Streamlined 3D Cerebellar Differentiation Protocol with Optional 2D Modification

Dwayne B. Holmes; Vivi M. Heine

doi:10.3791/56888

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Streamlined 3D Cerebellar Differentiation Protocol with Optional 2D Modification

简化的3D 小脑鉴别协议, 可选2D 修改

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10:15 min

December 9, 2017

DOI: 10.3791/56888-v

Dwayne B. Holmes¹, Vivi M. Heine^1,2

¹Department of Pediatrics/Child Neurology, Amsterdam Neuroscience,VU University Medical Center, ²Department of Complex Trait Genetics, Center for Neurogenomics and Cognitive Research, Amsterdam Neuroscience,Vrije Universiteit Amsterdam

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

我们描述了一个简化的 hPSCs 3D 差异化协议, 使用定义的培养基和减少生长因子, 能够产生早期的上皮结构和积极的小脑相关标记的细胞集料, 以及一个可选2D. 将细胞分化为单层, 产生功能性神经元。

Transcript

这些分化培养物的总体目标是在 2D 或 3D 环境中生成小脑细胞谱系。这些方法可以帮助回答有关使用患者来源的干细胞进行儿童脑部疾病的新发展或疾病机制的基本问题。这种技术的主要优点是它启动和维护简单，因素少，可以用作测试更复杂的神经协议的基础。演示该程序的是我实验室的技术人员 Lisa。为了建立分化，使用改进的方法 G 通过 hPSC 的方法将所需体积的神经维持培养基转移到无菌管中，并补充 4 纳克/毫升 FGF2 和 10 微摩尔岩石抑制剂。然后，将培养基管保持在室温下或置于 37 的水浴中