维护伊蚊蚊蚊子感染沃尔巴克

该协议的总体目标是描述感染沃尔巴克氏体的埃及伊蚊的维护。这些蚊子被释放到世界各地，以抑制登革热和其他病毒的传播。我们饲养埃及伊蚊的方案可供任何有兴趣将蚊子用于实验或疾病控制计划的研究人员使用。

这种方法也可用于饲养转基因蚊子，用于蚊子种群控制计划，包括涉及昆虫不育释放的计划。这种方法所涉及的原则也可以应用于其他病媒物种的饲养。对于该协议，将蚊子安置在大约 26 摄氏度和 50% 至 70% 的相对湿度下，并具有赤道光周期。

如果它们在更高的温度下饲养，沃尔巴克氏体感染可能会丢失，因此不要使菌落过热。每个种群保持大约 500 只蚊子，以尽量减少近亲繁殖。使用这种方案并给予足够的营养将产生 28 天的世代。

从基质上的鸡蛋开始。将它们浸入装有 3 升水、约 300 毫克鱼食和几粒活性干酵母的托盘中，以诱导孵化。孵化后一天，使用玻璃移液管将大约 500 只幼虫转移到装有 4 升水和新鲜鱼食的托盘中。

每天检查托盘，确保幼虫有足够的食物。每隔一天添加约 600 毫克鱼食，以保持最佳食物供应。过度喂食会导致水浑浊，从而导致死亡，因此请根据需要更换水。

如果营养和温度保持得当，幼虫会在孵化后 5 到 7 天化蛹。成虫将在大约两天后出现。孵化后 7 天，将托盘中的所有内容物倒入细网中。

将一些过滤后的水保留在 5 升容器中，以便在同一菌落中放置卵子。接下来，将网眼倒置，将其浸入装有 200 毫升水的塑料容器中以转移蛹。添加适量的食物来喂养任何剩余的幼虫。

现在，用两杯 10% 蔗糖溶液和两杯湿棉球设置一个成虫出苗笼，以防止干燥。如果不需要按性别对蛹进行分类，请将蛹的容器转移到笼子中，并将盖子稍微半开，以便成虫逃脱并进入笼子。在所有成虫出现后，从笼子中取出容器。

不要通过尽早取出容器来对抗速度缓慢的开发人员。要收集处女蚊子，请每 24 小时将蛹从幼虫饲养盘转移到装有 200 毫升水的塑料容器中。按大小对性别进行排序。

雌性比雄性大。并将它们转移到单独的容器中。保持容器上的盖子关闭，以免成虫逃脱。

在将新出现的成虫放生到笼子里之前，请确认它们的性别。性别不正确的成年人必须在出现后 24 小时内使用抽吸器将其取出，此时它们仍处于性未成熟状态。为了使 Wolbachia 感染的菌落与自然种群相似，将实验室中受感染的雌性与未感染的野生雄性杂交。

将雄性和雌性分别成熟两天。然后将雌性吸入雄性笼子中。理想情况下，建立 1 比 1 的性别比，人口规模约为 500。

继续至少连续三代杂交蚊子。至少在最后一批成虫出现后三天，在它们两周大之前，在雌性过度死亡之前为蜂群提供血液喂养。这对于感染沃尔巴克氏体的蚊子尤其重要，这些蚊子会缩短寿命。

糖杯应在前一天取出。让蚊子接触到前臂，并戴上乳胶手套以保护手和手腕。大多数雌性应在 5 分钟内喂食。

但最多可能需要 15 分钟。一旦所有雌性都明显充血，取下前臂，然后更换糖杯。喂血两天后，将两个装满水的塑料杯放入笼子中，内衬部分浸入的砂纸条。

然后，去除除糖水以外的任何其他水源。从采血后三天开始，雌性会在吃水线上方的砂纸上产卵。每天收集并更换砂纸，直到不再产蛋。

如果需要更多的卵子，可以每周进行一次血液喂养。用纸巾轻轻吸干约 30 秒，将砂纸部分擦干。不要让鸡蛋脱落。

然后，用一张干纸巾包裹条带，并将其放入可密封的塑料袋中。收集后 3 天，在解剖显微镜下检查鸡蛋。如果砂纸太湿，鸡蛋可能会在浸入水中之前孵化。

但如果它干燥得太厉害，鸡蛋可能会塌陷。鸡蛋在收集后三天就可以孵化了。将每个菌落的所有卵浸入同一个盛有水的容器中，为下一代产生大量的个体。

一般来说，鸡蛋可以在湿度大于 80% 的 20 摄氏度的密封容器中储存几个月。但一些沃尔巴克氏体感染会降低生存能力，因此这些卵应在收集后一周内孵化。当幼虫容器每天为每只幼虫提供 0.25 毫克或更少的食物时，两性的发育时间都会增加，并且比提供更多食物的容器中的同步性要低。

如果在整个发育过程中没有提供足够的食物，这将对蜂群维持产生负面影响。可能会选择发育缓慢的个体，并且可能会延迟血液喂养。甚至可能在繁殖前增加成人死亡率。

次优营养影响了成人形态。翅长大幅减少，与营养水平相关。均匀的体型对于实验比较很重要，因为体型与繁殖力呈正相关，大型蚊子在野外条件下应该更健康。

看完这个视频，你应该对如何维护感染沃尔巴克氏体的埃及伊蚊有一个很好的了解。遵循我们的协议应确保生产出质量始终如一的健康蚊子。然后可以将这些蚊子释放到野外用于疾病控制计划或用于实验。

在处理感染沃尔巴克氏体的蚊子时，监测它们的感染状态以确保菌落维持沃尔巴克氏体感染非常重要。