Name: 大鼠动物焦虑症的实验研究: 开放臂壁和闭合臂墙透明度对高加迷宫试验的影响 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-29T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: 学习使用高架十字迷宫测量大鼠焦虑行为，探索开放臂壁和闭合臂墙透明度对实验结果的影响。本研究帮助研究人员优化装置设置，提高抗焦虑药物检测的敏感性和数据可靠性。

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作者谨此感谢平野明弘先生在定制设备制作过程中提供的帮助。作者还要感谢高桥浩介先生和中岛真吾先生提供的技术支持。本研究得到了日本厚生劳动省健康与劳动科学科研基金“化学物质风险研究”项目（H25-KAGAKU-IPPANN-003）以及日本明治大学理工学研究所研究项目资助A类的支持。

此处描述的所有实验程序均已获得明治大学机构动物护理与使用委员会（IACUC 14-0002(1)）的批准。代表性结果中所用动物准备如下：雄性Sprague-Dawley大鼠从实验动物公司购得，在行为学实验开始前，每4只一组共同饲养于标准大鼠笼（宽200 × 深410 × 高250 mm）中，适应环境至少一周。&#160;动物饲养室保持标准环境条件：光照（12:12明暗循环，光照开启时间为10:00）、室温（25.0 ± 0.5 °C）、湿度（55 ± 10%）、通风（每小时换气10次），并可自由摄取食物（日本东京Oriental Yeast公司）和饮水。动物饲养于标准大鼠笼（宽410 × 深250 × 高200 mm，日本爱知县Toyoriko公司）中，垫料为纸屑（alpha-dri，日本东京LSG Corporation公司）。
1. 高架十字迷宫实验
<ol>
	<li>在定制容器（W1,500 × D1,500 × H2,000 mm）中设置高架十字迷宫装置（图1A) 在距地面500 mm处设有十字形金属框架，用于支撑跑道臂（图1B），容器顶部的照明装置用于照亮迷宫表面，使其达到所需光照强度（图1C），以及安装在中央天花板上的数码摄像机，用于对行为学实验进行实时视频监测（图1C).</li>
	<li>将臂部（长500 mm × 宽100 mm）固定在十字形框架上，然后将方形中央平台（宽100 mm × 深100 mm）固定在四个臂的中心位置图1D - F). 
	注意：在我们的实验室中，有两种类型的开放臂（L500 × W100 mm）和两种类型的封闭臂（L500 × W100 × H450 mm）图1D）。封闭臂具有透明或不透明的侧壁（图1D），开放臂设计有或没有一个短凸缘（H5 mm， 图1E）。方形中央平台（100 × 100 mm）位于四个臂的中心图1D - F）。因此，可根据实验目的制备以下四种臂的组合：带凸缘的开放臂 + 带透明壁的闭合臂（Ledges/Transparent）、带凸缘的开放臂 + 带不透明壁的闭合臂（Ledges/Opaque）、不带凸缘的开放臂 + 带透明壁的闭合臂（No-Ledges/Transparent），以及不带凸缘的开放臂 + 带不透明壁的闭合臂（No-Ledges/Opaque）。臂跑道的表面为黑色，以便如文中所述，通过自动化行为分析软件更清晰地追踪动物轨迹。&#160;第2节 行为分析</li>
	<li>调节每条臂远端部分及中央平台表面的光照强度至约100 Lux。</li>
	<li>每次测试前，用70%乙醇溶液清洁整个装置，再用蒸馏水擦拭。</li>
	<li>点击 &#34;记录按钮&#34; 启动硬盘录像机以开始记录大鼠行为的数字视频摄像，用于第2节“行为分析”中所述的视频成像分析。</li>
	<li>将动物放置于中央平台，使其朝向一个开放臂，允许其在装置上自由探索5分钟。</li>
	<li>点击 &#34;停止按钮&#34; 在硬盘录像机上完成录制。</li>
	<li>将测试动物送回动物饲养室后，统计排便和排尿次数。</li>
	<li>重复步骤1.4直至实验结束。 
	注意：每次实验开始前，必须先进行一次无动物的预实验，以确保所有实验条件均已正确设置，然后再将实验动物暴露于实验环境中。否则，部分动物（尤其是第一只动物）可能会经历不同的环境条件例如，可能由实验者操作过程中产生的噪音和/或先前测试动物留下的动物线索所引起。 
	注意：实验人员在测试动物时位于容器附近。因此，即使实验人员不在动物的视线范围内，动物仍可能通过气味和/或声音感知到他们的存在。</li>
</ol>
2. 行为学分析
注意：行为学分析通过人工观察和自动化分析软件进行。
<ol>
	<li>人工观察
	<ol>
		<li>将动物放置在平台上后，观察以下指标：进入臂的次数（定义为动物四肢全部进入任一臂的任意一次情况）、在各臂停留的时间，以及面向开放臂伸展探查姿势的次数，同时动物从中央平台向封闭臂后退。</li>
		<li>从容器门关闭开始计时，使用秒表记录上述行为的持续时间及&#160;频率，持续观察5分钟并进行计数。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>自动化分析
	<ol>
		<li>使用现有的软件程序记录以下参数：移动距离、在开放臂不同区域（从中央平台起始的近端、中段和远端区域）停留的时间，以及在开放臂和封闭臂上每分钟的时间分布分析。</li>
		<li>在开始人工观察的同时，点击自动化分析软件的&#34;开始按钮&#34;（若已设定录制时长，录制将在指定时间后自动停止）。 
		注：本研究所使用的动物行为分析软件通过动物与背景区域的对比度进行追踪；软件将动物识别为亮度较高的物体，并赋予其固定大小，通过追踪其中心点的运动实现动物定位。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+Brain%27s+Reward+Circuitry+in+Depression%3A+Transcriptional+Mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms.</a> Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).</li>
<li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+mouse+behavior%3A+interactions+with+laboratory+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).</li>
<li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+%27fear%27-motivated+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).</li>
<li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+open%3Aclosed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li>
<li>Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+illumination%2C+closed+wall+transparency+and%2For+extramaze+space+influence+both+baseline+anxiety+and+response+to+diazepam+in+the+rat+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze.</a> Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).</li>
<li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).</li>
<li>Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vision+and+proprioception+in+the+aversion+of+rats+to+the+open+arms+of+an+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Processes%22%5BJournal%5D)">The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze.</a> Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethopharmacological+analysis+of+behaviour+of+rats+using+variations+of+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze.</a> Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+validation+of+the+elevated+plus+maze+constructed+with+transparent+walls%5BTitle%5D)+AND+%22Braz+J+Med+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls.</a> Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).</li>
<li>Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+elevated+plus-maze+test+with+opaque+or+transparent+walls+in+the+detection+of+mouse+strain+differences+and+the+anxiolytic+effects+of+diazepam%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam.</a> Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).</li>
<li>Fernandes, C., File, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+open+arm+ledges+and+maze+experience+in+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).</li>
<li>Horii, Y., Kawaguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+detection+sensitivity+of+anxiolytic+effects+of+diazepam+by+ledge-free+open+arm+with+opaque+walled+closed+arm+elevated+plus+maze+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats.</a> Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).</li>
<li>Santos, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+effect+of+acute+sibutramine+in+female+rats+in+the+elevated+T-maze+and+elevated+plus-maze+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).</li>
<li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).</li>
<li>Horii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+Hatano+high-avoidance+rats+show+high+avoidance+and+high+anxiety-like+behaviors+as+compared+with+male+low-avoidance+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats.</a> Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).</li>
<li>Walf, A. A., Frye, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).</li>
<li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+investigation+of+anxiety+and+maternal+responsiveness+of+postpartum+female+rats+in+a+pup+elevated+plus+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze.</a> Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).</li>
<li>Albani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior+in+the+elevated+plus+maze+is+differentially+affected+by+testing+conditions+in+rats+under+and+over+three+weeks+of+age%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age.</a> Front Behav Neurosci. 9, 31(2015).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

随着包括焦虑症在内的精神疾病患者数量不断增加，开展前沿研究以加深对焦虑基本机制的理解显得尤为重要。为此，优化实验流程也至关重要。因此，为了改进高架十字迷宫实验的应用，我们利用大鼠展示了迷宫臂特征对实验结果的影响。
高架十字迷宫最初用于检测啮齿类动物的焦虑行为4，尽管其基本结构通常保持一致（例如，距离地面500 mm，呈十字形），但实验中常采用多种不同的臂设计。最初，该装置由无挡板的开放臂和带有木质不透明壁的闭合臂组成。然而，近年来发展出带有挡板的开放臂，以防止动物从装置上跌落，同时也开发出带有透明壁的闭合臂，以便于观察动物在闭合臂内的行为。但目前尚无研究报告探讨这些臂部特征组合对高架十字迷宫实验结果的综合影响。我们的结果表明，开放臂挡板的存在以及闭合臂壁的透明性会减少大鼠对开放臂探索的回避行为（图2），这可能降低地西泮抗焦虑效应的检测敏感性（图3）。在使用Ledges/Transparent装置时，...

患有焦虑症和抑郁症等情绪障碍的患者数量正在增加。尽管这些疾病的发病涉及遗传和环境因素，但其详细的致病机制尚未完全阐明1。因此，研究需要聚焦于揭示情绪障碍的潜在机制，以及开发副作用更少的有效药物。
用于实验动物的行为学测试有助于研究大脑的高级功能，包括情绪。由于动物行为具有高度变异性，即使使用相同的近交品系，不同实验室之间的实验结果也常常存在差异2。因此，研究人员还需了解其所采用实验装置的基本特性，以在实验室中获得可靠且精确的结果。
高架十字迷宫实验最初用于检测啮齿类动物的情绪反应性3,4。整个装置通常位于距地面500 mm的高度，由两个开放臂和两个封闭臂组成，呈十字形。在观察期间，记录动物对各臂的探索情况（包括进入各臂的持续时间和频率）、移动距离，以及伸展探查姿势等特定行为。通过这些指标，可将动物的焦虑水平评估为实验结果。
高架十字迷宫实验在全球范围内被广泛应用，但并非所有实验室都使用相同的设计装置5,6，而这些差异可能影响实验结果。例如，差异包括开放臂是否带有边缘凸起，以及封闭臂使用透明或不透明侧壁5,6。开放臂边缘凸起的设计旨在防止动物从装置上跌落7，而封闭臂采用透明侧壁则便于观察动物在封闭臂内的行为8,9。尽管已有部分研究探讨了单个臂部结构差异对检测动物焦虑能力的影响1,2,5,10,11，但开放臂（带或不带短边缘凸起）与封闭臂（透明或不透明侧壁）结构特征的组合效应对动物行为的影响尚未得到研究。
在最近的一份报告中，我们讨论了不同臂设计组合对大鼠类焦虑行为的影响12。简言之，开放臂带边缘显著增加了大鼠的类焦虑行为，而透明臂壁可能降低了此类行为。此外，我们验证了在无边缘开放臂与不透明壁封闭臂组合中，抗焦虑药物效应的检测敏感性高于带边缘开放臂与透明壁封闭臂组合。在本报告中，我们将介绍高架十字迷宫实验的操作方案，并结合此前报告中的关键结果进行讨论。我们相信，本报告将为已使用或计划在研究中采用高架十字迷宫的研究人员提供有用的信息。

<table><tbody><tr><td>定制容器（宽1500 &amp;times; 深1500 &amp;times; 高2000 mm）</td><td>NA</td><td>NA</td><td>由Akihiro Hirano先生手工制作</td></tr><tr><td>照明装置</td><td>NA</td><td>NA</td><td>由Akihiro Hirano先生手工制作</td></tr><tr><td>高架十字迷宫装置</td><td>NA</td><td>NA</td><td>由Akihiro Hirano先生手工制作</td></tr><tr><td>数字摄像机</td><td>Watec</td><td>WAT-250D2</td><td>任何合适的摄像机均可连接至硬盘录像机，用于记录动物运动轨迹。</td></tr><tr><td>硬盘录像机</td><td>TOSHIBA</td><td>RD-R200</td><td>任何合适的硬盘录像机均可与数字摄像机连接。</td></tr><tr><td>Sprague-Dawley大鼠</td><td>Charles River Laboratories Japan, Inc.</td><td>NA</td><td>可选用任何合适的大鼠用于您的研究</td></tr><tr><td>标准大鼠笼具</td><td>Toyoriko</td><td>TP-105</td><td>可选用任何合适的笼具用于您的研究</td></tr><tr><td>光照强度测量仪</td><td>AS ONE</td><td>1-5818-02</td><td>可选用任何合适的光照强度测量仪器</td></tr><tr><td>EthoVision XT 版本8.0</td><td>Noldus</td><td>NA</td><td>可选用任何合适的动物行为分析软件</td></tr><tr><td>地西泮</td><td>Taiyo Pharmaceutical Industry</td><td>1124402A2061</td><td>可选用任何合适的药物用于您的研究</td></tr><tr><td>吐温80</td><td>Wako Pure Chemical Industries</td><td>9005-65-6</td><td>可选用任何合适的药物用于您的研究</td></tr></tbody></table>

测试大鼠的动物焦虑：高架十字迷宫实验中开放臂边缘和封闭臂壁透明度的影响

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

高架十字迷宫实验是一种用于评估啮齿类动物焦虑行为的行为学测试。尽管该测试在行为科学领域被广泛应用，但不同实验室常常得出相互矛盾的结果。为了找出导致结果差异的原因，我们此前重点关注了各实验室之间存在差异的臂部特征，尤其是开放臂两侧是否存在边缘，以及封闭臂壁的透明或不透明特性。在之前的一项研究中，我们使用自行设计的容器，在其他实验条件完全相同的情况下，比较了大鼠在不同开放臂与封闭臂组合设计中的行为，结果表明臂部特征的差异确实会干扰实验结果。简而言之，开放臂加装边缘会显著增加大鼠的类焦虑行为，而透明臂壁也可能降低此类行为。此外，我们验证了在无边缘开放臂与不透明壁封闭臂的组合下，抗焦虑药物作用的检测敏感性高于有边缘开放臂与透明壁封闭臂的组合。在本报告中，我们介绍高架十字迷宫实验的操作方案，并结合此前研究的关键结果及我们的实验经验进行讨论。我们相信本报告将为已使用或计划在研究中采用高架十字迷宫实验的研究人员提供有益的参考信息。

在之前的研究中，我们比较了开放臂边缘和闭合臂壁透明度对大鼠在迷宫上探索行为的联合影响12。大鼠在无边缘的开放臂上停留的时间显著少于有边缘的开放臂（F[1, 60] = 13.49，P = 0.0005）（图2A）。在进入开放臂的次数方面也观察到类似结果（F[1, 60] = 11.17，P &lt; 0.0014）12，表明边缘的存在可增加大鼠在开放臂上的探索行为。与闭合臂壁为不透明的装置相比，大鼠在闭合臂壁为透明的装置上表现出更少的伸展探查姿势（F[1,60] = 4.03，P = 0.0492）（图2B），提示透明的闭合臂壁可降低大鼠的类焦虑行为。大鼠在闭合臂壁为透明的装置上，其在开放臂远端区域停留的时间长于闭合臂壁为不透明的装置（F[1,60] = 8.00，P = 0.0983）（...

通过高架十字迷宫检测大鼠的焦虑样行为时，结果会因测试环境的不同而表现出高度差异。本文展示了实验装置的设置（尤其是臂的结构）如何影响大鼠在迷宫中的行为，并介绍了一种可靠的研究抗焦虑药物效应的实验方案。本报告将有助于推动焦虑相关研究的发展。

高架十字迷宫实验是一种用于评估啮齿类动物焦虑行为的行为学测试。尽管该测试在行为学领域被广泛应用……

本实验的总体目标是使用合适的高架十字迷宫来测量大鼠的焦虑行为。本研究的主要发现是，抗焦虑药物效应的检测敏感性会因高架十字迷宫装置的不同特征而发生变化。该研究可帮助研究人员根据实验目的在实验室中正确设置迷宫装置，并确保获得高质量的数据记录。演示该实验操作的将是我实验室的一位客座研究人员。首先，在定制的壁橱容器内安装高架十字迷宫装置。迷宫的十字形金属框架应离地面约半米高。在整个迷宫内保持符合要求强度的恒定亮度。在顶部中心位置安装一台数码摄像机，用于记录和监控实验过程。现在将迷宫的臂固定到框架上。开放臂有两种类型，一种两侧带有5毫米凸缘，另一种则没有。封闭臂也有两种类型，其侧壁可以是半透明的，也可以是不透明的。将方形中央平台安装在迷宫臂之间。中央平台和迷宫臂跑道表面为黑色，以便通过自动化行为分析系统更清晰地追踪动物。安装好迷宫臂后，调节光照强度，使每个迷宫臂远端部分表面以及中央平台表面的照度约为100勒克斯（lux）。每次测试前，先用70%乙醇溶液清洁整个装置，然后用蒸馏水擦拭。点击硬盘录像机上的录制按钮，开始从数字摄像机采集图像。如果设备正常工作，则进行测试。将大鼠放置在中央平台，使其朝向一个开放臂，并关闭柜门，开始实验。随后让大鼠在装置中自由探索五分钟。实验结果可能因大鼠初始朝向开放臂或闭合臂而有所不同。首次进入封闭臂时，最好将大鼠放置在封闭臂内，使其保持在开放臂上静止，以防止其出现僵直行为。五分钟后，停止记录以结束实验。随后将大鼠放回其笼中，并在清洁迷宫前统计迷宫内的排便和排尿次数。务必同时采用人工观察和自动化分析软件进行行为学分析。通过视频人工记录大鼠进入迷宫臂的次数。进入的定义为大鼠四肢全部进入迷宫臂的任一时刻。同时记录大鼠在每个臂内停留的时间，以及当大鼠位于中央平台并面向开放臂或退入封闭臂时所表现出的伸展探查姿势的次数。在5分钟测试期间，使用秒表和计数器完成这些测量。如需进行自动化分析，请将视频记录导入商业软件程序中进行处理。该软件通过动物与深色地面之间的对比度来追踪其在迷宫中的位置。首先将动物分配给一个特定大小的对比度斑点，然后将该斑点的中心设为追踪点。接着，在完整的5分钟测试过程中，软件记录动物移动的总距离、在开放臂不同位置所花费的时间，以及在开放臂和闭合臂上停留的总时间。有时自动分析无法区分动物进入臂区与非进入臂区的行为。因此，我们建议在进行自动分析的同时，始终辅以人工观察。大鼠在不同开放臂和封闭臂设计的高架十字迷宫中探索行为的结果显示，与无边缘的开放臂相比，大鼠在带有边缘的开放臂上停留的时间更长。它们在这些臂上的进入次数也更多，因此平台可能增加了大鼠在开放臂上的探索行为。大鼠在带有透明壁的闭臂中表现出的伸展探查姿势显著少于在带有不透明壁的闭臂中，提示透明闭臂壁可降低类似焦虑的行为。当闭臂具有透明壁时，大鼠在开臂远端区段停留的时间比闭臂具有不透明壁时更长。此外，在无边缘且闭臂为不透明的迷宫组合中，大鼠对开臂远端的探索显著低于具有边缘且闭臂为透明的组合。因此，检测的敏感性可能会因所采用臂结构的不同组合而发生变化。为了验证不同类型臂设计在检测灵敏度上的差异，进一步使用抗焦虑药物地西泮进行了实验。简言之，高剂量地西泮处理的效果在无台阶的不透明壁装置中被检测到，但在有台阶的透明壁装置中未被检测到。在进行该操作时，重要的是要确保所有动物均处于相同的实验条件下，并且每次测试开始时，所有动物均朝向相同的开放臂或闭合臂放置。观看本视频后，您应了解如何设置高架十字迷宫装置。需要注意的是，实验结果可能因臂的设计不同而有所差异。因此，我们建议根据您的实验目标选择合适的臂。

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大鼠动物焦虑症的实验研究: 开放臂壁和闭合臂墙透明度对高加迷宫试验的影响

高架十字迷宫实验是测量小鼠焦虑样行为最常用的实验方法之一。本文展示了一段视频，详细演示了该实验的操作流程。...

小鼠高架十字迷宫

十字迷宫用于测量啮齿类动物的类焦虑行为。该装置包含两条相对的封闭臂和两条相对的开放臂，焦虑的啮齿类动物会回避开放臂。中央区域既非完全开放也非完全封闭，因此在此区域停留的时间具有模糊性，难以解释。本文介绍了一种改进的十字迷宫方案，消除了这一中央区域。...

小鼠和大鼠焦虑的连续通道测试

由脑肿瘤放射治疗引起的认知功能障碍是一种临床上难以解决的病症，会严重影响患者的生活质量。要有效评估可能缓解辐射所致认知减退的干预措施，最终依赖于能否对认知功能进行严格的定量评估。...

量化颅脑放射治疗引起认知功能下降

干式巴恩斯迷宫被广泛用于测量动物在轻度厌恶刺激下的空间导航能力。在连续数天的测试中，对照组受试动物的表现（例如 找到逃生笼所需的时间）会逐渐改善，表明其具有正常的學習與記憶能力。大鼠與小鼠之間的差異需要對儀器和方法進行相應調整，本文將詳細介紹這些改動。...

小型与大型啮齿类动物模型的巴恩斯迷宫测试策略

本方案提供了利用旷场迷宫评估实验小鼠模型的一般运动活性、焦虑及情绪行为的方法。...

利用旷场迷宫检测小鼠的运动能力和焦虑样行为

本文介绍了一种用于研究啮齿类动物模型焦虑水平变化的实验方案。在临床前实验室环境中，高架十字迷宫（EPM）实验结合视频追踪软件，可提供一种可靠的方法，用于记录各种潜在抗焦虑治疗手段的效果。...

高架十字迷宫实验结合视频追踪软件研究外源性生酮补充剂的抗焦虑作用

通过光遗传学手段操控特定的神经元群体或脑区，可在自由活动的动物中以高时空分辨率调控其行为。结合不同类型的光遗传学工具与慢性植入的光纤，可实现多种神经调控及行为学检测。...

光遗传学操控神经元活动以调节自由活动小鼠的行为

本文介绍了一种由社会隔离（SI）诱导的焦虑小鼠模型，该模型利用野生型C56BL/6J小鼠，在最少操作干预且无创的情况下诱导应激和类似焦虑的行为。该模型反映了现代社会生活中社会隔离的模式，是研究焦虑及相关疾病的理想模型。...

社会隔离模型：一种非侵入性啮齿类动物应激与焦虑模型

本论文介绍了一组高度可重复的行为学实验，用于验证Angelman综合征小鼠模型。...

Angelman综合征小鼠模型的行为学表征

本方案基于蒙医学理论，阐述了一种用于抑郁症的慢性不可预测性轻度应激（CUMS）模型，并提供了行为学测试的验证方法。...

基于蒙药的 rats 慢性不可预测性轻度应激

学习使用高架十字迷宫测量大鼠焦虑行为，探索开放臂壁和闭合臂墙透明度对实验结果的影响。本研究帮助研究人员优化装置设置，提高抗焦虑药物检测的敏感性和数据可靠性。

测试大鼠的动物焦虑：高架十字迷宫实验中开放臂边缘和封闭臂壁透明度的影响

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