2018年3月20日
我们制定了一个协议, 以评估小鼠的福祉在程序中使用全麻。分析了一系列的行为参数, 说明了幸福水平和糖皮质激素代谢产物。该议定书可作为一般援助, 以科学的、以动物为中心的方式估计严重程度。
该协议的总体目标是评估小鼠在接受包括全身麻醉在内的手术后的健康状况,并提供科学可靠的数据以支持根据欧盟指令 2010/63 的严重程度分类。该协议可以帮助回答实验动物科学领域中有关动物福利的关键问题,例如涉及全身麻醉的手术引起的痛苦程度。该方案的主要优点是以基于动物的科学方式评估每只小鼠的健康状况,并且该方案可以很容易地适应并整合到其他计划的研究中。
当我们推测如果重复麻醉比单次暴露对实验室小鼠造成更大的压力时,我们首先想到了这个方案,那么基于科学的数据就会丢失。在此步骤中,准备一个地板面积约为 220 毫米 x 290 毫米、高度为 390 毫米的玻璃盒。用大约 0.5 厘米的床上用品覆盖地板。
然后将家笼中的一把用过的床上用品撒在新床上用品上,以减少新环境造成的困扰。提供食物和水。轻轻地将鼠标转移到观察笼中,让鼠标适应新环境至少 30 分钟。
对于鼠标鬼脸刻度,请使用高清相机进行摄影。在 1 到 2 分钟内,每个时间点连续拍摄大约 30 到 40 张照片。为了根据 Deacon 和 Jirkof 测试穴居行为,将 140 克食物颗粒放入标准不透明塑料水瓶中准备洞穴。
接下来,将装满食物颗粒的塑料水瓶平行于观察笼的后壁放置。两小时后,称量洞穴中剩余的食物颗粒。作为基线,在手术前两天进行两次测试。
在此步骤中,准备一个装有新垫料的笼子,用于 24 小时观察期,其中小鼠被单独饲养。24 小时观察期从老鼠做鬼脸和挖洞行为后开始。单个住房的持续时间保持在最低限度。
同时,测量家笼活动、食物摄入量、筑巢行为和粪便皮质酮代谢物的水平。接下来,将一些用过的没有家笼里粪便的床上用品撒在新材料上,以减少痛苦。提供标准重量的标准化方形棉套,仅用于环境富集。
之后,将红外传感器安装在笼子顶部,以测量家庭笼子的活动。随意提供标准的食物颗粒和水,并将小鼠放入笼子中。第二天早上,在灯亮起大约两小时后,Deacon 根据 Deacon 的五分制对巢穴进行评分。
此外,称重任何未撕裂的巢箱碎片,至少占初始巢箱重量的 5%。接下来,将网格笼顶部与笼子较长的一侧成 45 度角放置在笼子中。启动计时器,并在大约 1.5 米的距离内对鼠标进行 10 分钟的监控或录像。
始终注意鼠标爬上笼子顶部时,所有四个爪子都在笼子顶部,或者离开笼子顶部时,一个或多个爪子在笼子地板上,然后进行分析。与对照组相比,单次麻醉体验和重复麻醉在暴露后 30 分钟增加了小鼠鬼脸量表差异评分。在最后一次麻醉后 150 分钟,所有小鼠的小鼠鬼脸量表差异评分恢复到对照水平。
对于穴居行为,与对照组相比,只有重复麻醉显着降低了小鼠从洞穴中取出的食物颗粒重量的百分比。对于筑巢行为,单次麻醉体验、重复麻醉和对照之间的筑巢评分没有显着差异。在自由探查范式中,与对照组相比,重复麻醉显着减少了探查次数,与最后一次麻醉后 1 天单次麻醉相比,重复麻醉显着减少了探查总持续时间。
最后一次麻醉后 8 天,研究组之间不再有差异。在尝试此协议时,重要的是要记住通过隧道和/或拔罐方法处理小鼠。抓住老鼠的尾巴会引起压力和焦虑,这反过来会影响幸福感,也会影响协议的结果。
该方案可以很容易地适应并整合到计划的研究中,以评估程序对小鼠健康的影响。根据程序和研究设计,应选择该方案最合适的测试。观看此视频后,您将对如何评估接受全身麻醉程序的小鼠的健康状况有很好的了解。
该协议有助于以基于动物的科学方式对程序的严重性进行分类。
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本方案对接受全身麻醉操作的小鼠进行福利状况评估,提供支持依据以符合欧盟指令2010/63的严重性分类要求。该方案以科学严谨的方式评估每只小鼠的健康状况。
评估动物在麻醉后的福利状况有助于支持符合伦理的临床前研究并满足法规要求。本方案提供了可量化的行为学和生理学指标,用于优化实验设计并减少动物痛苦。该方法可实现基于数据的严重程度分类,与欧盟指令2010/63保持一致,从而提高转化预测性和实验可重复性。
该方案适用于先导化合物优化前的早期安全性评估,属于发现生物学的研究范畴。