2017年9月15日
持续的关注, 或持续的监测情况的间歇和不可预知的事件, 是一个关键的方面的认知。在这里, 我们详细介绍了如何使用触摸屏操作室来测试老鼠的持续注意力。我们在雄性和雌性老鼠身上表现出相当的性能, 这使得这项任务对研究两性的注意力很有用。
使用触摸屏作室的这项行为任务的总体目标是测量大鼠的持续注意力能力。这种方法可以帮助揭示对适当的持续关注至关重要的神经生物学机制,即随着时间的推移监测间歇性和不可预测的事件。这种技术的主要优点是我们已经将经过充分验证的啮齿动物持续注意力任务适应了触摸屏作室。
一种越来越受欢迎的设备,具有许多认知任务的可编程性。该技术的应用扩展到以注意力中断为特征的神经精神和神经退行性疾病的研究。可以使用此处介绍的方法测试其疗法。
通常,刚接触这种方法的人将努力建立一个系统来确保准确跟踪大鼠并正确记录数据。对于这个实验,必须在声音衰减室内准备触摸屏室。为房间配备室内灯、音调发生器、位于上方的摄像头、触摸屏和带有喂食器奖励区域的颗粒分配器。
喂食器奖励区域可以亮起。在装入 45 毫克奖励颗粒之前,使用面粉筛子甩掉它们上的灰尘。这些灰尘会堵塞喂食器。
如果大鼠配备了头部植入物,请使用大孔径的喂食器。给每个腔室提供黑色丙烯酸面罩,以限制触摸屏上的响应区域。为光刺激留出一个中央圆孔,并在位于中心孔下方留出两个方形响应孔。
使用时,在消声室中作暗室。这样就完成了腔室的准备工作。文本协议描述了如何设置实验的边界。
对于该实验,大鼠可以单独或成组饲养。在开始研究之前,每天处理大鼠 5 分钟,连续 5 天。始终佩戴个人防护装备。
在开始行为塑造前三天开始限制食物。第一天,记录每只大鼠的自由采食体重并计算它们的目标体重,即自由采食体重的 85%。在塑形之前,将大鼠预先暴露在其家笼中的 15 个食物奖励颗粒中。
在最初的食物限制后,调整食物摄入量以保持目标体重,允许体重随着时间的推移略有增加。在开始新的时间表之前,食物会比平时更多地限制大鼠,以增加它们的积极性。在老鼠不执行任务的日子里,将它们的食物至少增加一克,以补偿没有收到颗粒奖励。
每次会议后,至少等待 30 分钟后再提供食物,以避免将测试连续与其喂食时间联系起来。如果老鼠是群养的,请分别喂食它们一个小时,然后再重新分组。准备工作中,启动设备。
确保颗粒分配器装满颗粒,并确保面罩位于触摸屏前面。然后,检查每个框的功能。测试颗粒分配器、屏幕、灯光和音调发生器。
在每天开始时测试腔室的功能至关重要,因为任何一个小故障都会使动物感到困惑,并阻止它们学习任务或以正常水平执行。接下来,查看装箱的计划。密切关注测试组,并输入有关动物 ID、性别、实验条件、用户姓名首字母和其他注释的相关信息。
完成所有准备工作后,检索主题。通常,在黑暗周期中测试大鼠至少 30 分钟。要在黑暗中与老鼠一起工作,请使用头戴式红灯。
在黑暗循环中运输老鼠时,用黑色毛巾盖住它们的笼子。进入行为室后,将大鼠装入适当的盒子中,然后开始持续注意力任务的会话。在持续注意力任务中,训练大鼠区分信号试验和非信号试验。
信号试验包括可变持续时间的闪光,然后是可听见的音调和 4 秒的响应窗口。在这 4 秒内,如果老鼠在屏幕上摆出正确的姿势。在这种情况下,这是正确的响应区域,老鼠会得到一个食物颗粒作为奖励,这被称为命中。
如果老鼠戳到另一个响应区域,则被视为未命中,老鼠不会获得奖励。非信号试验不包括光,老鼠必须戳屏幕的不同部分以表明未检测到信号才能获得奖励。对非信号试验的正确响应称为正确拒绝。
如果老鼠在非信号试验中戳到另一个响应区域,则被视为误报,不会获得奖励。信号和非信号试验的正确反应区域应在受试者之间进行平衡。对于信号和非信号试炼,在响应窗口内未能做出任何响应将被视为 a、无任务且不会获得奖励。
还有一个分散注意力任务的分散注意力版本,在三个试验块中的第二个块中,屋灯闪烁。开始会话后,在最初的几分钟内监测大鼠,以确保一切正常。然后,间歇性地检查它们的性能。
会话完成后,在笔记本中记录摘要数据和任何问题。在试验之间,用 10% 乙醇擦拭每个腔室并更换垫料。运行当天的所有试验后,用 10% 乙醇彻底清洁腔室,确保地板网格尽可能干净。
然后,更换床上用品。每次会话后,最好完全更新电子表格并将其备份到单独的服务器。雄性大鼠达到 SAT 标准的中位数为 54.5 天,雌性大鼠为 62 天,差异无统计学意义。
SAT 任务的绩效测量表明,根据命中率和正确拒绝率的百分比,男性和女性在信号和非信号试验中的准确率相似。有意表现的总体衡量标准,即警惕指数或 VI,也显示出两性之间的相似指标。记录的低百分比遗漏也没有性别差异。
在任务期间,视觉信号在 500、50 和 25 毫秒之间变化,并且性能随着信号的缩短而下降。没有基于性别的主要影响。为了增加注意力需求,在三个试验块中的第二个阶段,在一个大鼠子集中,屋灯被闪过以分散注意力。
不出所料,试用环境有个主要效应。块 2 的性能下降,块 3 恢复。出乎意料的是,女性的表现明显差于男性。
看完这个视频后,你应该对如何使用触摸屏作室测试大鼠的持续注意力有一个很好的了解。在尝试此程序时,重要的是要记住跟踪每只动物的表现并根据需要调整喂食,以确保它们尽快完成任务。不要忘记,在与啮齿动物一起工作时,协议应首先得到 IACUC 的批准,并应始终佩戴个人防护设备。
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本研究概述了一种使用触摸屏操作室测试大鼠持续注意力的方法。该方法允许对雄性和雌性大鼠的性能进行可比较的评估,这对于研究不同性别的注意力机制至关重要。
Touchscreen-based sustained attention tasks in rats provide a translationally relevant platform for interrogating cognitive mechanisms underlying attention deficits seen in neuropsychiatric and neurodegenerative disorders. This method enables robust, quantitative assessment of attentional performance across sexes, supporting early-stage target validation and mechanistic de-risking in CNS drug discovery. Its adaptability and standardization facilitate integration into enterprise-scale preclinical pipelines for cognitive therapeutics.
This touchscreen SAT method positions within the discovery-to-preclinical continuum, bridging hypothesis-driven target validation and quantitative behavioral screening for CNS drug candidates.