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DOI: 10.3791/57167-v
Milica Momcilovic1, Sean T. Bailey2, Jason T. Lee3, Charles Zamilpa3, Anthony Jones3, Gihad Abdelhady1, James Mansfield4, Kevin P. Francis5, David B. Shackelford1
1Division of Pulmonary and Critical Care Medicine,University of California Los Angeles David Geffen School of Medicine, 2University of North Carolina at Chapel Hill, 3Department of Molecular and Medical Pharmacology,University of California Los Angeles, 4Andor Technology, 5Division of Orthopaedic Surgery,University of California Los Angeles David Geffen School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
在本协议中, 我们描述如何利用 [18F]-2-氟 2-脱氧 d-葡萄糖正电子发射断层扫描和计算机断层扫描 (18MLN0128 PET/CT) 成像, 以测量肿瘤代谢反应的靶向治疗在Kras/Lkb1突变小鼠肺癌模型及高分辨率体外显影成像与定量组织学的结合。
这种方法可以帮助回答癌症代谢和癌症治疗领域的关键问题。例如确定可以调节肿瘤生长以及肿瘤代谢的新型疗法。这项技术的主要优点是,我们可以对肺部肿瘤随着时间的推移发展进行无创成像。
这很重要,因为我们可以更好地了解肿瘤代谢如何实时响应各种治疗干预。来自 Crump Institute 临床前成像中心的成像科学家将演示这些程序。注意:处理放射性物质时,请使用防护设备并遵循所有适用的监管程序。
首先加热小鼠的笼子,以便在 37 摄氏度下成像,然后再注射氟 18 标记的氟脱氧葡萄糖。这减少了示踪剂的棕色脂肪消耗。称量第一只鼠标并记录其重量。
使用机构批准的方法麻醉小鼠后,通过捏住脚趾来测试麻醉深度。如果没有看到反应,请继续手术,在眼睛上涂抹眼药膏,以防止麻醉期间出现任何干燥。在无菌盐水中以每 100 微升 70 至 75 微居里 70 至 75 微居里的调整衰减校正注射浓度小心稀释氟 18 标记的氟脱氧葡萄糖,其放射性半衰期为 109 分钟。
然后用 100 号针头将 28 微升吸入胰岛素注射器中,并使用剂量校准器测量放射性剂量。记录测量值和测量时间以确定衰减校正。将注射器放入铅注射器支架中。
注射时,首先用浸泡在温水中的纱布将尾巴加热 1 到 2 分钟。然后在注射前用 70% 异丙醇擦拭以扩张尾静脉。通过侧尾静脉推注注射注射器中的整个体积。
并记录注射时间。然后使用剂量校准器测量注射器中的剩余剂量,并记录测量值和时间。最后,将注射的小鼠置于 37 摄氏度下含有 1.5 至 2% 异氟醚的麻醉室中,以便在 PET 扫描前一小时通过小鼠的体循环分布探针。
1 小时后,将第一只小鼠置于 37 摄氏度的成像室中,接受鼻锥异氟醚麻醉。并用医用胶带将其四肢固定在仰卧位。将成像室放入 PET CT 扫描仪中,并按照 PET CT 扫描仪手册中的说明获取 PET 和 CT 扫描。
PET CT 完成后,将鼠标从成像室中取出,让它在笼子里恢复。通过单击文件,然后单击导入文件,将重建的 PET CT 图像导入 AMOD 软件。并选择适当的 DICOM 文件。
右键单击 PET 数据集。并在 basic info 选项卡上找到 percent injection dose per gram 字段。输入之前报告的每克注射剂量百分比。
通过单击"编辑",然后单击"添加 ROI",在肿瘤和正常组织上绘制感兴趣的区域。选择 ROI 的形状,并为 ROI 命名。在肿瘤和组织上绘制 ROI 并调整其尺寸以在所有三个轴上覆盖感兴趣的组织。
对携带 KRAS 和 LKB1 共突变肿瘤的小鼠(称为 KL 小鼠)进行氟 18 标记的氟脱氧葡萄糖 PET 成像。这些小鼠的肿瘤具有高度糖酵解性。如 F-FDG 消耗量增加所示。
与之前发表的研究一致。对整个肺的切除显示存在几种肿瘤,此处以横视图、矢状面和冠状面显示。用 H&E 对小鼠肺的 5 个叶进行染色,以观察组织的形态。
对 1-5 叶进行葡萄糖转运蛋白 1 染色。Glut1 在肿瘤细胞质膜上的表达和定位与氟 18 标记的氟脱氧葡萄糖的标准摄取值直接相关。执行此程序时,请务必记住 FDG 生物分布取决于动物处理条件。
如麻醉、保暖和禁食。为了确保可重复性,必须始终如一地执行这些步骤。按照这个一般程序,其他 PET 痕量可用于测量体内的各种生物过程,例如氨基酸代谢和受体-配体相互作用。
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