Name: 味觉考试: 一个简短的验证测试 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-17T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: 学习人类味觉反应测量方法，通过口腔解剖评估、味觉测试和TAS2R38基因型验证，用于生物医学研究和慢性鼻窦炎诊断。该方法可在30分钟内完成，为感官处理研究提供重要见解。

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本研究获得了美国国立卫生研究院（NIH）的资助（NAC 获得 R01DC013588 项目资助，NAC 和 DRR 获得 R21DC013886 项目资助，JED 获得国家耳聋及其他沟通障碍研究所行政研究补充项目资助，以促进临床科学家在化学感官研究领域的成长）。我们所收集的基因型数据使用了部分由 NIH OD018125 项目资金资助购置的设备。

宾夕法尼亚大学机构审查委员会已批准本方案。如果受试者年龄小于18岁或处于妊娠状态，则被排除在外。
1. 口腔检查：疾病评估与乳头识别
<ol>
	<li>指导受试者张开嘴。</li>
	<li>使用笔灯或头灯等光源照亮口腔，检查该区域的七个亚部位（舌、口底、颊黏膜、唇黏膜、牙龈、硬腭和磨牙后三角）。
	<ol>
		<li>观察舌背表面。指导受试者上抬舌头，检查舌腹面及口底，确保将检查范围向后延伸至磨牙区。</li>
		<li>使用压舌板将受试者的面颊牵向外侧，以观察颊黏膜以及上下牙齿两侧周围的侧缘牙龈。</li>
		<li>通过上提上下唇，向前延伸检查范围，以观察唇黏膜表面和前牙龈。</li>
		<li>最后，观察硬腭和磨牙后三角区。</li>
		<li>记录病变、擦伤、肿块或炎症的体征。</li>
		<li>再次要求受试者张开嘴并伸出舌头。</li>
		<li>使用光源观察舌背表面。</li>
		<li>确定荧光蛋白（FP）的存在与否， 例如，光滑的舌面</li>
	</ol>
	</li>
	<li>记录味觉测试前的口腔检查结果。若研究者在临床医疗环境中进行此项味觉测试，发现意外情况时应进一步开展相关检查。</li>
</ol>
2. 心理物理学味觉测试
注意：以下网页也提供心理物理学味觉测试的相关资源和说明：https://osf.io/hn87s/。
<ol>
	<li>味觉刺激物的制备
	<ol>
		<li>按照以下说明配制溶液。使用容量瓶配制每种溶液，以确保浓度精确至 ± 0.0002 M。使用超纯水溶解样品。根据研究目标调整化合物的选择。此处所列化合物仅为一个示例。
		<ol>
			<li>苯甲地那铵（苦味）：通过将 2.228 g 苯甲地那铵溶于 1 L 水中，配制 4.99 × 10-3 M 的苯甲地那铵储备液。取 180 µL 该储备液加入 500 mL 容量瓶中，加水定容至 500 mL，得到终浓度为 1.8 µM 的溶液。</li>
			<li>苯硫脲（PTC，苦味）：将 0.0135 g 苯硫脲（PTC）加入 500 mL 容量瓶中，加水定容至 500 mL。苯硫脲难以溶解，因此在容量瓶中放入搅拌子，并在加热板上将溶液加热至 70 °C，持续搅拌直至溶质完全溶解（约 15 分钟），得到终浓度为 180 µM 的溶液。</li>
			<li>奎宁（苦味）：将 0.011 g 二水合盐酸奎宁加入 500 mL 容量瓶中，加水定容至 500 mL，得到终浓度为 56 µM 的溶液。</li>
			<li>氯化钠（咸味）：将 7.5 g 氯化钠加入 500 mL 容量瓶中，加水定容至 500 mL，得到终浓度为 0.25 M 的溶液。</li>
			<li>蔗糖（甜味）：将 60 g 蔗糖加入 500 mL 容量瓶中，加水定容至 500 mL，得到终浓度为 0.35 M 的溶液。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>将味觉溶液储存于 4 °C。某些常用的味觉化合物对光敏感，研究人员应使用铝箔或其他材料包裹容器，以减少其暴露于光照。</li>
		<li>为识别溶液配制中的常见错误，取一个品尝杯装入旧溶液，另一个装入新溶液，分别品尝以确认两者强度一致。</li>
		<li>将水作为对照溶液，置于第一个位置呈现，以确认受试者理解测试流程。每种味觉刺激物及对照物均呈现两次，注意避免连续呈现同一种刺激物。例如，测试五种不同的味觉刺激物时，问卷中应包含十二个样品（见 2.2）：五种味觉刺激物和水，每种各呈现两次。将 5 mL 水分装至单独的玻璃闪烁瓶中。使用带有数字 1 的深蓝色标签贴于瓶盖上。</li>
		<li>对每种味觉刺激物重复此过程。根据呈现顺序和颜色编码，使用圆形标签标记瓶盖，具体示例如下；确保样品瓶标签与味觉问卷上的标签一致（见 2.2）。 
		水（深蓝色） 
		奎宁（浅蓝色） 
		氯化钠（绿色） 
		苯硫脲（黄色） 
		蔗糖（橙色） 
		苯甲地那铵（红色） 
		氯化钠（深蓝色） 
		苯甲地那铵（浅蓝色） 
		水（绿色） 
		奎宁（黄色） 
		蔗糖（橙色） 
		苯硫脲（红色）</li>
		<li>将样品分装至两个盒子中，样品 1–6 和 7–12 分别放入标记为“盒子 A”和“盒子 B”的容器中（图 1）；也可采用其他分装策略。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="品尝实验装置，包含品尝瓶、指导说明表和评分表。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图1"> 
图1：味觉实验套装。 受试者使用该套装对各种颜色编码的呈味物质的味道强度和品质进行评分。A盒包含样品1–6，B盒包含样品7–12。 <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的放大版本。</a>
<ol start="2">
	<li>味觉问卷
	<ol>
		<li>使用类别量表评估味觉强度，并采用强制选择法确定每种呈味物质的味觉品质来制备味觉问卷（图2）。</li>
		<li>在味觉问卷中，于相应样品旁放置适当颜色和编号的圆形标签（见2.1.6）。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="风味强度图表；感官评价；咸、酸、苦、甜；带标签的标度示意图。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 2"> 
图 2：味觉问卷条目，包含用于强度评级的类别标度和用于呈味物质性质的强制选择回答。 味觉问卷将为每种经过测试的彩色编码呈味物质各包含一个条目。 <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig2large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的放大版本。</a>
<ol start="3">
	<li>味觉测试实施
	<ol>
		<li>为受试者提供A箱、B箱、一瓶水、一个空杯、一支笔，以及包含12个样品条目的纸质味觉问卷。在任何一项研究的整个过程中均使用同一品牌的瓶装水。作为纸质问卷的替代方案，可将问卷内容导入在线调查软件，并通过平板电脑或台式机/笔记本电脑进行施测。示例模板可于 https://osf.io/hn87s/ 获取。</li>
		<li>指导受试者，他们将被要求对刺激的强度和性质进行评分（例如，咸、酸、苦、甜或无味）中的一种。同时告知受试者，他们可能不会感受到所有味觉特性。</li>
		<li>说明测试流程如下：用清水漱口两次，并将漱口水吐入提供的杯子中。将样品1全部倒入嘴中，含在口中5秒钟后，将溶液吐入杯中。请勿咽下或用力漱口。在0到12的强度量表上（从“完全无强度”到“极强”），圈选与样品强度相对应的13条垂直线之一，并选择一个最能描述该样品味道的单一性质。之后，再次用清水漱口两次，再进行下一个样品的测试。</li>
		<li>观察受试者品尝并评价样品1（水）。若评价结果偏离“完全无强度”和“完全无味道”，则需再次说明问卷填写说明，然后再继续测试。</li>
		<li>检查完成的问卷是否完整。</li>
		<li>根据受试者圈出的竖线，在0到12的量表上评定强度评分。对每种呈味物质的两个强度评分取平均值，该数值将用于分析。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 基因型
<ol>
	<li>使用唾液DNA采集试剂盒收集每位受试者的唾液。</li>
	<li>按照制造商说明书从样本中纯化基因组DNA。</li>
	<li>使用SNP基因分型检测方法确定TAS2R38基因型（rs713598, rs1726866, rs10246939）40。</li>
	<li>使用SNP基因分型检测方法确定TAS2R19基因型（rs10772420）36。</li>
</ol>
4. 基因型-表型验证
<ol>
	<li>在以下网页查看来自超过800名受试者的已公开汇总对照数据，这些受试者均进行了 TAS2R38（rs713598、rs1726866、rs10246939）和 TAS2R19（rs10772420）的基因分型：https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/。</li>
	<li>根据受试者的 TAS2R38 基因型，将其对苦味化合物PTC的心理物理学味觉反应与相同基因型个体的正常反应值进行比较。反应结果应一致；但在极少数情况下，TAS2R38 基因型并不能完全预测PTC感官测试结果35。</li>
	<li>若反应结果存在显著偏离，可将该受试者对奎宁的味觉反应与其相同 TAS2R19 基因型个体的正常反应值进行比较。奎宁强度感知与基因型的对应关系应一致36。若所有味觉结果均无法与基因型对应，则可能存在以下情况：(a) 受试者未理解测试任务；(b) 受试者提供了虚假评分或存在伪装症状；或 (c) 研究人员在数据收集过程中出现错误。</li>
	<li>识别数据中的离群值，并可考虑在分析中将其排除（图3）。感官测试结果与客观基因分型的一致性可验证心理物理学测试方法的可靠性。</li>
</ol>

<ol><li>Cowart, B. J., Young, I. M., Feldman, R. S., Lowry, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+disorders+of+smell+and+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Occupational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Clinical disorders of smell and taste.</a> Occupational Medicine. 12 (3), 465-483 (1997).</li>
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<li>Bobowski, N., Reed, D. R., Mennella, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+in+the+TAS2R31+bitter+taste+receptor+gene+relates+to+liking+for+the+nonnutritive+sweetener+Acesulfame-K+among+children+and+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Reports%22%5BJournal%5D)">Variation in the TAS2R31 bitter taste receptor gene relates to liking for the nonnutritive sweetener Acesulfame-K among children and adults.</a> Science Reports. 6, 39135(2016).</li>
<li>Allen, A. L., McGeary, J. E., Knopik, V. S., Hayes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bitterness+of+the+non-nutritive+sweetener+acesulfame+potassium+varies+with+polymorphisms+in+TAS2R9+and+TAS2R31%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">Bitterness of the non-nutritive sweetener acesulfame potassium varies with polymorphisms in TAS2R9 and TAS2R31.</a> Chemical Senses. 38 (5), 379-389 (2013).</li>
<li>Roudnitzky, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic%2C+genetic%2C+and+functional+dissection+of+bitter+taste+responses+to+artificial+sweeteners%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Molecular+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genomic, genetic, and functional dissection of bitter taste responses to artificial sweeteners.</a> Human Molecular Genetics. 20 (17), 3437-3449 (2011).</li>
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<li>Bartoshuk, L. M., et al. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0950329302000770">Labeled scales (e.g., category, Likert, VAS) and invalid across-group comparisons: what we have learned from genetic variation in taste.</a> Food Quality Prefererences. 14 (2), 125-138 (2003).</li>
</ol>

NAC 和 DRR 是一项正在审查中的专利（呼吸道感染的治疗与诊断 61/697,652，WO2013112865）的共同发明人。

该方法的重要意义在于采用了多学科交叉的方法，融合了医学（口腔检查）、实验心理学（味觉测试）和遗传学（验证步骤）的特点。味觉信息有望发展成为一种诊断和预后工具，因为味觉能够反映体内其他部位蛋白质的功能状态。从实验心理学的角度来看，增加一项简单的检查可以识别出不适合进行正常味觉功能研究的受试者。从遗传学的角度来看，这些步骤为研究易于重复的基因型-表型关系提供了简便的方法。
测量人类味觉具有若干关键但无形的特征，这些特征至关重要，包括帮助受试者感到放松并明确任务要求，尤其是在医疗环境中，应尽量缩短操作流程，以避免受试者注意力分散。若受试者表现出不适，应及时干预并解决其疑虑，例如关于测试刺激物性质的问题。当受试者了解到大多数测试刺激物均存在于日常食物中时，通常会感到安心。 例如、盐和糖。该方法虽然简单，但存在显著局限性。尽管口腔检查对于受过医学培训的研究人员而言是常规操作，但对于具有实验心理学或遗传学背景的研究人员来说，可能较难准确识别口腔疾病。另一个局限性在于所采用的评分量表，尽管未经培训的受试者也能轻松理解，但可能掩盖个体之间或群体之间的差异。<sup class="...

人类味觉感知的测量既可以作为医疗保健的一部分，也可以成为生物医学研究的目标，然而与听觉和视觉相比，味觉受到的关注却少得多（表1）。从医学角度来看，当临床医生评估主诉味觉丧失的患者时，大多数情况下实际丧失的是嗅觉1，这导致人们普遍认为味觉丧失是一种罕见且常常不成立的临床主诉。味觉异常（dysgeusia）更为常见，通常由药物的继发效应或外周神经损伤引起2,3，但目前对这两种情况均缺乏有效的治疗方法（除停用相关药物外）。临床医生之所以长期忽视味觉丧失，还因为其本身迄今缺乏明确的诊断或预后价值。然而，尽管味觉测量过去一直未受重视，但随着人们重新认识到味觉可能具有诊断或预后工具的价值，它或许正逐步进入主流医学领域4,5。例如，对苦味的感知能力可以预测免疫功能6，或预测患者服药的依从性7。尽管如此，生物医学研究人员在整体上仍长期忽视味觉研究。这种忽视部分可能源于一个事实：早期对味觉系统理解的进展主要根植于实验心理学8，而医学领域人员对该学科相对陌生。此外，近年来对味觉兴趣的复苏推动了标准化味觉检测方法的发展9，这些方法在早期方法的基础上建立10，虽然全面但耗时较长，不适合临床环境使用。最后，人们对味觉测量的信心不足，也可能是因为受试者需自我报告其主观体验，而对其报告结果的验证迄今为止仍十分缺乏。我们希望，一种简单且易于由研究人员或临床医生实施的测量方法，能够在这两类使用者中逐渐普及。本文介绍了一种包含三个部分的简易味觉检查方案：口腔检查、味觉测试，以及利用先天基因型进行结果验证的步骤。首先，我们将为这些操作提供生物学背景，该背景融合了医学中的基本实践、实验心理学中的感觉测量方法，以及通过基因型和遗传学对反应结果进行验证的手段。
味觉感知始于口腔，因此有效的味觉检查需要包括对明显的口腔疾病、红肿及其他变色情况进行简要的临床评估。口腔包含七个亚部位：舌、牙龈、口底、颊黏膜、唇黏膜、硬腭和磨牙后三角。以往关于人类味觉的研究主要集中在健康受试者或患有明确疾病的人群，但随着味觉检测在医学检查中逐渐成为常规项目，将口腔状况的记录作为检测流程的一部分显得尤为重要。
舌本身是一个被黏膜包裹的肌肉结构；其背侧表面分布着乳头，这些微小的隆起结构赋予了舌独特的质地，并含有味觉感受细胞。我们根据乳头的形状将其分为：菌状乳头、丝状乳头、叶状乳头和轮廓乳头。菌状乳头（FP）位于舌的前外侧，呈圆形，形状类似蘑菇11。研究人员已发表多种可用于量化菌状乳头的有效方法，建议读者参考这些文献以获取测量方案12,13,14,15,16。叶状乳头形似书页（folia），仅分布于舌后部的侧面表面11。轮廓乳头位于舌根部的界沟处，是较大的圆顶状结构，周围被黏膜壁所环绕（拉丁语 circum, &#34;环绕&#34; + vallum, &#34;墙&#34;)11。数量最多的乳头是丝状乳头，其形态细长，不含有味觉感受器。
个体间的舌部解剖结构存在差异。尽管这种解剖变异的来源尚不明确，但部分原因与先天遗传变异有关，有研究者报告，异卵双胞胎在舌部解剖结构上的相似性为31%，而同卵双胞胎则达到60%17。乳头密度在不同个体之间也存在差异，尽管极为罕见，但至少有一种遗传性疾病（家族性自主神经功能异常症）会导致味觉乳头先天性缺失18,19,20。因此，在进行心理物理学测试之前，作为简要评估的一部分，确认轮廓乳头（FP）的存在，并记录舌头的相对大小、颜色以及是否存在口腔疾病的迹象，是十分有益的。
味蕾中含有感受细胞，当受到刺激时可引发味觉。人类能够感知至少五类基本味道：咸、酸、苦、甜和鲜。其中，咸味、甜味和鲜味分别提示食物中存在有价值的成分，如氯化钠、葡萄糖和氨基酸；而苦味和酸味则分别提示可能存在由食物细菌分解产生的毒素和酸性物质，从而引发厌恶反应。21咸味和酸味通过激活某些味觉细胞中的离子通道进行转导，尽管目前对咸味转导机制的理解仍在发展，且可能还涉及I型细胞22,23苦味、甜味和鲜味由II型味觉细胞上的G蛋白偶联受体激活产生，每种受体特异性地响应一种特定味道。三种特定受体亚基组成的异源二聚体负责传导甜味和鲜味，而苦味物质则激活一组共25种不同的苦味受体。24这些苦味受体可对多种苦味化合物产生反应，而单一苦味化合物通常可激活多个受体25尽管最近在味觉分子机制方面的知识不断扩展，但新的通路26 以及超越传统五种味觉特性的新发现（例如钙27 或脂肪酸28 感知）可能就在前方。
味觉受体家族至少有两个令人意外的特点：编码这些受体的基因在不同个体间的DNA序列可能存在显著差异，因而其功能也各不相同；此外，人体多个组织均表达这些基因21,29,30,31。这些口腔外的表达部位包括脑、甲状腺、上呼吸道和下呼吸道以及胃肠道等21,29,30,31。尽管这些部位的味觉受体并不参与传统意义上的味觉感知，但它们可能用于感知局部化学环境29,32。例如，上呼吸道的纤毛上皮表达苦味受体T2R38（Bitter Taste Receptor 38），该受体可响应细菌产生的化学物质，并影响先天免疫反应32，例如增强黏膜纤毛清除能力以及提高抗菌肽和一氧化氮的水平。这一发现对慢性鼻-鼻窦炎具有医学意义，该疾病表现为上呼吸道及鼻旁窦的慢性细菌感染与炎症。
与本文所述味觉检测特别相关的是，由T2R38基因编码的苦味味觉受体， TAS2R38 基因表现出遗传变异性，因而导致味觉敏感性的个体差异。对苦味化合物苯硫脲（PTC）的感知差异最早由化学家 Arthur Fox 描述。33；后来该化合物被确定为T2R38受体的激动剂34个体差异源于DNA序列的 TAS2R38 基因，该基因包含三个单核苷酸多态性位点，每个位点导致氨基酸替换（A49P、A262V 和 I296V；A：丙氨酸，P：脯氨酸，V：缬氨酸，I：异亮氨酸）。由此形成两种常见单倍型：PAV 和 AVI，其中 PAV/PAV 个体对苯硫脲（PTC）高度敏感&#34;尝味者&#34;），AVI/AVI 个体相对不敏感（&#34;非尝味者&#34;，而杂合型AVI/PAV个体的敏感性变异较大35遗传变异影响苦味感知的案例还有很多， 例如，由T2R19基因编码的味道受体T2R19， TAS2R19 基因同样表现出遗传变异性和对苦味化合物奎宁的味觉敏感性差异36同样，变异在 TAS2R31 影响一种高倍甜味剂的感知苦味37,38,39.
本文介绍一种快速评估患者味觉功能的方法，该方法借鉴了临床医学、实验心理学和遗传学中的高效研究方案。

<table><tbody><tr><td>一次性诊断笔式手电筒</td><td>Primacare</td><td>DL-9223</td><td></td></tr><tr><td>UltraLite Pro 头戴式照明灯</td><td>Integra LifeSciences</td><td>AX2100BIF</td><td></td></tr><tr><td>Millipore Q-Gard 2 水纯化系统</td><td>EMB Millipore</td><td>QGARD00D2</td><td></td></tr><tr><td>苯甲地那铵&amp;nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5765</td><td></td></tr><tr><td>苯硫脲</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P7629</td><td></td></tr><tr><td>盐酸奎宁二水合物</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Q1125</td><td></td></tr><tr><td>氯化钠</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S1679</td><td></td></tr><tr><td>蔗糖</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S0389</td><td></td></tr><tr><td>玻璃闪烁小瓶</td><td>Thomas Scientific</td><td>1230L59</td><td>与 Wheaton 目录号 986580 相同</td></tr><tr><td>Oragene Discover OGR-500 DNA 采集试剂盒</td><td>DNA Genotek</td><td>OGR-500</td><td></td></tr><tr><td>prepIT L2P 协议试剂</td><td>DNA Genotek</td><td>PT-L2P-5</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;rs713598 &lt;/em&gt;TaqMan SNP 基因分型检测</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___8876467_10</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;rs1726866 &lt;/em&gt;TaqMan SNP 基因分型检测</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506827_10</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;rs10246939 &lt;/em&gt;TaqMan SNP 基因分型检测</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506826_10</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;rs10772420 &lt;/em&gt;TaqMan SNP 基因分型检测</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___1317426_10</td><td></td></tr></tbody></table>

味觉检测：一种简短且经过验证的测试

Taste Exam: A Brief and Validated Test

味觉在医学和生物医学研究中的日益重要性，以及对其遗传基础的新认识，促使我们从两方面对经典味觉测试方法进行补充。首先，我们阐述如何对口腔（包括舌部）进行简要评估，以确认味蕾的存在，并记录相关疾病的迹象。其次，我们利用遗传学方法，通过比较个体对苦味强度的主观感知报告与其先天味觉受体基因型，来验证味觉测试数据的可靠性。基因型的客观检测结果与味觉体验的主观报告之间若存在不一致，可帮助识别数据采集错误、注意力不集中的受试者，或未能理解或遵循指示的个体。我们期望，快速且可靠的味觉测试能够促使研究人员和临床医生常规开展味觉评估，使味觉检测变得如同听力和视力检查一样普遍。最后，由于人体多种组织均表达味觉受体，味觉反应可能作为身体其他组织敏感性的间接指标，从而既可作为快速的床旁检测手段以辅助诊断，也可作为研究工具用于评估味觉受体蛋白的功能。

已汇总所有受试者（n = 840）的味觉测试结果，并按基因型分组呈现。TAS2R38 和 TAS2R19 基因型以及每种味物质的完整数据集可通过 https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/ 获取。结果证实，按 TAS2R38 受体基因型分组的受试者在苯硫脲（PTC）的味觉感知上存在差异（图3）。不同 TAS2R38 基因型对 PTC 强度的评分存在显著差异（AVI/AVI：0.86；AVI/PAV：6.95；PAV/PAV：8.18；单因素方差分析， p &lt;0.0001）。不同 TAS2R19 基因型对奎宁强度的评分也存在显著差异（A:A：3.77；A:G：3.08；G:G：2.26；单因素方差分析， p &lt;0.0001）。
<p class="jove_c...

本方案用于测量人类的味觉反应，包括简要的解剖学评估、简短的味觉测试，以及利用受试者报告的感觉和味觉受体基因型进行验证的方法。

味觉在医学和生物医学研究中日益凸显的重要性，以及关于其遗传基础的新知识，促使我们对……进行补充

该方法有助于解答医学和感官领域中关于每个人味觉感知的关键问题。此技术的主要优势在于其简洁性以及适用于生物医学研究。该技术的应用意义延伸至慢性鼻-鼻窦炎的诊断与治疗，因为味觉受体属于先天免疫系统的一部分。我将对实验室成员 David 演示该操作流程，Lauren 将负责配制味觉溶液。首先指导受试者张开嘴巴。使用光源照亮口腔内部，并检查该区域的七个亚区位点。此处可清楚观察到舌背部。使用压舌板下压舌头后，可观察到后咽部。随后将舌头向侧方移位，即可暴露左侧磨牙后三角区及左侧颊黏膜。此处可观察到前部牙龈和唇侧黏膜。当受试者的舌头抬起时，舌腹面随之可见，从而便于检查受试者口底区域。然后再次将舌头偏向一侧，以检查右侧磨牙后三角区和右侧颊黏膜。最后观察硬腭和软腭。注意有无病变、擦伤、肿块或炎症迹象。使用光源观察舌背表面，识别菌状乳头的存在与否或舌面是否光滑。最后在进行味觉测试前记录口腔检查的结果。首先使用容量瓶分别配制每种味觉溶液，以确保浓度的精确性。使用超纯水溶解样品。用铝箔包裹对光敏感的溶液，以减少光照暴露。然后将味觉溶液在 4°C 下保存。为了识别溶液配制中的常见错误，取一个品尝杯加入旧溶液，另一个品尝杯加入新溶液。品尝每种溶液，确认两者浓度相同。接着，根据呈现顺序和颜色编码，使用圆形贴纸标记小瓶瓶盖。为使样品瓶标签与味觉问卷上的标签相对应，将样品按相应顺序放入包装载体中。随后准备味觉问卷，使用类别量表评估味道强度，并采用强制选择法确定每种呈味物质的味道品质。最后，在味觉问卷中相应样品旁放置对应颜色和编号的圆形标签。向受试者提供样品盒、一瓶水、一个空杯、笔以及包含12个样品条目的味觉问卷。解释测试流程，并告知受试者他们需要对每种呈味物质的强度和品质进行评分。告知他们可能不会体验到所有特性。测试开始时，要求受试者先用清水漱口两次，并将漱口水吐入提供的杯子中。然后让他们将全部第一份样品倒入嘴中，含在口中五秒钟后，将溶液吐入杯中。告知他们不要漱口或吞咽该溶液。然后指导受试者在与样品强度相对应的13条垂直线中圈选一条，量表范围为0到12。从完全无强度到极强强度。并选择一个单一的品质来描述味道。接下来，要求受试者在进行下一个样品前用清水漱口两次。观察受试者品尝并评价第一份水样。如果评价结果偏离“完全无强度”和“无味道”的标准，应在允许测试继续之前重新说明问卷填写说明。所有样品品尝完毕后，需复查已完成的问卷是否填写完整。最后，根据受试者圈出的垂直线，在0到12的量表上对强度评分进行打分，并对每种呈味物质的两次强度评分取平均值，用于后续分析。味觉测试的结果证实，根据TAS2R38受体基因型分组的受试者之间，对苦味化合物苯硫脲（Phenylthiocarbamide，PTC）存在可感知的味觉差异。三种基因型之间对苯硫脲（PTC）强度的评分存在显著差异。本研究的动机是尝试评估或开发一种

Research

科研

JoVE Journal

Medicine

医学

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