Name: 腹腔葡萄糖耐受试验、肺功能测定和肺固定研究肥胖和代谢障碍对肺部结局的影响 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-15T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: 了解腹腔葡萄糖耐受试验、肺功能测定和肺固定技术，用于研究肥胖和代谢障碍对肺部结构与功能的影响。该方法有助于探索慢性肺病的代谢机制并测试治疗策略。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

本研究得到德国克尔彭的玛尔加与瓦尔特·博尔基金会（Marga and Walter Boll-Stiftung）资助，项目编号210-02-16（MAAA）、210-03-15（MAAA）；德国研究基金会（DFG；AL1632-02；MAAA），波恩，德国；科隆分子医学中心（CMMC；科隆大学医院；职业发展计划；MAAA）以及科隆大学医学院科隆财富基金（Köln Fortune；KD）的支持。

所有动物实验均按照当地政府部门批准的方案（Land NRW，编号：2012.A424）进行，符合德国动物福利法以及关于实验动物或其他科学用途动物福利的相关规定。由于肺功能分析可能影响肺组织结构，从而干扰后续的组织学分析，因此呼吸系统阻力（Res）和动态顺应性（Cdyn）的测定、以及用于组织形态计量学的肺组织制备与固定，应在不同的动物个体中分别进行。然而，在腹腔葡萄糖耐量试验（ipGTT）后进行Res和Cdyn的测定是可行的。由于ipGTT过程中产生的应激可能干扰肺功能检测所需的麻醉效果，建议在ipGTT后设置约2周的恢复期，以使小鼠恢复体重减轻及血液参数的变化12。
1. 腹腔注射葡萄糖耐量试验（ipGTT）的准备工作
注意：禁食 12 小时后，完整的腹腔葡萄糖耐量试验（ipGTT）大约需要 2 小时。
<ol>
	<li>由于应激会显著影响血糖水平，因此必须对小鼠进行适应性处理，并对科研人员进行相关操作培训。</li>
	<li>在安静且无应激的条件下将动物转移至实验区域。</li>
	<li>考虑采用高热量饮食诱导小鼠肥胖。有关进一步建议，请参见讨论部分。</li>
	<li>过夜禁食12小时，但不限制饮水。第二天，在禁食12小时后，按照制造商的说明书准备血糖仪（参见 材料表通过将新的试纸条插入试纸条端口。</li>
	<li>使用无菌剪刀剪取小鼠尾尖，同时轻轻固定小鼠尾部，立即取一滴自由流出的血液（最小样本量0.5 µL）滴加至血糖仪试纸，测定空腹血糖值。 
	注意：在充分加样后，屏幕将开始倒计时。4 秒后，检测结果将显示在屏幕上。</li>
	<li>随后，使用彩色标记对动物进行个体称重并标记。</li>
	<li>按2 g葡萄糖/kg体重给药 通过 腹腔注射。确保注射体积为每10克体重0.1 mL（使用27 G针头和1 cc注射器）。</li>
	<li>随后，分别在15、30、60和120分钟时，将一滴自由流出的血液加至新的试纸上，测定血糖水平。 
	注意：可通过轻柔地向尾尖方向按摩来增加血流量。如果尾部伤口结痂，使用浸有0.9%氯化钠溶液的无菌棉签清洁伤口。</li>
	<li>让动物在测量间隔期间回到各自的饲养笼中休息，并可自由获取饮水。</li>
</ol>
2. 肺功能分析以测量呼吸系统阻力和动态顺应性
注意：为了无干扰地测量 Res 和 cDyn，需要在深度麻醉下对小鼠进行通气。无应激的动物操作和对麻醉状态的适当监测至关重要。有关使用无菌技术的一般操作说明，请参阅 Hoogstraten-Miller et al.15 的文章
<ol>
	<li>每次实验前校准体积描记仪，并在软件中设置研究参数（参见 材料表).</li>
	<li>手术前，将动物深度麻醉 通过 腹腔注射赛拉嗪（10 mg/kg 体重）和氯胺酮（100 mg/kg 体重）（使用27 G针头和1 cc注射器）。确保注射体积为每10 g体重0.1 mL。 
	注意：由于氯胺酮在小鼠中具有良好的镇痛效果，因此无需额外的镇痛处理。侵入性气管插管/体积描记术操作约需5-7分钟，之后即可开始数据采集。</li>
	<li>将小鼠仰卧置于加热垫上，以维持其体温。</li>
	<li>用眼膏涂抹眼睛以防止麻醉期间眼睛干燥。</li>
	<li>通过夹捏脚趾观察反应，持续监测麻醉深度。 
	注意：可能需要追加麻醉剂以维持手术所需的麻醉水平。</li>
	<li>用70%乙醇润湿甲状腺手术区域的毛发。</li>
	<li>使用镊子提起皮肤，在胸骨颈静脉切迹与下颌骨联合突之间沿中线小心切开皮肤约1 cm，于直视下用钝头剪刀剪开皮肤图1A).</li>
	<li>观察皮下脂肪组织和甲状腺 gland。</li>
	<li>在峡部仔细钝性分离两侧甲状腺叶，并解剖胸骨甲状肌和胸骨舌骨肌，以暴露气管（图1B注意避免损伤任何血管而导致出血，因为这可能对心血管系统产生不良影响，进而影响测量结果。</li>
	<li>随后，使用钝头镊子将4-0编织外科缝线穿过气管与食管之间。用显微剪刀在靠近喉部的气管软骨环之间仔细切开气管。</li>
	<li>在可视控制下使用气管插管（直径0.04英寸/1.02毫米）进行插管图1C）。固定试管 通过 使用手术缝线进行结扎，以避免系统发生任何泄漏。</li>
	<li>接下来，将动物移至体腔室的加热床，并将气管插管连接至面罩板图1D）并通过按下控制器前面板上的通风按钮来开启通风图1E).</li>
	<li>通过观察胸廓运动与呼吸频率同步情况来评估通气效果。为确认气管插管位置正确，需确保胸廓两侧同步运动。</li>
	<li>在计算机屏幕上观察压力信号（图1F）。确保通气曲线均匀。若不均匀，需取下动物并检查手术侧，注意是否有血液或黏液阻塞气管插管。 
	注意：对于体重为20-25 g的成年动物，呼吸机设置如图所示 图2 根据制造商的建议进行操作。</li>
	<li>为控制通气过程中跨肺压的变化，将一根食管导管（直径0.04英寸/1.02毫米）插入食管，深度应大致与肺部水平相当。置管时观察屏幕，选择屏幕上显示压力偏转最大且心脏伪影最小的位置放置导管。</li>
	<li>手术后，为动物做好测量准备。重新注射麻醉剂 通过 使用27号针头和1 cc注射器，按100 mg/kg体重剂量进行腹腔注射氯胺酮。确保注射体积为每10 g体重0.1 mL。 
	注意：为评估支气管高反应性，需雾化吸入乙酰甲胆碱（methacholine），该物质为副交感神经系统非选择性毒蕈碱受体激动剂，可诱导支气管收缩。数据采集分为四个不同阶段（图3).</li>
	<li>根据制造商的说明书开始数据采集。 
	注意：该软件会自动引导用户完成采集过程。</li>
	<li>在雾化器中加入10 µL PBS（溶剂），适应5分钟后开始雾化。随后进入3分钟的反应阶段，记录Res（cmH2O/mL/s) 和 cDyn (mL/cmH2O）进行测量。每次雾化结束后，给予动物 3 分钟的恢复期，然后再进行下一次雾化。</li>
	<li>按照软件提示，在呼吸机上逐步应用10 µL体积、浓度递增的乙酰甲胆碱（2.5 µg/10 µL、6.25 µg/10 µL 和 12.5 µg/10 µL）。</li>
	<li>完成所有测量并记录后，通过颈椎脱位法处死动物。</li>
</ol>
3. 成年小鼠肺组织分离用于定量组织形态计量学分析
<ol>
	<li>深度麻醉动物 通过 腹腔注射赛拉嗪（Xylazine，10 mg/kg 体重）和氯胺酮（Ketamine，100 mg/kg 体重）（使用27 G针头和1 cc注射器）。注射体积应为每10 g体重0.1 mL。 
	注意：达到手术耐受状态后，准备工作约需5分钟，随后进行器官灌注和30分钟的固定。</li>
	<li>当动物达到手术耐受状态（脚趾捏压无反应）后，用70%乙醇对动物进行消毒，并用手术胶带将其固定在垫子上。</li>
	<li>通过心脏穿刺放血处死动物。简言之，使用钝头剪刀经皮肤和腹膜作正中切口打开腹腔。</li>
	<li>找到位于肝脏头侧的膈肌，并小心地将肝脏与膈肌分离。</li>
	<li>用钝头剪刀在膈肌上做一个小切口，然后用连接2 mL注射器的20 G针头穿刺心脏左心室，缓慢放血处死动物。 
	注意：缓慢而仔细地放血至关重要，可防止心室因负压而塌陷，从而避免干扰正常的血流。</li>
	<li>通过胸骨旁切口，使用弯头钝头剪刀沿整个肋骨全长轻轻切开胸腔，解剖肺脏。</li>
	<li>随后，抬起肋骨以暴露胸膜腔（图3C). 移除胸腺以暴露心脏和肺。 
	注意：可选的右心室注射，随后用预冷的磷酸盐缓冲液（PBS）灌注肺血管系统，再用固定液灌注例如，可以使用4%（质量/体积）多聚甲醛（PFA）。需注意，该方法可能导致肺泡隔破裂的风险增加，从而对肺组织结构产生不利影响。</li>
	<li>首先小心地移除心脏，然后解剖肺脏。</li>
	<li>随后，使用钝头镊子将4-0编织外科缝线穿过气管与食管之间。</li>
	<li>接下来，在靠近喉部的气管软骨之间小心切开气管，用静脉套管（26 G）进行插管，并在20 cm H₂O的恒定压力下通过压力固定法充气肺脏。2O 使用固定剂例如4%（质量/体积）的PFA</li>
	<li>对于PFA固定，将固定液在室温下作用30分钟。随后结扎气管并移除插管。接着小心切除肺组织，避免损伤，将其置于固定液中于4 °C过夜保存。 
	注意：根据ATS/ETS共识论文，可选用2.5%戊二醛（GA）缓冲的四氧化锇（OsO4）和尿嘧啶溶液进行适当的组织固定。有关进一步的组织制备步骤，请参见Hsia的共识论文。 等14</li>
</ol>

<ol><li>Kelly, T., Yang, W., Chen, C. S., Reynolds, K., He, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+obesity+in+2005+and+projections+to+2030%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Obes+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Global burden of obesity in 2005 and projections to 2030.</a> Int J Obes (Lond). 32, 1431-1437 (2008).</li>
<li>Freemantle, N., Holmes, J., Hockey, A., Kumar, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+strong+is+the+association+between+abdominal+obesity+and+the+incidence+of+type+2+diabetes%3F%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+clinical+practice%22%5BJournal%5D)">How strong is the association between abdominal obesity and the incidence of type 2 diabetes?</a> International journal of clinical practice. 62, 1391-1396 (2008).</li>
<li>Wassink, A. M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Waist+circumference+and+metabolic+risk+factors+have+separate+and+additive+effects+on+the+risk+of+future+Type+2+diabetes+in+patients+with+vascular+diseases.+A+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetic+Medicine%22%5BJournal%5D)">Waist circumference and metabolic risk factors have separate and additive effects on the risk of future Type 2 diabetes in patients with vascular diseases. A cohort study.</a> Diabetic Medicine. 28, 932-940 (2011).</li>
<li>Oktay, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Interaction+of+Cardiorespiratory+Fitness+with+Obesity+and+the+Obesity+Paradox+in+Cardiovascular+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+cardiovascular+diseases%22%5BJournal%5D)">The Interaction of Cardiorespiratory Fitness with Obesity and the Obesity Paradox in Cardiovascular Disease.</a> Progress in cardiovascular diseases. , (2017).</li>
<li>Azamar-Llamas, D., Hernandez-Molina, G., Ramos-Avalos, B., Furuzawa-Carballeda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipokine+Contribution+to+the+Pathogenesis+of+Osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Mediators+Inflamm%22%5BJournal%5D)">Adipokine Contribution to the Pathogenesis of Osteoarthritis.</a> Mediators Inflamm. 2017, 5468023(2017).</li>
<li>Koenig, S. M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11307867">Pulmonary complications of obesity.</a> The American journal of the medical sciences. 321, 249-279 (2001).</li>
<li>Stunkard, A. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8629660">Current views on obesity.</a> The American journal of medicine. 100, 230-236 (1996).</li>
<li>Murugan, A. T., Sharma, G. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19029235">Obesity and respiratory diseases.</a> Chron Respir Dis. 5, 233-242 (2008).</li>
<li>Zammit, C., Liddicoat, H., Moonsie, I., Makker, H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2990395/">Obesity and respiratory diseases.</a> International journal of general medicine. 3, 335-343 (2010).</li>
<li>Ouchi, N., Parker, J. L., Lugus, J. J., Walsh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipokines+in+inflammation+and+metabolic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Adipokines in inflammation and metabolic disease.</a> Nat Rev Immunol. 11, 85-97 (2011).</li>
<li>McArdle, M. A., Finucane, O. M., Connaughton, R. M., McMorrow, A. M., Roche, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+obesity-induced+inflammation+and+insulin+resistance%3A+insights+into+the+emerging+role+of+nutritional+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrinol+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of obesity-induced inflammation and insulin resistance: insights into the emerging role of nutritional strategies.</a> Front Endocrinol (Lausanne). 4, 52(2013).</li>
<li>Ayala, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+operating+procedures+for+describing+and+performing+metabolic+tests+of+glucose+homeostasis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+models+%26+mechanisms%22%5BJournal%5D)">Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice.</a> Disease models & mechanisms. 3, 525-534 (2010).</li>
<li>Bates, J. H., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+lung+function+in+mice%3A+the+phenotyping+uncertainty+principle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Measuring lung function in mice: the phenotyping uncertainty principle.</a> J Appl Physiol. 94 (1985), 1297-1306 (2003).</li>
<li>Hsia, C. C., Hyde, D. M., Ochs, M., Weibel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+official+research+policy+statement+of+the+American+Thoracic+Society%2FEuropean+Respiratory+Society%3A+standards+for+quantitative+assessment+of+lung+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">An official research policy statement of the American Thoracic Society/European Respiratory Society: standards for quantitative assessment of lung structure.</a> Am J Respir Crit Care Med. 181, 394-418 (2010).</li>
<li>Hoogstraten-Miller, S. L., Brown, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+in+aseptic+rodent+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Immunol%22%5BJournal%5D)">Techniques in aseptic rodent surgery.</a> Curr Protoc Immunol. Chapter 1, Unit 1 12 11-11 12-14 (2008).</li>
<li>Heydemann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Overview+of+Murine+High+Fat+Diet+as+a+Model+for+Type+2+Diabetes+Mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+diabetes+research%22%5BJournal%5D)">An Overview of Murine High Fat Diet as a Model for Type 2 Diabetes Mellitus.</a> Journal of diabetes research. 2016, 2902351(2016).</li>
<li>Asha, G. V., Raja Gopal Reddy, M., Mahesh, M., Vajreswari, A., Jeyakumar, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+mice+are+susceptible+to+high+fat+diet-induced+hyperglycaemia+and+display+increased+circulatory+retinol+binding+protein+4+%28RBP4%29+levels+and+its+expression+in+visceral+adipose+depots%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+physiology+and+biochemistry%22%5BJournal%5D)">Male mice are susceptible to high fat diet-induced hyperglycaemia and display increased circulatory retinol binding protein 4 (RBP4) levels and its expression in visceral adipose depots.</a> Archives of physiology and biochemistry. 122, 19-26 (2016).</li>
<li>Jovicic, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Immunometabolic+Phenotype+in+Th1+and+Th2+Dominant+Mouse+Strains+in+Response+to+High-Fat+Feeding%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Differential Immunometabolic Phenotype in Th1 and Th2 Dominant Mouse Strains in Response to High-Fat Feeding.</a> PLoS One. 10, e0134089(2015).</li>
<li>Fontaine, D. A., Davis, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attention+to+Background+Strain+Is+Essential+for+Metabolic+Research%3A+C57BL%2F6+and+the+International+Knockout+Mouse+Consortium%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Attention to Background Strain Is Essential for Metabolic Research: C57BL/6 and the International Knockout Mouse Consortium.</a> Diabetes. 65, 25-33 (2016).</li>
<li>Muniyappa, R., Lee, S., Chen, H., Quon, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+approaches+for+assessing+insulin+sensitivity+and+resistance+in+vivo%3A+advantages%2C+limitations%2C+and+appropriate+usage%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Current approaches for assessing insulin sensitivity and resistance in vivo: advantages, limitations, and appropriate usage.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 294, E15-E26 (2008).</li>
<li>Heijboer, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sixteen+hours+of+fasting+differentially+affects+hepatic+and+muscle+insulin+sensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+lipid+research%22%5BJournal%5D)">Sixteen hours of fasting differentially affects hepatic and muscle insulin sensitivity in mice.</a> Journal of lipid research. 46, 582-588 (2005).</li>
<li>Heikkinen, S., Argmann, C. A., Champy, M. F., Auwerx, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18265403">Evaluation of glucose homeostasis.</a> Current protocols in molecular biology. Chapter 29, Unit 29B.23 (2007).</li>
<li>McGuinness, O. P., Ayala, J. E., Laughlin, M. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+experiment+in+centralized+mouse+phenotyping%3A+the+Vanderbilt+experience+and+recommendations+for+evaluating+glucose+homeostasis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">NIH experiment in centralized mouse phenotyping: the Vanderbilt experience and recommendations for evaluating glucose homeostasis in the mouse.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 297, E849-E855 (2009).</li>
<li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li>
<li>Lodhi, I. J., Semenkovich, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+we+should+put+clothes+on+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Why we should put clothes on mice.</a> Cell Metab. 9, 111-112 (2009).</li>
<li>Swoap, S. J., Gutilla, M. J., Liles, L. C., Smith, R. O., Weinshenker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+full+expression+of+fasting-induced+torpor+requires+beta+3-adrenergic+receptor+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The full expression of fasting-induced torpor requires beta 3-adrenergic receptor signaling.</a> J Neurosci. 26, 241-245 (2006).</li>
<li>Geiser, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+rate+and+body+temperature+reduction+during+hibernation+and+daily+torpor%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Metabolic rate and body temperature reduction during hibernation and daily torpor.</a> Annu Rev Physiol. 66, 239-274 (2004).</li>
<li>Mead, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/13768766">Mechanical properties of lungs.</a> Physiological reviews. 41, 281-330 (1961).</li>
<li>Lundblad, L. K., Irvin, C. G., Adler, A., Bates, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reevaluation+of+the+validity+of+unrestrained+plethysmography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice.</a> J Appl Physiol. 93, 1198-1207 (2002).</li>
<li>Lundblad, L. K., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17906089">Penh is not a measure of airway resistance!</a> Eur Respir J. 30, 805(2007).</li>
<li>Adler, A., Cieslewicz, G., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unrestrained+plethysmography+is+an+unreliable+measure+of+airway+responsiveness+in+BALB%2Fc+and+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Unrestrained plethysmography is an unreliable measure of airway responsiveness in BALB/c and C57BL/6 mice.</a> J Appl Physiol. 97, 286-292 (2004).</li>
<li>Fairchild, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+respiratory+volume+for+virus+retention+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+microbiology%22%5BJournal%5D)">Measurement of respiratory volume for virus retention studies in mice.</a> Applied microbiology. 24, 812-818 (1972).</li>
<li>Brown, R. H., Wagner, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+bronchoprotection+by+anesthetic+induction+agents%3A+propofol+versus+ketamine%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of bronchoprotection by anesthetic induction agents: propofol versus ketamine.</a> Anesthesiology. 90, 822-828 (1999).</li>
<li>Goyal, S., Agrawal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine+in+status+asthmaticus%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+journal+of+critical+care+medicine%3A+peer-reviewed%2C+official+publication+of+Indian+Society+of+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Ketamine in status asthmaticus: A review.</a> Indian journal of critical care medicine: peer-reviewed, official publication of Indian Society of Critical Care Medicine. 17, 154-161 (2013).</li>
<li>Doi, M., Ikeda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airway+irritation+produced+by+volatile+anaesthetics+during+brief+inhalation%3A+comparison+of+halothane%2C+enflurane%2C+isoflurane+and+sevoflurane%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+journal+of+anaesthesia+%3D+Journal+canadien+d%27anesthesie%22%5BJournal%5D)">Airway irritation produced by volatile anaesthetics during brief inhalation: comparison of halothane, enflurane, isoflurane and sevoflurane.</a> Canadian journal of anaesthesia = Journal canadien d'anesthesie. 40, 122-126 (1993).</li>
<li>Braber, S., Verheijden, K. A., Henricks, P. A., Kraneveld, A. D., Folkerts, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+fixation+methods+on+lung+morphology+in+a+murine+model+of+emphysema%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">A comparison of fixation methods on lung morphology in a murine model of emphysema.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 299, L843-L851 (2010).</li>
<li>Weibel, E. R., Limacher, W., Bachofen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+microscopy+of+rapidly+frozen+lungs%3A+evaluation+on+the+basis+of+standard+criteria%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%3A+respiratory%2C+environmental+and+exercise+physiology%22%5BJournal%5D)">Electron microscopy of rapidly frozen lungs: evaluation on the basis of standard criteria.</a> Journal of applied physiology: respiratory, environmental and exercise physiology. 53, 516-527 (1982).</li>
<li>Rolls, G. <a target="_blank" href="http://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/fixation-and-fixatives-1-the-process-of-fixation-and-the-nature-of-fixatives/">Process of Fixation and the Nature of Fixatives</a>. , (2017).</li>
<li>Winsor, L. Tissue processing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWinsor%2C+L+%22Laboratory+histopathology%22">Laboratory histopathology</a>. Woods, A., Ellis, R. , 4.2-1-4.2-39 (1994).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Histochemistry%2C+theoretical+and+applied%22">Histochemistry, theoretical and applied</a>. Pearse, A. , Churchill Livingstone. London. (1980).</li>
<li>Weibel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological+basis+of+alveolar-capillary+gas+exchange%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+reviews%22%5BJournal%5D)">Morphological basis of alveolar-capillary gas exchange.</a> Physiological reviews. 53, 419-495 (1973).</li>
<li>Bur, S., Bachofen, H., Gehr, P., Weibel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+fixation+by+airway+instillation%3A+effects+on+capillary+hematocrit%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+lung+research%22%5BJournal%5D)">Lung fixation by airway instillation: effects on capillary hematocrit.</a> Experimental lung research. 9, 57-66 (1985).</li>
<li>Bachofen, H., Ammann, A., Wangensteen, D., Weibel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion+fixation+of+lungs+for+structure-function+analysis%3A+credits+and+limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%3A+respiratory%2C+environmental+and+exercise+physiology%22%5BJournal%5D)">Perfusion fixation of lungs for structure-function analysis: credits and limitations.</a> Journal of applied physiology: respiratory, environmental and exercise physiology. 53, 528-533 (1982).</li>
<li>Balcombe, J. P., Barnard, N. D., Sandusky, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+routines+cause+animal+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+topics+in+laboratory+animal+science%22%5BJournal%5D)">Laboratory routines cause animal stress.</a> Contemporary topics in laboratory animal science. 43, 42-51 (2004).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本报告提供了三种不同的方法，用于分析肥胖对葡萄糖代谢和肺部结局的影响。首先，葡萄糖耐量试验可用于分析细胞内葡萄糖摄取情况，并可提示是否存在胰岛素抵抗。其次，全身体积描记法是一种测量肺功能的技术，有助于评估新型治疗方法的有效性。第三，标准化的固定方案对于进行定量形态计量分析以评估肥胖对结构改变的影响至关重要。
动物研究中饮食诱导的肥胖
与现有方法及未来应用的相关性：为了模拟导致肥胖的人类饮食习惯，饮食诱导肥胖（DIO）模型在啮齿类动物中被广泛应用。与使用模拟代谢性疾病的基因修饰小鼠相比，DIO模型能够更有效地分析疾病的病因、病理机制以及未来的治疗方案。Heydemann近期的一篇综述 等，概述了糖尿病研究中不同的小鼠高脂饮食模型16特定营养成分的调整为未来研究微量和宏量营养素对肥胖分子机制的影响，以及对肺部结构和功能的影响提供了可能。
修改与故障排除：已有多种研究报告表明，通过改变饮食中营养成分的组成可诱导肥胖<s...

根据世界卫生组织（WHO）2008年的数据，全球有超过14亿名年龄在20岁及以上的成年人超重（体重指数（BMI）≥25）；其中，超过2亿名男性和近3亿名女性为肥胖（BMI≥30）。1肥胖和代谢综合征是多种疾病的首要风险因素。尽管肥胖及其伴随的白色脂肪组织质量增加与2型糖尿病密切相关2,3，心血管疾病，包括冠心病（CHD）、心力衰竭（HF）、心房颤动4 和骨关节炎5，其在呼吸系统疾病发病机制中的功能作用仍不甚清楚。然而，流行病学研究表明，肥胖与多种慢性呼吸系统疾病密切相关，包括劳力性呼吸困难、阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）、肥胖低通气综合征（OHS）、慢性阻塞性肺疾病（COPD）、肺栓塞、吸入性肺炎及支气管哮喘6,7,8,9肥胖与代谢紊乱的潜在关联机制 例如，胰岛素抵抗和2型糖尿病在慢性肺部疾病发病机制中的作用不仅包括体重增加对通气功能的机械性和物理性影响，还会诱发一种慢性的亚急性炎症状态10,11近十年来，肥胖症与肺部疾病的发病率不断上升，加之缺乏有效的预防策略和治疗手段，凸显了深入研究其分子机制的必要性，以期为防治肥胖相关性肺部疾病开辟新的途径。
本文介绍了三种标准检测方法，这些方法是研究肥胖及其对小鼠模型肺结构和功能影响的重要基础：（1）腹腔注射葡萄糖耐量试验（ipGTT）；（2）气道阻力（Res）和呼吸系统顺应性（Cdyn）的测定；（3）肺组织的制备与固定，用于后续定量组织学评估。ipGTT是一种可靠的筛查方法，用于测量葡萄糖摄取情况，从而评估肥胖对代谢的影响。该方法操作简便，易于标准化，因此有利于不同实验室之间结果的比较。更复杂的方法，如高血糖钳夹技术或离体胰岛研究，可用于对代谢表型进行深入分析12。本文通过评估葡萄糖耐量，定义与肥胖相关的全身性及代谢紊乱状态，作为进一步研究肺部结局的基础。为评估肥胖和代谢紊乱对肺功能的影响，我们测定了气道阻力（Res）和呼吸系统顺应性（Cdyn）。为表征肺部疾病，目前已有多种评估肺功能的方法，包括非限制性和限制性测量方式。非限制性体积描记法在自由活动的动物中进行，可模拟自然状态，反映真实的呼吸模式；相比之下，侵入性方法（如在深度麻醉小鼠中通过输入阻抗法测定Res和Cdyn以评估动态肺力学）具有更高的准确性13。由于慢性呼吸系统疾病常表现为肺组织的组织学改变，因此对肺组织进行恰当的固定以供后续分析至关重要。组织固定和制备方法的选择取决于所研究的肺部区域，例如传导气道或肺实质14。本文描述了一种可用于传导气道定性和定量评估的方法，以研究肥胖对哮喘发生发展的影响。

<table><tbody><tr><td>GlucoMen LX</td><td>A.Menarini 诊断公司，意大利佛罗伦萨</td><td>38969</td><td>血糖仪</td></tr><tr><td>GlucoMen LX 传感器</td><td>A.Menarini 诊断公司，意大利佛罗伦萨</td><td>39765</td><td>试纸条</td></tr><tr><td>葡萄糖 20%</td><td>B. Braun，德国梅尔松根</td><td>2356746</td><td></td></tr><tr><td>FinePointe 软件</td><td>DSI, MC s&amp;acute;Hertogenbosch，荷兰</td><td>601-1831-002</td><td></td></tr><tr><td>FinePointe RC 单点小鼠实验台</td><td>DSI, MC s&amp;acute;Hertogenbosch，荷兰</td><td>601-1831-001</td><td></td></tr><tr><td>FPRC 控制器</td><td>DSI, MC s&amp;acute;Hertogenbosch，荷兰</td><td>601-1075-001</td><td></td></tr><tr><td>FPRC 气溶胶模块</td><td>DSI, MC s&amp;acute;Hertogenbosch，荷兰</td><td>601-1106-001</td><td></td></tr><tr><td>Aerogen 雾化头-5.2-4μm</td><td>DSI, MC s&amp;acute;Hertogenbosch，荷兰</td><td>601-2306-001</td><td></td></tr><tr><td>镊子</td><td>FST，加拿大不列颠哥伦比亚省</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>钝头剪刀</td><td>FST，加拿大不列颠哥伦比亚省</td><td>14105-12</td><td></td></tr><tr><td>显微剪刀</td><td>FST，加拿大不列颠哥伦比亚省</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Perma-Hand 4-0</td><td>Ethicon，美国波多黎各</td><td>736H</td><td>外科缝合线</td></tr><tr><td>Roti-Histofix 4%</td><td>Roth</td><td>P087.1</td><td>4% 多聚甲醛</td></tr><tr><td>Ketaset</td><td>Zoetis，德国柏林</td><td>10013389</td><td>氯胺酮</td></tr><tr><td>Rompun 2%</td><td>Bayer，德国勒沃库森</td><td>770081</td><td>赛拉嗪</td></tr></tbody></table>

腹腔内葡萄糖耐量试验、肺功能测定及肺组织固定以研究肥胖与代谢障碍对肺部结局的影响

Intraperitoneal Glucose Tolerance Test, Measurement of Lung Function, and Fixation of the Lung to Study the Impact of Obesity and Impaired Metabolism on Pulmonary Outcomes

肥胖和呼吸系统疾病是重要的健康问题。预计到2030年，全球肥胖个体数量将超过10亿，肥胖正逐渐成为一种新兴的流行病，带来日益加重的社会经济负担。与此同时，与肥胖相关的共病，包括糖尿病以及心脏病和慢性肺部疾病，也持续上升。尽管肥胖已被证实与哮喘加重、呼吸系统症状恶化及控制不佳风险增加相关，但肥胖及其代谢紊乱在慢性肺部疾病发病机制中的功能作用常被低估，其潜在的分子机制仍不明确。本文旨在介绍评估肥胖对代谢以及肺结构和功能影响的方法。本文描述了适用于小鼠研究的三种技术：（1）腹腔葡萄糖耐量试验（ipGTT），用于分析肥胖对葡萄糖代谢的影响；（2）测定气道阻力（Res）和呼吸系统顺应性（Cdyn），以评估肥胖对肺功能的影响；（3）肺组织的制备与固定，用于后续定量组织学分析。与肥胖相关的肺部疾病可能具有多因素病因，源于全身性炎症和代谢失调，可能对肺功能及治疗反应产生不利影响。因此，建立标准化的研究方法以探讨其分子机制及评估新型治疗手段的效果至关重要。

腹腔注射葡萄糖耐量试验（ipGTT）（图4）、肺功能检测（图5）以及苏木精-伊红染色肺组织的代表性图像（图6）的代表性结果。
在高脂饮食（HFD）喂养7周后的肥胖小鼠（蓝色）中进行腹腔注射葡萄糖耐量试验（ipGTT）。以标准饮食喂养的小鼠作为对照组（黑色）。肥胖小鼠在腹腔注射葡萄糖后15分钟和30分钟血清葡萄糖水平升高，表明细胞葡萄糖摄取能力受损（图4）。
为了研究肥胖对肺功能的影响，对高脂饮食（HFD）喂养7周后的肥胖小鼠（蓝色）进行了侵入性肺功能分析。与对照小鼠（黑色）相比，肥胖小鼠的气道阻力...

肥胖的发病率不断上升，并增加慢性肺部疾病的风险。为了阐明其潜在机制并制定预防策略，需要建立明确的动物模型。本文提供了三种方法（葡萄糖耐量试验、体容积描记法和肺组织固定）用于研究肥胖对小鼠肺部功能的影响。

肥胖与呼吸系统疾病是重要的健康问题。肥胖正逐渐成为一种新兴的流行病，预计全球肥胖人数将超过10亿……

以下三种方法的总体目标是研究肥胖和代谢紊乱对肺结构和功能的影响。这些方法有助于回答呼吸系统研究领域中的关键问题，即代谢紊乱对肺结构和肺功能的影响。这些技术的优势在于可以联合使用，以评估代谢在慢性肺部疾病发病机制中的功能作用，并用于测试不同的治疗策略。这些技术的意义不仅限于表型分析，更在于阐明代谢靶点在肺部疾病发病机制中的特定功能作用。这些方法还可用于研究经基因修饰的健康动物以及慢性阻塞性肺疾病（COPD）和哮喘动物模型的结构与功能。通常，初学者在应用这些方法时会遇到困难，因为气管插管、肺部充气以及深度麻醉的实施均需要经验与培训。我们最初产生这些方法的想法，是在发现小鼠以及人类的早发性肥胖与代谢影响及婴幼儿期之后的慢性肺部疾病密切相关之时。为了测量腹腔内葡萄糖耐量，用手指轻轻抓住禁食12小时的成年小鼠尾部，并使用无菌剪刀剪去尾尖。立即将一滴自由流出的血液涂抹至血糖仪的测试试纸上，以测量禁食状态下的血糖水平。四秒后，测试结果将显示在血糖仪屏幕上。每次测量每只动物的血糖后，使用彩色标记物对它们进行单独标记，并称量动物体重。然后，使用连接在1毫升注射器上的27号针头，按照每吨体重100微升的剂量，通过腹腔注射给予每只动物葡萄糖，并在注射后15、30、60和120分钟时，使用新的试纸条测量血糖水平，方法如前所述。为评估肺功能，将成年小鼠仰卧置于垫子上，并在其眼睛上涂抹眼膏。确认小鼠对脚趾夹捏无反应后，用70%乙醇润湿甲状腺区域的毛发，用镊子提起胸骨颈切迹与下颌骨突联合之间中线处的皮肤。使用钝头剪刀，在提起的皮肤上小心地做一厘米长的皮肤切口，以暴露皮下脂肪组织和甲状腺，并在峡部小心钝性分离两侧甲状腺叶，解剖胸骨甲状肌和胸骨舌骨肌，从而暴露气管。使用锐利的镊子，将4-0编织外科缝线穿过气管与食管之间的间隙，用显微剪刀在靠近喉部的气管软骨环之间小心切开气管。插入气管插管，并用外科缝线固定插管，然后将动物转移至体腔内的加热垫上。将气管插管连接至面罩连接板，并开启呼吸机。 通过观察胸廓运动与呼吸频率是否同步，确认气管插管位置正确，并观察计算机屏幕上的压力信号。为控制通气过程中跨肺压力的变化，将食管管插入至肺部水平，同时观察屏幕，以便将导管放置在能够观察到最大压力偏转且心搏伪影最小的位置。根据仪器制造商的说明开始数据采集，并在雾化器上加入10 µL PBS。在适应5分钟后开始雾化，随后进入3分钟的反应期，在此期间测量气道阻力和呼吸系统顺应性。每次雾化后让动物恢复3分钟，再开始下一次雾化，并按照软件说明在呼吸机上逐步递增应用10 µL浓度的乙酰甲胆碱。为进行肺组织的定量组织形态学分析，使用钝头剪刀在成年小鼠膈肌上做一个小切口，并使用弯头钝头剪刀沿整个肋笼长度做胸骨旁切口，轻柔地打开胸腔。抬起肋骨以暴露胸膜腔，并移除胸腺。取出心脏后，使用锐利的镊子分离并暴露气管，将一根4-0编织缝合线从气管与食管之间穿过，随后在靠近喉部的气管软骨环之间小心切开气管。插入26号静脉套管进行插管，并利用固定剂以20厘米水柱的恒定压力进行加压灌注，使肺组织膨胀固定。室温下放置30分钟后，结扎气管并同时移除套管。然后小心地切除肺组织，避免损伤，将肺组织置于新鲜固定剂中，在4°C下保存过夜。与标准饮食喂养的小鼠相比，肥胖小鼠在腹腔注射葡萄糖后15和30分钟表现出血清葡萄糖水平升高，表明其细胞对葡萄糖的摄取能力受损。侵入性肺功能分析显示，与对照组动物相比，喂食高脂饮食的肥胖小鼠在乙酰甲胆碱刺激后气道阻力增加高达1.5倍。经气管灌注后对肺实质切片进行苏木精-伊红染色显示，灌注压力过低的肺组织中存在多个未膨胀区域、增厚的肺泡隔以及多边形肺泡。相反，灌注压力过高则导致肺泡隔破坏的过度膨胀区域。然而，在肺组织固定过程中施加适当的压力，可使肺完全膨胀，肺泡呈圆形。一旦掌握操作技巧，腹腔葡萄糖耐量试验可在两个半小时内完成。肺功能检测可在一小时内完成，而肺膨胀灌注操作可在一小时之内完成。在进行该操作时，需要注意的是，为获得最佳的数据采集效果，建议对小鼠进行适应性处理、对实验人员进行操作培训，并在安静且低应激的环境中开展工作。该技术建立后，为代谢和呼吸系统疾病领域的研究人员探索慢性肺部疾病的发病机制及利用小型动物模型研究潜在治疗策略开辟了道路。观看本视频后，您应能够充分理解如何研究肥胖和代谢紊乱对肺结构与功能的影响。请注意，接触动物或手术器械可能导致受伤或皮肤反应，因此在进行这些操作时，应始终采取预防措施，例如佩戴适当 的个人防护装备。

intraperitoneal-glucose-tolerance-test-measurement-lung-function

Research

科研

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学与感染

腹腔葡萄糖耐受试验、肺功能测定和肺固定研究肥胖和代谢障碍对肺部结局的影响

本视频介绍了如何在实验小鼠上进行口服葡萄糖耐量试验。...

口服葡萄糖耐量试验（OGTT）：小鼠葡萄糖代谢的测定

本实验方案的目的是介绍一种标准方法，用于对非人灵长类动物进行静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT），以评估其血糖控制能力，并判断其从健康到代谢紊乱状态的代谢状况。...

使用静脉葡萄糖耐量试验表征非人灵长类动物的代谢状态

本研究描述了一种利用 18F-FDG 与正电子发射断层扫描/计算机断层扫描（PET/CT）成像结合动力学建模，用于定量分析 体内实时摄取 18F-FDG...

使用18F-FDG 微型PET/CT测定葡萄糖代谢动力学

肺内表面面积（ISA）是评估肺部疾病及损伤诱导的肺泡再生过程中肺形态学与生理学的重要指标。本文介绍了一种标准化方法，可最小化在肺切除术和假体植入小鼠模型中对ISA测量的偏差。...

通过小鼠肺切除术与假体植入测量肺内表面积的标准化方法

本文描述了以高脂饮食喂养小鼠以建立饮食诱导的胰岛素抵抗和肥胖模型的方法，并对其代谢特征进行表征。此外，文中提供了进行口服葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验的详细实验方案，用于监测机体整体葡萄糖代谢的变化。 体内.

研究 体内 高脂饮食喂养小鼠的葡萄糖代谢评估：口服葡萄糖耐量试验（OGTT）与胰岛素耐量试验（ITT）

本方案描述了使用体成分分析仪和代谢动物监测系统来表征小鼠体成分及代谢参数的方法。以高脂饮食诱导的肥胖模型为例，展示了这些技术的应用。...

高脂饮食小鼠的身体成分与代谢笼分析

荧光标记葡萄糖的细胞外耗竭与葡萄糖摄取相关，可用于离体器官和细胞培养中葡萄糖摄取的高通量筛选。...

细胞和组织离体外环境中葡萄糖摄取的间接检测方法：细胞外葡萄糖耗竭法 Ex Vivo

本方案介绍了一种通过在运动期间联合测定一氧化碳弥散量（DL,CO）和一氧化氮弥散量（DL,NO）的单次呼吸法，来评估肺泡-毛细血管储备功能的方法。本文以该技术在运动中应用的假设和建议为基础进行阐述。...

采用单次呼吸法测量人体运动期间双测试气体肺弥散能力

电阻抗断层成像是一种无创、无辐射、可实时监测肺通气的工具。通过测量胸腔内阻抗的变化，能够以逐次呼吸为基础可视化空气分布情况。电阻抗断层成像最初用于通气监测，但也可通过静脉注射生理盐水来测量灌注。...

在重症监护病房中利用电阻抗断层成像监测肺功能

目前的临床诊断中，抗菌药物敏感性检测依赖于病原菌在营养丰富且富氧条件下的浮游生长。本研究采用一种替代性的人工痰液培养基，以模拟囊性纤维化患者肺部更具代表性的富氧及微需氧环境，从而研究铜绿假单胞菌（Pseudomonas...

使用人工痰液培养基在更贴近囊性纤维化肺部环境的条件下测试抗生素对Pseudomonas aeruginosa的疗效

了解腹腔葡萄糖耐受试验、肺功能测定和肺固定技术，用于研究肥胖和代谢障碍对肺部结构与功能的影响。该方法有助于探索慢性肺病的代谢机制并测试治疗策略。

腹腔内葡萄糖耐量试验、肺功能测定及肺组织固定以研究肥胖与代谢障碍对肺部结局的影响

探索更多视频