使用实时 PCR 检测血清和血浆中的拷贝数

行业应用价值

在循环游离DNA中检测雄激素受体基因拷贝数增加，可实现对转移性去势抵抗性前列腺癌治疗耐药机制的无创监测。该方法通过微创取样支持对治疗失败的早期识别，并为临床决策提供依据。该技术为液体活检应用中的生物标志物评估提供了快速、可扩展的实验流程。

生物制药研发中的战略应用

早期发现与靶点验证

• 科学价值：能够探究AR基因扩增作为前列腺癌模型中治疗耐药驱动因素的作用。
• 操作价值：利用血清或血浆中的cfDNA，避免在纵向研究中进行侵入性组织取样。

筛选与检测方法开发

• 科学价值：采用RNaseP和AGO1参考基因的双重实时PCR，提供定量的拷贝数检测结果。
• 操作价值：每次检测使用标准化的60 ng DNA输入量，确保不同样本组之间的可重复性。

转化与临床前研究

• 科学价值：cfDNA 中 AR 拷贝数增加与 mCRPC 的进展相关，支持生物标志物的验证工作。
• 操作价值：无创样本采集使得在临床前和临床队列中能够进行频繁监测。

流程与工作流整合

该方法适用于生物标志物发现的连续流程，通过液体活检支持靶点验证，并能够在前列腺癌模型中进行耐药机制的后续筛选。

• 发现生物学： 验证循环游离DNA中雄激素受体基因拷贝数增加可预测晚期前列腺癌治疗耐药性的假设。
• 筛选： 生成适用于检测标准化和化合物效应评估的定量拷贝数数据。
• 分析： 提供相对于参考基因的拷贝数变异比值，用于不同条件间的统计学比较。
• 转化医学研究： 将循环游离DNA生物标志物与去势抵抗性前列腺癌的临床结局相关联。
• 企业级复用： 该工作流程可拓展至前列腺癌以外的其他基因靶点和疾病场景。

运营与企业影响

• 科学价值：对前列腺癌中AR扩增作为耐药生物标志物的机制进行去风险化研究。
• 操作价值：利用常规实时PCR设备，实现快速、低样本投入的实验流程。
• 战略价值：基于无创耐药监测，支持决策是否推进研发（推进/终止决策）。
• 项目组合影响：支持针对AR通路改变的疗法进行风险调整后的优先级排序。

实施注意事项

• 需要具备从低产量样本中提取和定量cfDNA的专业技术。
• 依赖具有多重检测能力的实时PCR仪器。
• 需要在不同实验室之间对参考基因选择和数据分析进行标准化。
• 受限于cfDNA的数量和质量，需优化输入量。
• 建议采用数字PCR等正交方法进行验证，以确认拷贝数增加。

生物制药常见问题