Name: 应用高分辨率超声监测基因工程胰腺癌的肿瘤发病和生长 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: 学习使用高分辨率超声技术检测Kras、p53、Pdx-Cre基因工程小鼠模型中的内源性胰腺肿瘤。该方法可在2至6月龄小鼠中实现肿瘤发病监测与生长评估，为胰腺癌研究提供可靠的影像学手段。

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本研究由德国癌症援助组织（Deutsche Krebshilfe，AN 项目编号：110972）、德国消化与代谢疾病学会（DGVS）博士论文奖学金（授予 SMB）以及埃尔泽·克勒纳-弗雷泽尼乌斯基金会（Else-Kröner-Fresenius-Foundation）奖学金（授予 RGG）在哥廷根大学医学中心资助。我们感谢 Jutta Blumberg 和 Ulrike Wegner 提供出色的技术支持。同时感谢哥廷根大学医学中心动物实验中心所有动物技术人员在小鼠饲养方面提供的帮助。所有实验均依照德国动物福利法规进行。

本方案符合德国哥廷根大学医学中心的动物护理指南（33.9-42502-04-15/2056）。根据各机构动物伦理审查委员会的具体要求，本方案的部分步骤可相应调整。
1. KPC 小鼠的腹部触诊
<ol>
	<li>为避免不必要的超声检查，应触诊小鼠腹部，以识别可能具有腹腔内病变的小鼠，这些小鼠随后应接受腹部超声检查。
	<ol>
		<li>在KPC小鼠模型中，从8周龄开始每周进行一次腹部触诊。高分辨率超声也可应用于移植性肿瘤模型（例如，原位移植模型）或其他基因工程小鼠模型。 
		注意：根据肿瘤动力学和研究目的（预防性研究、治疗干预研究），可在肿瘤触诊不可及时，通过超声检测非常小的肿瘤（1–2 mm），以监测肿瘤的发生。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将小鼠放置于笼具网格上，用非固定手的拇指和食指轻轻提起小鼠尾巴，并用该手的拇指和食指上下轻柔地触诊腹部（图1）。</li>
	<li>若小鼠耐受轻柔触诊，可逐步缓慢增加压力。在腹部上部和下部，较大的阻力容易被察觉。有时，坚硬的粪便可能被误判为肿瘤组织。</li>
</ol>
2. 工作区域的准备
<ol>
	<li>至少为三个不同的工作区域提供空间：扫描前准备区、扫描台和恢复笼。所需材料如图2所示。</li>
	<li>清洁主工作板（例如使用70%乙醇），并在扫描前开启加热平台（图3）。确保在转移第一只小鼠之前，平台温度已达到目标温度38–40 °C。</li>
	<li>启动超声设备，并为采集的数据创建一个新文件夹（图4）。腹部成像采用B模式设置。此外，确保腹部探头已插入设备的激活端口。使用探头固定装置将探头头部固定在工作台上方。</li>
	<li>在加热板或加热垫上（或使用加热灯）准备一个恢复笼，以确保扫描后小鼠的体温调节和快速恢复。在笼底铺一层薄薄的纸巾作为垫料，以避免小鼠吸入 bedding 材料而导致窒息风险（图5）。</li>
</ol>
3. 吸入麻醉
<ol>
	<li>将小鼠放入诱导室中。打开载气流量阀（1 L/min 氧气或空气），并将异氟烷浓度设定为4%，使诱导室内的麻醉气体浓度缓慢升高。确保配备适当的异氟烷废气清除装置（被动或主动过滤系统）。约2–4分钟后，小鼠通常会进入深度镇静状态。
	<ol>
		<li>通过工作台上的鼻罩持续给予 2% 异氟烷以维持麻醉状态。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将动物从诱导室小心转移至工作台。检查鼻罩是否有持续的气体流。将小鼠的鼻部放入麻醉管线出口的鼻罩中。初始扫描时通常采用仰卧位。也可将小鼠置于右侧或左侧卧位，以改善胰腺头部或尾部肿瘤的可视性。图6).</li>
	<li>尽管腹部超声检查并不疼痛 本身进行足部夹捏测试，以评估小鼠是否处于无痛状态及深度麻醉状态。若小鼠仍有活动或主动移动，应将其重新放回诱导室中，进行重复且延长的麻醉诱导。</li>
	<li>使用眼用保护性软膏，以防止因体液流失导致的角膜损伤。</li>
	<li>麻醉期间应使用监测系统。然而，心电图和直肠温度监测在腹部超声扫描中并不常规使用。重要的是，小鼠在麻醉状态下会丧失体温调节能力。因此，需密切观察低体温或呼吸窘迫的临床体征，例如喘息或呼吸暂停。一旦出现明显症状，应立即停止异氟烷暴露，并将小鼠放入恢复笼中。</li>
</ol>
4. 超声检查&#160;设置
<ol>
	<li>按照制造商的说明开启超声系统。确保主设置为通用成像模式，并激活腹部成像程序包。通常采用B模式成像作为数据采集的标准方法。</li>
	<li>通过以下参数获得优化的图像质量：频率40 MHz，2D增益25–30 dB，成像深度10 mm，成像宽度10 mm，设置3个焦点区域，中心位置位于3–6 mm之间。</li>
</ol>
5. 小鼠准备
<ol>
	<li>使用胶带固定上肢和下肢。固定时需尽可能小心，避免因固定造成动物受伤（图7）。</li>
	<li>使用电动宠物剃毛器去除腹部所有毛发。由于毛发质地较硬，应从下腹部开始向上至肋骨区域进行剃除。操作时注意剑突（processus xiphoideus）部位，避免该区域皮肤损伤。 
	注意：小鼠毛发会反射超声波，降低成像清晰度。</li>
	<li>使用脱毛膏进行优化的皮肤准备并彻底清除残留毛发。用棉签在已剃毛的腹部涂抹一层薄薄的脱毛膏（图8）。根据所用脱毛膏说明，等待30秒或更长时间后，先用干纸巾擦去脱毛膏，再用大量清水冲洗，彻底清除所有残留物（图9、图10、图11）。脱毛膏残留可能在超声检查后引起皮肤和黏膜刺激，从而影响动物健康。</li>
	<li>为确保良好的扫描条件，应在腹部涂抹足量的超声耦合剂（图12）。通常使用预温的超声耦合剂，以尽量减少小鼠体温过低的风险。</li>
	<li>手动在探头表面涂抹一层薄薄的超声耦合剂。可通过触碰探头上的凹槽进行测试，若探头位置正确，在屏幕左上方将可见到信号显示。</li>
</ol>
6. 腹部超声检查
<ol>
	<li>将换能器用适当压力固定在腹部。对小鼠腹部施加过重的压迫可能导致呼吸或循环功能受损，应予以避免。</li>
	<li>上下扫描，调节工作平台的框架以及X轴和Y轴方向的轮子。</li>
	<li>首先识别双侧肾脏。通常它们在下腹部呈现为高回声的均质结构。可轻易找到与之相连的vena renalis（肾静脉），其进一步延续为vena cava inferior（下腔静脉）（图13）。</li>
	<li>以vena lienalis（脾静脉）作为胰腺的定位标志血管。尝试区分vena renalis（肾静脉）与vena lienalis（脾静脉）。一旦识别出vena lienalis（脾静脉），即可精确定位胰腺。正常的胰腺更像是一层在腹腔内延展的薄膜，而非一个实体结构（图14 和 图15）。</li>
</ol>
7. 胰腺肿瘤检测与体积评估
<ol>
	<li>从所有周围结构中识别胰腺病灶。病灶通常表现为低回声、不均质的圆形或长条状组织团块（图16）。肿瘤通常质地较硬，探头难以将其压缩。需注意，有时可能难以清晰区分肿瘤与小肠袢，应仔细观察是否存在肠蠕动，胰腺肿瘤中不应出现肠蠕动现象。</li>
	<li>发现肿瘤后，上下扫查以了解其总体大小，并使用超声卡尺测量最大直径。当获得合适图像时，冻结画面并使用测量工具精确确定肿瘤尺寸。注意，在后续分析中，明确肿瘤位于胰腺尾部、体部还是头部非常重要。</li>
	<li>在返回实时模式前，务必保存图像以记录操作过程。注意，冻结图像时可能无意中松开调节轮，导致超声探头对小鼠腹部施加更大压力。因此，在切换至冻结模式前，应先固定好压力调节状态。</li>
	<li>完成第一平面测量后，可将探头在纵切面上旋转90°（图17），或翻转小鼠至侧卧位，以观察肿瘤的纵向扩展情况。部分肿瘤可能需要调整小鼠体位以获得足够可视性。对于胰腺尾部肿瘤，可将小鼠置于右侧卧位（图10 和 图19）；对于胰腺头部肿瘤，则置于左侧卧位（图11 和 图20）。</li>
</ol>
8. 肿瘤体积的定量
注意：所有工作的主要目标之一是准确测定肿瘤体积。尽管存在多种技术，哥廷根大学医学中心更倾向于采用包含椭球体公式的计算方法。
<ol>
	<li>利用先前获得的全部三个直径，计算相应肿瘤的近似体积（图 21）。</li>
	<li>或者，使用扫描头的电机系统对肿瘤区域进行自动扫描，并随后进行体积计算和三维重建。</li>
</ol>
9. 恢复
<ol>
	<li>扫描完成后，小心移除所有胶带，并用干燥的纸巾小心擦去所有超声耦合剂。</li>
	<li>小心将小鼠转移至恢复笼中（图21）。避免有任何覆盖物遮住小鼠面部，以免引起呼吸障碍。恢复时应优先采用侧卧位。</li>
</ol>

<ol><li>Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+in+oncology+research+and+cancer+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine.</a> EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).</li>
<li>Olive, K. P., Politi, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOlive%2C+KP+%22Translational+therapeutics+in+genetically+engineered+mouse+models+of+cancer%22">Translational therapeutics in genetically engineered mouse models of cancer</a>. (2), Cold Spring Harbor. 131-143 (2014).</li>
<li>Westphalen, C. B., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22The+Cancer+Journal%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models of pancreatic cancer.</a> The Cancer Journal. 18 (6), 502-510 (2012).</li>
<li>Hingorani, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trp53R172H+and+KrasG12D+cooperate+to+promote+chromosomal+instability+and+widely+metastatic+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Trp53R172H and KrasG12D cooperate to promote chromosomal instability and widely metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma in mice.</a> Cancer Cell. 7 (5), 469-483 (2005).</li>
<li>Frese, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((nab-Paclitaxel+potentiates+gemcitabine+activity+by+reducing+cytidine+deaminase+levels+in+a+mouse+model+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">nab-Paclitaxel potentiates gemcitabine activity by reducing cytidine deaminase levels in a mouse model of pancreatic cancer.</a> Cancer Discovery. 2 (3), 260-269 (2012).</li>
<li>Paredes, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+method+of+quantifying+pancreatic+volume+in+mice+using+micro-MRI%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A non-invasive method of quantifying pancreatic volume in mice using micro-MRI.</a> PLoS One. 9 (3), e92263(2014).</li>
<li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li>
<li>Aung, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunotargeting+of+Integrin+alpha6beta4+for+Single-Photon+Emission+Computed+Tomography+and+Near-Infrared+Fluorescence+Imaging+in+a+Pancreatic+Cancer+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Immunotargeting of Integrin alpha6beta4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model.</a> Molecular Imaging. 15, (2016).</li>
<li>Akladios, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+microCT+structural+imaging+to+preclinical+evaluation+of+hepatocellular+carcinoma+chemotherapeutics+on+orthotopic+graft+in+ACI+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+du+Cancer%22%5BJournal%5D)">Contribution of microCT structural imaging to preclinical evaluation of hepatocellular carcinoma chemotherapeutics on orthotopic graft in ACI rats.</a> Bulletin du Cancer. 98 (2), 120-132 (2011).</li>
<li>Neesse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CTGF+antagonism+with+mAb+FG-3019+enhances+chemotherapy+response+without+increasing+drug+delivery+in+murine+ductal+pancreas+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Science+USA%22%5BJournal%5D)">CTGF antagonism with mAb FG-3019 enhances chemotherapy response without increasing drug delivery in murine ductal pancreas cancer.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 110 (30), 12325-12330 (2013).</li>
<li>Sastra, S. A., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+murine+pancreatic+tumors+by+high-resolution+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Quantification of murine pancreatic tumors by high-resolution ultrasound.</a> Methods in Molecular Biology. 980, 249-266 (2013).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本方案提供了利用高分辨率腹部超声成像在基因工程小鼠模型中定量胰腺肿瘤的详细描述。近期，Sastra 等 发表了关于在小鼠模型中定量胰腺肿瘤的详细方法，但未提供有关准备和操作步骤的可视化指导，而这些步骤是后续所有操作的前提条件11。本文的总体目标是为小鼠高分辨率超声成像提供一套全面的可视化操作指南。
尽管我们的描述主要集中在基因工程小鼠的内源性胰腺肿瘤上，但该方法也可用于原位移植模型。对于原位模型，即使是非常小的肿瘤（直径达1-2 mm）也可通过腹部检测来评估成瘤率和肿瘤发生。由于腹部触诊具有主观性且难以重复，在KPC模型中，超声筛查也可不依赖前期触诊直接用于检测非常小的胰腺肿瘤的出现。此外，腹部结构（例如充满空气的小肠袢）可能会产生重叠干扰。在此情况下，调整动物在操作台上的体位可能有助于观察。大多数肿瘤可在仰卧位下显示；然而，某些肿瘤可能仅在小鼠左侧卧位（胰头肿瘤）或右侧卧位（胰尾肿瘤）时才能被检测到。因此，对小鼠进行恰当的体位摆放对于提高观察效率和可见性至关重要。
<p class="jove_conten...

由于基因工程小鼠模型能够高度模拟人类癌症发生的复杂特性，其在癌症研究中的重要性日益增加1,2,3。其中，研究胰腺癌发生、进展及治疗反应最常用的模型之一，是携带Kras癌基因激活突变并同时失活肿瘤抑制基因p53的模型4。这种LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre（KPC）小鼠模型可模拟从胰腺上皮内瘤变（PanIN）前体病变到侵袭性癌的逐步进展过程。表型上，几乎所有小鼠在出生后六个月内都会发展为胰腺导管腺癌（PDAC）。然而，与移植模型相比，KPC模型的肿瘤发生时间差异较大，可从8周到数月不等4。一旦胰腺肿瘤达到一定大小（直径5–9 mm），肿瘤生长将迅速加快，小鼠即需纳入临床前试验5。因此，精确检测肿瘤发生时间和肿瘤大小，是临床前研究管理与治疗监测的基本前提。通常，可采用多种方法进行肿瘤筛查和治疗评估，如磁共振成像（MRI）6、计算机断层扫描7,8,9或高分辨率超声成像10。每种技术均有其优缺点。尽管MRI或计算机断层扫描（CT）成像可实现高分辨率数据采集和精确的体积计算，但其需要在全身麻醉下进行较长时间的检查，设备成本高昂，且难以在长时间内频繁重复扫描。相比之下，小动物超声成像是一种成熟的技术，可用于小鼠腹部病变的筛查11。该成像方法的优点包括扫描时间短、分辨率高，并可结合多普勒超声或对比增强超声（CEUS）同步观察器官灌注情况。然而，准确解读图像需要具备解剖学知识、三维空间想象力以及充分的实践训练。
在下文中，提供了在KPC模型中使用高分辨率超声成像的详细实验方案。此外，文中展示了标准的超声图像，并对器官结构进行标注，以帮助研究人员进行定位识别。

<table><tbody><tr><td>Visual Sonics Vevo2100 高分辨率超声系统，包括成像台和麻醉管线</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, 加拿大</td><td>VS-11945</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 2100 MicroScan 探头 MS-550-D（22–55 MHz）</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, 加拿大</td><td>VS-11874</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 麻醉系统（带新鲜气体和废气入口的麻醉诱导舱）</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, 加拿大</td><td>SA-12055</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 成像工作站（带供气鼻罩的工作台）</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, 加拿大</td><td>SA-11982</td><td></td></tr><tr><td>&amp;nbsp;电子宠物剃毛器</td><td>Panasonic Marketing Europe, 德国</td><td>5025232484324</td><td>Panasonic ER-PA10-s</td></tr><tr><td>Labotect 加热板</td><td>Labor tech G&amp;ouml;ttingen, 德国</td><td>13854</td><td></td></tr><tr><td>眼膏（眼科用软膏）</td><td>Sch&amp;uuml;lke&amp;Mayr, 德国</td><td>9080249</td><td></td></tr><tr><td>兽用异氟烷</td><td>Abbvie, 德国</td><td>4831867</td><td></td></tr><tr><td>脱毛膏</td><td>RB healthcare UK, 英国</td><td>8218535</td><td></td></tr><tr><td>70% 乙醇（v/v）水溶液</td><td>TH. Geyer, 德国</td><td>22941000</td><td></td></tr><tr><td>超声耦合剂</td><td>Asmuth, 德国</td><td>13477</td><td></td></tr><tr><td>擦拭纸巾</td><td>Kimberly-Clark Germany, 德国</td><td>7558</td><td></td></tr><tr><td>棉签</td><td>Meditrade, 德国</td><td>75481116</td><td></td></tr><tr><td>盛放超声耦合剂的玻璃碗</td><td>ARC 法国, 法国</td><td>H1149</td><td></td></tr><tr><td>盛水碗</td><td>W &amp; P Trading Co., 美国</td><td>B00K2P6PLQ</td><td></td></tr><tr><td>纱布海绵</td><td>Fuhrmann, 德国</td><td>960504</td><td></td></tr></tbody></table>

利用高分辨率超声监测基因工程胰腺癌模型中的肿瘤发生与生长

Utilizing High Resolution Ultrasound to Monitor Tumor Onset and Growth in Genetically Engineered Pancreatic Cancer Models

LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre（KPC）小鼠模型是评估胰腺癌新疗法的一种已建立且常用转基因模型。在KPC模型中，肿瘤发生时间存在差异，可在8周至数月之间。因此，需要采用无创影像学工具来筛查肿瘤的发生并监测对治疗的反应。近年来，针对这一问题已发展出多种方法。高分辨率超声具有诸多优势，如无创性、检查时间短、图像分辨率高且无辐射暴露。然而，小鼠超声检查并非易事，成功实施临床前胰腺癌模型的高分辨率超声检查需要充分的解剖学知识和实践操作技能。本文提供了一份针对小鼠模型腹部超声检查的详细实操指南，特别聚焦于内源性胰腺癌模型，并总结了常见错误及其避免方法。

超声成像是一种多功能且无创的技术，可用于解决多种人类疾病小鼠模型中的问题。与其他所有成像方法相比，其主要优势包括高通量、成本效益高、采集时间短以及能够进行实时成像。然而，该技术需要操作者具备专业知识，才能获得准确且高质量的图像。特别是当出现不希望的伪影时，通常至少需要具备一定的超声成像经验才有助于问题的识别与处理。在胰腺癌研究中，该技术可用于确定肿瘤的发生、进展及对治疗的反应。此外，通过测量不同方向的直径，可实现对肿瘤体积随时间变化的精确定量。本研究详细演示并描述了如何在基因工程小鼠模型中利用高分辨率超声成像作为胰腺癌的筛查工具。
<img alt="实验小鼠操作流程；含食物颗粒的笼具；实验动物护理过程。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56979/56979fig1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图1"> 
<strong cla...

本文介绍了在基因工程胰腺癌小鼠模型中应用高分辨率超声成像的方法。主要目的是提供检测和评估内源性胰腺肿瘤的详细操作指南。

LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre（KPC）小鼠模型是一种已建立且常用的转基因模型，用于评估新型……

有多种转基因小鼠模型可用于研究胰腺癌。其中最常用的模型是Kras、p53小鼠模型，该模型在Kras癌基因中携带激活突变，在p53抑癌基因中携带失活突变。这两种突变均通过Pdx-Cre启动子条件性激活。这种Kras、p53、Pdx-Cre小鼠模型，简称KPC模型，会在2至6个月龄期间自发形成胰腺肿瘤。在准备进行超声检查前，应准备好以下设备并确保其可正常使用。对于高分辨率超声成像，需使用一台固定的超声设备。超声检查在异氟烷蒸发麻醉下进行。小鼠进入深度镇静状态后，转移至绿色工作台。超声检查结束后，应将小鼠置于预热的笼子中，以加速恢复。在KPC小鼠模型中，肿瘤的发展具有高度变异性。为了避免不必要的超声筛查操作，我们通常从两个月龄开始每周进行一次腹部触诊。轻柔地上下触诊小鼠腹部，以检测是否存在胰腺肿瘤。请注意，坚硬的粪便可能类似腹部肿瘤肿块。在单独的诱导室中开始全身麻醉后，将小鼠小心地放置在已预热的绿色工作台上。超声检查过程中，通过鼻罩持续供给异氟烷。使用安装系统将换能器头部固定在工作台的上方。进行足部夹捏测试，以确认小鼠已处于深度麻醉状态。随后，使用医用胶带将小鼠固定在工作平台上。在进行超声检查之前，必须彻底清除腹部毛发，以避免产生任何伪影。首先，仔细剃除小鼠的毛发。使用宠物电推剪时需格外小心，避免造成皮肤表层损伤。其次，将一层薄薄的脱毛膏涂抹于剃毛区域，然后用湿润的纸巾彻底清除脱毛膏。在小鼠腹部涂抹足量的超声耦合剂，并在超声探头上直接涂抹一层薄薄的耦合剂。使用轻柔的压力将换能器放置在腹部。过度压迫小鼠腹部可能导致呼吸或循环功能受损，应避免。上下扫描，并调节工作平台的框架以及 x 轴和 y 轴方向的轮子。某些肿瘤可能只有通过改变小鼠的初始位置才能观察到。要正确解读B模式超声图像，需要具备基本的解剖学知识。在KPC小鼠模型中，可在胰腺的头部、体部或尾部检测到胰腺肿瘤。肿瘤通常表现为低回声肿块。由于具有促纤维增生性特征，这些肿瘤通常难以通过超声探头压缩。超声检查结束后，彻底清除超声耦合剂，并将小鼠轻轻放入预热的恢复笼中。确定肿瘤后，上下扫描以了解其总体大小，并使用超声卡尺测量其最大直径。为精确计算体积，我们采用椭球体公式。完成第一个平面的测量后，可将探头旋转90度至纵向位置，或侧向翻转小鼠，以检测肿瘤的纵向扩展范围。为了评估新的治疗方案，确定初始肿瘤体积以及治疗期间的肿瘤生长动力学至关重要。在临床前试验中，可每三至四天重复进行一次腹部超声检查，以监测肿瘤生长情况。

utilizing-high-resolution-ultrasound-to-monitor-tumor-onset-growth

Research

科研

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关键词：超声引导，胰腺导管腺癌，细胞植入，成年小鼠，原位移植，肿瘤模型

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生物发光正位胰腺癌小鼠模型：一种用于无创监测小鼠癌症进展的技术

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胰腺癌进展的生物发光原位模型

本实验方案的目的是在小鼠原位胰腺肿瘤异种移植模型中应用动态对比增强磁共振成像（DCE-MRI）。DCE-MRI是一种用于分析目标组织中微血管结构的非侵入性方法，可用于评估肿瘤在接受新型治疗后血管系统的反应。...

正位胰腺癌小鼠模型的动态对比增强磁共振成像

本文介绍了一种将表达绿色荧光蛋白的胰腺癌细胞（PANC-1 GFP）原位植入Balb-c Ola...

胰腺癌荧光原位小鼠模型

我们描述了一种在超声引导下将小鼠来源的胰腺导管腺癌细胞系直接植入原位肿瘤部位的实验方案。该方法在注射后2至4周内即可通过超声扫描检测到胰腺肿瘤，且与手术原位植入相比，显著减少了肿瘤细胞在腹膜壁上的种植比例。...

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我们提出了一种通过超声引导下注射人胰腺癌细胞建立微创原位胰腺癌模型并随后监测肿瘤生长的实验方案。 体内...

通过超声引导注射建立胰腺癌细胞原位异种移植模型

本方案描述了利用高频超声成像技术对小鼠整个甲状腺进行可视化，并监测未分化甲状腺癌生长的方法。...

利用高分辨率超声成像分析基因工程小鼠模型中原位ATC肿瘤

我们介绍一种用于小鼠胰腺亚细胞分辨率成像的稳定植入式光学窗口的外科手术植入方案，可实现对健康和病变胰腺的连续性及纵向研究。...

小鼠胰腺活体成像的稳定窗口技术

本方案采用多腔床对多达四只动物进行并行磁共振成像（MRI），以检测基因工程小鼠模型中的胰腺导管腺癌肿瘤。该多动物MRI方案快速且经济高效，有助于临床前研究中的动物筛选以及肿瘤生长的纵向监测。...

用于胰腺癌小鼠模型中肿瘤测量的多动物磁共振成像

学习使用高分辨率超声技术检测Kras、p53、Pdx-Cre基因工程小鼠模型中的内源性胰腺肿瘤。该方法可在2至6月龄小鼠中实现肿瘤发病监测与生长评估，为胰腺癌研究提供可靠的影像学手段。

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