清洁验证在不锈钢表面脏制药行业中的失败

这项工作的总体目标是通过应用小分子、治疗性蛋白质和抗体的分析清洁方法开发的最佳实践，从不锈钢试样表面获得高且可重现的药物残留回收率。这种方法可以帮助回答制药行业清洁验证领域的关键问题，例如为什么制造设备的清洁验证失败。本研究的主要优点是它展示了正确清洁用于分析方法验证的不锈钢试样表面的程序。

要开始此实验，请在计算药物的清洁限度后，制备溶解在所选稀释剂中的药物的样品溶液。用水冲洗并擦拭表面两次 10 到 15 秒，以清洁不锈钢试样。然后，用甲醇重复此冲洗和擦拭步骤，以消除任何残留沉积物。

要使用原位清洁溶液执行高级清洁方法，请将试样浸入高效液相色谱或 HPLC 级水中，并超声处理 2 分钟。将试样浸入 HPLC 级水中的 0.1% 碱性去污剂溶液中，并超声处理 2 分钟。再次将试样浸入 HPLC 水中，然后重复 2 分钟的超声处理。

然后，将它们浸入 HPLC 水中的 0.1% 酸性去污剂溶液中，并超声处理 2 分钟。最后在 HPLC 水中进行 2 分钟的超声处理。接下来，使用双面胶带将不锈钢试样安装在 250 毫升塑料烧杯的底部。

在手术过程中握住烧杯，以方便加标和擦拭并避免事故。使用外置活塞式移液器以所需的浓度和配方在试样表面以旋转模式注入规定的药物体积。试样表面干燥后，将干棉签浸入装有 2 毫升稀释剂的小瓶中。

将棉签压在样品瓶内部以去除多余的溶剂。使用均匀、重叠的左右笔触，用湿棉签的一侧用力擦拭试样表面，直到擦拭 50 平方厘米的总测试区域。使用棉签的同一侧重复擦拭过程。

将试样的四个边缘分别擦拭两次。将优惠券旋转 90 度并使用棉签的另一侧，现在将擦拭方向旋转 90 度。以相同的方式使用棉签的这一侧重复清洁，确保擦拭棉签的所有四个边缘两次。

表面擦拭后，用剪刀将棉签头剪入溶剂瓶中。之后，使用第二根棉签重复整个拭子程序，同时将试样朝之前选择的相同方向旋转 90 度。接下来，对包含两个拭子头的小瓶进行超声处理 5 分钟。

然后，涡旋样品瓶 10 秒钟。最后，将溶液转移到 HPLC 样品瓶中，并将其标记为工作溶液。为了回收样品，将 200 μL 每种试样加标或样品溶液与 1， 800 μL 稀释剂混合，制备对照溶液。

使用这些溶液根据文本方案运行色谱。根据工作溶液和对照溶液峰下的相对面积计算拭子工作溶液的回收率。对三个试样重复此过程，以计算平均回收率和相对标准差。

在清洁试样之前，不同加标水平的回收结果不一致，无论活性药物成分或 API 赋形剂比例如何，分析人员不同，甚至同一分析人员的日期不同。大多数恢复结果具有较高的相对标准差。当调整几个不同的参数时，包括拭子技术、稀释剂、加标溶剂、加标和稀释剂的 pH 值、加标技术和萃取技术，观察到的回收率差异并未消除。

每个试样表面的单个回收率与平均回收率之间的差异表明，不同试样表面的平均回收率不同，因此，观察到的变异性很可能来自试样表面之间的差异。遵循本协议中描述的试样清洁后，回收结果从一个试验到另一个试验是可重复的，试样之间的回收率差异最小。此处进行的试样清洁导致回收率高于 90%此外，每个加标水平的相对标准偏差值是可接受的，并且小于清洁前获得的结果。

一旦掌握，如果执行得当，可以在不到 30 分钟的时间内完成试样的清洁。在尝试此过程时，请务必记住如何在不丢失感兴趣的分析的情况下正确地进行加标和恢复。观看此视频后，您应该对如何正确清洁不锈钢表面以获得高且可重复的残留物回收率有一个很好的了解。

开发后，这项技术为制药行业的研究人员为制造过程提供可靠的清洁数据铺平了道路。