2018年6月6日
Intracavernosal 压力记录 (ICP) 是评价实验动物勃起功能的重要方法。在这里, 通过置管下肢的小弟弟, 然后电刺激大鼠的海绵神经, 证明了比较 ICP 的记录过程的详细协议。
该程序的总体目标是通过对海绵体进行导管插入并记录海绵状神经刺激后的海绵体内压力来测试大鼠的勃起功能。这种方法可以帮助回答男性勃起功能障碍领域的关键问题,例如,用于评估勃起功能障碍的疗法和药物。因此,这种技术的一个优点是它可以更准确地评估勃起功能和反射,即与勃起反应相关的血流动态变化。
这种方法的视觉演示至关重要,因为导管插入术很难学习,因为海绵体白色白膜的小面积使得很难将针头插入阴茎。为了准备手术,制作一对双极电极用于记录海绵体内压力。稍微弯曲电极的末端,并将它们之间的距离调整为 1 到 2 毫米。
然后使用两个鳄鱼夹将电极连接到刺激器。接下来,组装导管系统。首先,使用管子将皮下注射 23 号针头连接到三通旋塞阀。
然后将旋塞阀连接到压力传感器。接下来,将装有肝素盐水的 10 毫升注射器连接到旋塞阀的第三个位置。然后用肝素盐水填充整个系统并检查是否有泄漏。
接下来,将针头抬起 20 厘米,并将记录系统校准为 20 厘米的水。校准后,调整针的高度并检查记录系统的准确性。根据需要,重复校准,直到确认准确性。
接下来,将大鼠从动物设施转移到手术室,让它们适应房间至少 30 分钟。同时,用 70% 乙醇对手术工具进行消毒,并准备必要的手术材料。30 分钟后,准备第一只大鼠进行手术。
用戊巴比妥钠麻醉并等待 5 到 10 分钟。然后捏老鼠的脚趾,检查是否有反射,以确认适当的麻醉。接下来,剃掉腹部和颈部的皮毛,将大鼠仰卧在手术板上。
现在用 10% 聚维酮碘和 70% 乙醇交替擦洗三种磨砂膏擦拭裸露的皮肤。此外,涂抹眼药膏以防止眼睛干燥。然后继续手术。
在隔离海绵状神经之前,根据文本方案对左颈动脉进行导管插入。用一对镊子提起腹部的皮肤和肌肉,开始神经隔离。然后,用剪刀从下腹部到阴茎做一个中线切口。
接下来,轻轻地将肠道移到腹腔的上部。然后用一把镊子抓住膀胱,将其从腹腔中拉出。现在找到位于尿道腹侧的前列腺腹叶。
接下来,通过拉出腹叶、精囊和输精管来暴露前列腺的背叶。现在找到输精管和前列腺的粘附点。然后分离前列腺和输精管之间的空间。
继续小心地暴露位于前列腺和输精管交界点后方的纤维囊。然后找到位于前列腺表面的主要盆腔神经节和海绵状神经。现在用棉签或纸巾小心地擦干海绵状神经区域,然后用双极电极小心地隔离和钩住右海绵状神经。
要继续手术,请用解剖剪刀在阴茎皮肤上切一个小切口,然后小心地剥去阴茎干的皮肤。然后暴露足够的组织以解剖有横纹的肌肉组织。现在找到耻骨的上分支。
然后露出覆盖海绵球的球海绵肌。接下来,使用弯曲的镊子将球海绵肌与坐骨海绵体肌分开。小心地隔离坐骨海绵体肌。
然后切开坐骨海绵体肌肉,露出海绵体的白色白膜。现在进行导管插入术。小心地遵循海绵体的解剖方向,轻轻地将针头穿过白色的白膜插入海绵体。
针头的位置对手术的成功至关重要,因此作为测试,注射少量肝素化盐水。如果针头插入正确,这应该会导致轻微的肿胀。接下来,在不重新定位针头或破坏连接管的情况下,小心地松开针头。
然后检查该区域是否有任何泄漏。如果没有找到,请继续刺激神经并分析数据。所述 ICP 记录试验用于区分患有勃起功能障碍的老年大鼠,以帮助量化潜在治疗或药物对勃起功能的影响。
勃起功能障碍组的典型 ICP 反应曲线远低于对照组的曲线。通常选择最高的 ICP 进行统计分析。在计算 ICP 与平均动脉压的比率后,来自 5 只大鼠的合并数据显示,与对照组相比,老年组的比率显着降低。
除了这两个关键参数外,峰值 ICP、平台 ICP、消肿时间、反应持续时间和曲线下面积在老年大鼠中均显着降低,因此,数据中充满了反映勃起功能的定量测量值。观看此视频后,您应该对如何有效地对动物进行 ICP 记录有很好的了解。不要忘记,在尝试此程序时,重要的是要记住使用肝素,以确保插管保持畅通。
一旦掌握,如果执行得当,这项技术可以在大约两个小时内完成。
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本文介绍了一种用于评估大鼠勃起功能的阴茎海绵体内压(ICP)测量的详细实验方案。该方法包括对阴茎海绵体脚进行插管,并电刺激阴茎海绵体神经。
在啮齿类动物中进行阴茎海绵体压力(ICP)记录可对勃起功能进行定量且具有生理相关性的评估,从而在临床前勃起功能障碍(ED)研究中实现对治疗候选药物的作用机制进行评价。该方法通过提供反映勃起反应机制的动态血流动力学数据,支持靶点验证和先导化合物筛选,减少对替代终点的依赖。将其整合到药物发现工作流程中,可在推进至后期研究之前提高对勃起功能障碍治疗药物去风险化的预测可信度。
ICP记录贯穿于从靶点验证到先导化合物发现,再到临床前药效测试的整个发现过程,通过提供血液动力学表型信息,为急诊治疗药物开发中的决策提供依据。