼠并通过打开灯光和白噪声开始试验。将老鼠放在最靠近球门框的钉孔位置的横梁上,让老鼠进入球门框。当大鼠的前脚跨过球门框的门槛时,立即关闭灯光和噪声源,注意一次试验结束。
在每次试验之间让大鼠在目标框中休息 30 秒。在每个钉位置和起始位置重复一次光束行走训练。将钉子插入孔中,并在钉子就位的情况下运行一次完整的光束行走。
然后,使用秒表,对每次试验计时并重复,直到大鼠在 5 秒内完成 3 次试验。手术后 24 小时,使用带有钉子的完整光束在光束行走上测试大鼠。视觉提示位于房间周围,为老鼠提供地标,以便他们学习和记住隐藏平台的位置。
通过打开视频跟踪软件并加载正确的方案来开始第一次试验,包括带有平台位置、游泳长度、试验次数、动物数量和治疗组的水迷宫地图。将平台放置在指定的位置,并检查它是否与软件中的地图匹配。然后,将大鼠放在指定位置的面向墙壁的水箱中,并立即启动跟踪程序和/或秒表的计时器。
让老鼠 120 秒找到平台。当老鼠找到平台时,停止秒表并在工作表上记录时间。注意,如果老鼠找不到平台,请用手将其引导至平台并记录 120 秒。
让大鼠在两次试验之间在平台上停留 15 秒。试验 2 后,将大鼠放入加热的围栏中 4 分钟。最后,将平台移动到第二个位置并检查它是否与软件中的地图匹配。
重复试验 1 和 2 过程,直到完成所有四个起始位置和平台配对。神经评分程序的结果表明,在手术前的第 0 天可能会出现假阳性,并且该测试对检测 TBI 组微小差异的敏感性,因此第 0 天与第 1 天、第 2 天和第 3 天不同。光束平衡结果表明,光束平衡试验对受伤后不久和受伤后较长时间的缺陷敏感。
梁行走试验的结果表明受伤后早期存在缺陷。然而,到受伤后 6 个月,两组之间没有显着差异,表明受伤组发生了愈合。此外,工作记忆在受伤后 3 个月显示缺陷,而工作记忆和参考记忆在受伤后 12 个月均显示缺陷。
让大鼠适应处理并为神经评分、光束行走和光束平衡测试进行预训练非常重要。一旦掌握,简短的神经系统评估就可以快速完成,无需任何专业设备。在神经评分、光束平衡和光束行走程序之后,可以使用不同版本的水迷宫,以及其他行为范式,如新颖的物体识别测试,来回答与学习和记忆有关的其他问题。
观看此视频后,您应该对如何使用行为测量来检测神经和认知缺陷有很好的了解。在进行行为实验时,适应处理、预训练和一致性都至关重要。
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