慢性压迫性损伤小鼠步态的自动分析

准确评估神经病理性动物模型的疼痛反应, 对于研究疼痛疾病的病理生理学和开发新的镇痛药是至关重要的。我们提出了一个敏感和客观的方法, 以确定的感官功能的啮齿动物后爪的自动步态分析系统。

该程序的总体目标是使用自动步态分析系统分析患有慢性缩窄性损伤的小鼠的机械异常性疼痛。这种方法可以通过测量啮齿动物周围神经损伤后的感觉功能来帮助回答疼痛研究领域的关键问题。这种技术的主要优点是分析系统快速且易于使用，并且还可以自动对各种步态参数进行评分。

在这项研究中，在标准条件下将体重为 20 至 25 克的雄性 ICR 小鼠养育至少一周。根据鼠标的外观和行为选择鼠标。不要使用表现出异常外观或行为的小鼠，例如脱发、疤痕和运动较少。

使用选定的小鼠，从手术前 5 天开始每天收集自动步态数据以进行基线测量。手术前一天，用 1 克细丝在后爪上进行 Von Frey 测试，以获得基线反应。平衡损伤组和假手术组之间的反应。

在每个测试日，将小鼠带到行为测试室，并在测试前将小鼠在自己的家笼中适应至少 30 分钟。手术后每隔一天，使用 Von Frey 测试测量机械性异常性疼痛。将鼠标放入金属网地板上的干净透明亚克力盒子中，让它适应盒子 30 分钟。

接下来，将一克 Von Frey 细丝轻轻涂抹在同侧后爪的足底表面，直到细丝弯曲。重复这种刺激模式 10 次，观察爪子是否退出。在两次刺激之间至少等待 10 秒。

记录提款次数并对其频率进行评分以供分析。每隔一天，还要进行必须在黑暗中进行的步态分析测试。同样，让小鼠在家笼中适应测试室至少 30 分钟。

要设置步态分析设备，请转到软件控件。在设置选项卡下，将走道长度设置为 30 厘米，将最大运行持续时间设置为 5 秒，并将最大运行变化设置为 50%接下来，从程序菜单的设置选项卡中选择已注册的相机，然后从采集选项卡中选择打开采集。在状态消息之后，单击 snap background 按钮以拍摄空人行道的背景照片。

现在将鼠标放在走道上，让它适应设备 10 分钟。小鼠之间应始终用酒精清洗设备。鼠标适应设备后，单击 start acquisition 按钮。

根据鼠标的移动自动开始录制。当鼠标清楚地穿过走道时，程序将自动使用绿色图标对合规的运行进行分类。如果软件无法检测到封装，则红色图标将亮起。

收集至少 5 个合规运行后，从程序菜单的 acquire 选项卡中选择 classify runs 选项。选择应分析的运行，然后单击 Auto classify 按钮。结果将自动保存。

要查看结果，请单击 analyze 菜单中的 view run statistics。采用 Von Frey 检验和自动步态分析评估术后连续 10 天接受 CCI 手术的小鼠。手术后 2 天撤爪频率增加，持续 10 天。

每日注射加巴喷丁可显著降低这种效果。使用步态分析软件，可以比较左右后爪印的大小。通常，面积相同，由 50% 值表示。

CCI 手术对爪印有显着影响，使用加巴喷丁可以显着降低这种影响。步态分析软件还能够捕捉到当鼠标仅用一只后爪负重时，单个站姿持续时间的变化。这是计算出来的，并以百分比变化的形式显示。

该指标显示 CCI 手术和加巴喷丁治疗的效果相同。观看此视频后，您应该对如何作和分析自动步态分析系统有很好的了解，以研究动物模型中神经性疼痛的病理生理学，如慢性缩窄损伤。