Name: 新西兰白兔的配对和配对维护方法 (穴兔家兔) 通过行为 Ethogram、监视和干预 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-16T14:30:00.000+00:00
Duration: 10 min
Description: 学习新西兰白兔的配对与维护方法，通过行为观察表和干预策略建立稳定的实验室兔群社会结构。该方法有助于研究人员成功实现家兔的群居饲养管理。

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作者谨向密歇根大学内多个使用兔模型的实验室致以诚挚谢意，感谢其慷慨提供种群资源，特别感谢陈 Eugene 博士的实验室以及转化科学与治疗学先进模型中心（CAMTraST）团队。同时感谢密歇根大学ULAM饲养团队，Jenny Jones 在环境丰富化协调方面的帮助，以及 Katie Wearsch 在配对工作中的协助。

本方案遵循密歇根大学（U of M）实验动物医学单位（Unit for Laboratory Animal Medicine, ULAM）制定并采用的护理标准，所有动物护理程序与方法均经机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准并接受其监督。IACUC 完全符合《实验动物管理和使用指南》第八版的要求。. 所有兔子均饲养在最小尺寸为0.46 m的笼子中2 每笼饲养数量超过《实验动物照护及使用指南》的最低要求。
1. 对于供应商未预先配对的新到家兔，建立雌性配对的方法。
<ol>
	<li>配对前准备以下所有材料：
	<ol>
		<li>采集雄性兔的尿液。将笼子下方的垫料翻转，使塑料面朝上，尿液积聚在垫料表面。用注射器吸取尿液，并储存于无菌锥形管中。</li>
		<li>准备一个干净、中立的笼子用于配对。移除中间隔板，使两只兔子可以完全进入并共享两个并排的笼子（也称为一个&#34;doublewide&#34;笼子）。确保该笼子包含以下物品：至少2件低价值的环境丰富化物品和2件高价值、可破坏的环境丰富化物品，至少两个可供躲藏的位置（如栖木、小屋或箱子），食物和水分别设有两个独立的取用点，以及两堆松散的干草。</li>
		<li>填写《兔社交引入记录表》（图1）。</li>
		<li>准备一个装有新鲜水的干净喷雾瓶。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>从运输容器中取出第一只雌兔。
	<ol>
		<li>称量兔子体重并修剪指甲。若无个体识别标记（如毛色、耳标、纹身等），使用无毒、对动物安全的标记笔在耳朵尖端做标记。 
		注：应使用蓝色或紫色等不易与血液或尿液等体液混淆的颜色。</li>
		<li>使用纱布垫或棉球，将约1 mL先前收集的公兔尿液涂抹在兔子前额，然后将兔子放入中立笼中。</li>
		<li>对第二只兔子重复步骤1.2至1.2.2，但无需进行个体识别标记。 
		注：仅需一只兔子做识别标记即可，但两只兔子均需涂抹尿液。</li>
		<li>持续观察配对情况至少1小时，并在观察过程中继续填写《兔社交引入记录表》，记录每个时间点所观察到的行为。</li>
		<li>仅在出现咬伤、两只兔子持续相互追逐（转圈）超过15秒，或发生打斗行为（如冲撞/扑击）时，使用喷雾瓶喷水干预。
		<ol>
			<li>若观察到上述行为，应暂时分开两只兔子，并进行身体检查，确认是否有受伤迹象。 
			注：若仅一只兔子追逐而另一只逃跑，则不应喷水干预。干预仅适用于两只兔子均主动参与追逐的情况。此外，不要过早干预。在此阶段，兔子建立支配等级关系至关重要，频繁中断或干预可能延缓甚至阻碍这一必要过程的完成。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>若发现轻微损伤（如抓伤或毛发被拔导致的小型创面），应联系兽医人员，但不要将配对分开。
		<ol>
			<li>继续监测是否有表明配对成功的积极亲和行为。参见3.2节“积极/亲和行为”。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>若发现特定类型的损伤（见3.4.3.2），例如活动性出血的创面，或生殖器区域及眼部周围有任何损伤，应立即分开。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>若1小时后配对状态稳定，可离开房间。在当天其余时间内再进行两次各10分钟的检查（图2）。 
	注：稳定配对的迹象包括明显的支配与顺从行为、共同休息、共同进食/饮水和/或相互理毛（参见3.2节“积极/亲和行为”）。不稳定配对的迹象包括两只兔子均表现出明显的支配行为、资源守护或攻击性互动（参见3.4.1节“攻击性互动”）。配对过程中大多数攻击性行为发生在第一小时内，但如果配对持续表现出攻击行为，可延长监测时间。</li>
	<li>若在两次额外检查后配对仍保持稳定，可让其整夜共处。</li>
	<li>次日早晨对两只兔子进行身体检查，用手触摸毛发下方以检查是否有损伤，并检查生殖器区域是否有创面。</li>
	<li>若未发现显著损伤，则在本周剩余时间内每天进行一次10分钟的检查。若配对在本周剩余时间内均保持稳定，可视为稳定配对。在《兔社交引入记录表》中记录此结果，并生成《社交饲养互动与环境丰富化记录表》（图3）。 
	注：仅当配对出现特定类型的损伤（见3.4.3.2）或无法整夜共处（在两个工作周内发现新的轻微创面）时，才视为配对失败。因攻击行为或科研需要而分开的雌性配对，可成功重新配对——若因科研需要分开，则可与原伴侣重新配对；若因攻击行为分开，则可与新的雌兔配对。而已分开的成年雄性配对则永远不得重新配对，因其存在严重攻击风险。因此，雄性配对的维持极为重要，一旦分开，它们将在动物设施中余生单独饲养。</li>
</ol>
2. 断奶时创建其他类型配对的方法，包括雌性同胞配对、断奶时年龄相差一周内的雌性非同胞配对、雌性断奶仔鼠与其母鼠配对、断奶时的雄性同胞配对，或来自供应商的预先配对成年鼠。
<ol>
	<li>按照1.1.2中的描述准备中性笼具。</li>
	<li>完成步骤1.2.1，并将兔子放在一起。</li>
	<li>观察5分钟以确保相容性，并填写群养互动与环境丰富化记录表。</li>
	<li>若观察到任何打斗行为，则返回步骤1.1，并执行完整的配对流程。</li>
</ol>
3. 观察积极/亲和、中性及消极行为。
<ol>
	<li>每天监测配对情况，并在《群居互动与环境丰富化记录表》中记录所观察到的行为。</li>
	<li>监测积极/亲和行为。
	<ol>
		<li>观察配对是否存在明显的支配/顺从行为。 
		注：这些行为包括（但不限于）一只兔子表现出支配倾向，如追逐、骑跨、理毛、用颏部标记或跺足，而另一只兔子接受并表现出顺从行为，如逃跑、允许被骑跨或理毛，或保持低头姿势。</li>
		<li>观察兔子是否共享资源（食物、水、干草）。 
		注：当对资源不存在竞争或攻击行为时，资源共享可视为配对稳定的积极指标。</li>
		<li>观察配对是否出现异体理毛行为，即一只兔子为另一只兔子理毛。 
		注：被理毛的兔子应接受该行为。通常由支配兔为顺从兔理毛，但有时也可能出现顺从兔为支配兔理毛的情况，这并不表示配对关系破裂。</li>
		<li>观察兔子在感到共享环境安全时进行自我理毛的行为。 
		注：自我理毛是配对关系稳定的积极表现。若兔子感到威胁，将不会进行需要直立坐姿的理毛行为，因为这种姿势会增加其遭受攻击的风险。</li>
		<li>观察兔子是否选择与其同种个体处于同一空间位置。 
		注：标准笼具设置为兔子提供了充足空间，使其可选择各自独处。当它们主动选择共处时，表明配对关系稳定。</li>
		<li>观察兔子单独与环境丰富化物品互动的行为。 
		注：任一兔子感到足够安全而与环境丰富化物品互动，均为积极指标。</li>
		<li>观察配对共同与环境丰富化物品互动的行为。 
		注：确保两只兔子以非攻击性、非竞争性的方式共同参与互动。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>中性行为。
	<ol>
		<li>观察无互动发生的情况。 
		注：某些配对可能始终表现为中性或无互动状态。这未必表示存在问题，但如果配对持续保持中性，且从未观察到其他积极或消极行为，则需密切监测。持续的中性互动可能表明配对尚未建立支配等级，随着时间推移，发生打斗和受伤行为的风险较高。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>消极行为。
	<ol>
		<li>攻击性互动。 
		注：将攻击性互动定义为两只兔子同时表现出负面行为。例如，若一只兔子追逐而另一只逃跑，不属于攻击性互动；但若两只兔子相互追逐（绕圈），则视为攻击性互动，因为双方均主动参与了此类支配行为。
		<ol>
			<li>密切注意咬伤、受伤、相互追逐（绕圈）、资源守护或以打斗方式相互跳跃（冲撞）等行为。一旦出现，必须立即干预。
			<ol>
				<li>当出现上述行为时，使用喷雾瓶喷水以分散兔子注意力。 
				注：喷水应仅作为分散注意力的技术，而非惩罚手段。通常兔子会分开至笼子两侧，以清理毛发上的水。
				<ol>
					<li>若喷水无法分散攻击行为且需进行物理分离，应佩戴厚手套以防受伤，并手动将配对分开。</li>
				</ol>
				</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
		<li>观察难以建立支配关系的行为。 
		注：此类情况至关重要，观察者必须能够识别，因为无法建立适当支配等级的配对极易导致配对失败，若未能及时发现，可能造成受伤。
		<ol>
			<li>识别此类情况时，应关注两只兔子均表现出支配行为，或顺从兔常试图逃避支配行为的配对。 
			例如，顺从兔不接受骑跨，反而逃跑或试图骑跨支配兔。
			<ol>
				<li>对此类配对应加强监测并增加环境丰富化干预，以协助其建立等级关系。</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
		<li>受伤。
		<ol>
			<li>一旦发现任何受伤情况，立即联系兽医人员。</li>
			<li>除非观察到特定类型的伤口（如活动性出血病灶，或生殖器、眼部附近受伤），否则不得立即分离配对。</li>
			<li>对于仅有轻微表浅损伤（如小划痕、结痂、啃毛或拔毛）的配对，应增加环境丰富化措施并持续监测，但不得分离。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>一旦观察到上述任何行为，必须对该配对加强监测并实施环境丰富化干预。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>监测可能预示打斗行为的交流行为。 
	注：以下行为均为兔子用于相互沟通支配等级的自然方式，若不加以控制，可能发展为打斗行为。观察到这些行为表明配对正在建立支配关系，此时加强监测和环境丰富化将有益。
	<ol>
		<li>注意追逐/逃跑行为。 
		注：这是兔子建立支配关系时常见的行为。只要一只兔子追逐而另一只逃跑，无需使用喷雾瓶干预。</li>
		<li>注意尿液喷洒行为。 
		注：此行为在成年雄性配对中最常见，但也可能出现在雌性配对或单养兔子中。尿液可能喷洒在笼具上或顺从兔身上。</li>
		<li>注意骑跨行为。 
		注：这是典型的支配展示，由支配兔骑跨，顺从兔接受。</li>
		<li>注意啃毛迹象。 
		注：啃毛通常首先出现在鼻部、耳间或颈背部。需监测以防止发展为病灶。</li>
		<li>注意跺足行为。 
		注：跺足具有多种交流功能。其中之一是通过反复向顺从兔跺足，以果断的恐吓方式展示支配地位。当跺足伴随逃跑行为时，也可能表示顺从。</li>
		<li>一旦观察到上述任何行为，必须对该配对加强监测并实施环境丰富化干预。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. 采用环境丰富化干预措施进行配对维持的方法。
<ol>
	<li>记录所有配对兔子的年龄。在笼位卡背面注明兔子的周龄，并每周更新一次。
	<ol>
		<li>在第10至20周左右加强监测，因为此阶段容易出现问题35。性成熟通常在12至17周龄之间开始。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>当观察到负面行为（参见第3.4节）或交流行为（参见第3.5节）时，将该配对的丰富化频率增加至每周三次。
	<ol>
		<li>每周三次为每只兔子提供一种新颖的丰富化物品，并在《群居互动与丰富化记录表》上记录相应的加强监测情况（每兔一件物品）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>如果负面行为或交流行为加重，或出现新的异常行为，则将该配对的丰富化频率增加至每日一次。
	<ol>
		<li>每天（包括周末和节假日）为每只兔子提供一种新颖的丰富化物品，并在《群居互动与丰富化记录表》上记录相应的监测情况（每兔一件物品）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>丰富化物品使用指南。
	<ol>
		<li>使用任何丰富化物品前，须获得机构丰富化委员会和/或兽医人员的批准。</li>
		<li>每对兔子中每只兔至少提供一件丰富化物品，每两周轮换一次，同时每日提供散放的干草32。</li>
		<li>根据机构规定，所有纸质和纸板类丰富化物品在使用前必须经过高压灭菌处理。</li>
		<li>添加新物品前应移除旧物品，确保每只兔子同时拥有的物品不超过两件。</li>
		<li>轮换不同类别的丰富化物品以保持新颖性（见图4）。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

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</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

在兔子群养项目中，最困难的挑战之一是区分物种典型的攻击性或交流行为与具有问题性的打斗行为。所有参与配对过程监测的饲养和兽医人员都必须深入了解兔子正常的社交行为，因为许多看似打斗的行为实际上是为了建立等级关系所必需的行为，通常不会导致受伤。例如，在稳定的等级结构中，追逐与逃跑是常见的日常行为，用于巩固地位6,29，但未经训练的观察者可能将其误认为危险的打斗行为而要求将动物分笼。实验兔会花费相当比例的时间进行攻击性行为，以维持配对间的等级关系38，而野生环境中的优势个体每天都会频繁要求从属个体表现出顺从行为（如逃跑）15。如果观察者不了解这一事实，就可能导致将实际上行为正常、并无分笼必要的配对错误地分开。由于这些物种典型行为可能表现得较为激烈，因此很难判断何时应进行干预，何时应让配对自行解决问题。这一点在建立新的配对关系、首次确立支配等级时尤为重要。过多的人为干预可能导致配对无法清晰建立支配等级，进而引发配对关系破裂。因此，必须安...

管理实验动物护理的法规对兔子的群养提供了明确的建议。国际实验动物评估和认可委员会（AAALAC International）用于评估动物护理与使用项目的三项主要标准中有两项描述了符合物种特性的饲养与 housing 的指导原则。这些指导资源中的第一项，即第8版th 版 实验动物护理和使用指南1 （指南）指出，兔子等社会性物种应仅在例外情况下单独饲养，单独饲养不应作为饲养标准。第二，欧洲实验和其他科学用途脊椎动物保护公约2指出兔子本质上是群居动物，应以符合其社会性需求的方式进行群养，除非存在符合资格的兽医或科研相关理由。美国实验室动物福利办公室（OLAW）还规定，单独饲养仅在具备经机构动物照护与使用委员会（IACUC）评估并批准的科学依据、动物之间存在不相容性，或兽医人员对动物健康与福利存在担忧时方可实施。3.
除了满足监管合规要求外，同行评审的文献中提供了许多关于成对饲养新西兰白兔（NZW）所带来的生理和心理益处的实例。为了提供尽可能高的动物福利标准，在满足研究人员特定研究目标的同时，必须提供符合物种天性的饲养环境。群居饲养的新西兰白兔表现出更多的主动行为4，由于活动量增加，其体质增强，并且胃肠道淤滞的发生率降低5。对于实验兔而言，身体活动尤为重要，因为在笼养环境中它们容易发生骨质疏松症4。除了群居饲养带来的生理益处外，还存在多种心理益处。成对饲养的新西兰白兔表现出更多物种特异性行为6，从社会刺激中获得环境丰富化带来的益处4，自我安抚行为的频率增加7，亲社会行为（如相互理毛）也更为常见8，并且在面对新奇刺激时表现出更强的应对焦虑能力，即应激缓冲效应增强5。此外，与社会隔离饲养的新西兰白兔相比，群居饲养的新西兰白兔在免疫功能9和抗体产生方面并无差异10；然而，单独饲养的兔子与群居饲养的兔子相比，心率更高11，白细胞计数也更高10。
正如文献中充分记载的社会化饲养的益处一样，社会隔离的负面影响也有大量记录。将具有社会性的物种单独饲养可能导致生理上的应激指标12。单独饲养的新西兰白兔表现出更长时间的静止状态，并出现更多异常行为4以及提示挫败感的刻板行为13,14,15。常见的刻板行为包括：啃咬金属物体（如笼栏或饲喂/饮水装置）、过度自我理毛、舔舐笼具以及自伤等负面行为16。如果必须进行单独饲养，应额外关注以抵消社会隔离带来的应激。《实验动物管理和使用指南》（The Guide）建议提供更大的饲养空间，尽可能缩短单独饲养的时间，允许动物偶尔进入更大的饲养环境（如地面围栏），并提供额外且多样化的环境丰富化措施，在条件允许时包括与其他兔子互动的机会1。国际实验动物评估和认可委员会（AAALAC International）还建议提供受保护的接触方式，使动物能够与其它动物进行视觉、听觉和嗅觉上的接触17。
如果有选择，兔子更愿意与其他兔子待在一起。偏好测试表明，新西兰白兔（NZW）雌兔为获得有限的社交接触所付出的努力几乎与获取食物相当18。其他多项研究也显示，当有选择时，成对饲养的兔子经常被观察到彼此发生身体接触4,8,19,20。这些研究突显了兔子对同种个体社交的高度重视。有趣的是，这一结果并不仅限于雌性兔子。当使用一种经过改良的笼具隔板（一半为不透明材质，另一半为透明材质，并在透明部分钻有小孔，以实现增强但受保护的社交接触）时，雄性NZW兔子在能够最大程度接触邻近雄兔的笼内四分之一区域停留的时间显著更长，相比之下，使用标准隔板的雄兔则无此表现。具有受保护社交接触条件的雄性NZW兔子活动性显著更高，花更多时间进行活动和休息行为，而用于理毛等与无聊和社会剥夺相关的维持性行为的时间则更少。此外，与使用标准隔板的雄兔相比，使用改良隔板的雄兔对陌生工作人员的恐惧程度更低，表现为更短的接近陌生手部的潜伏期；这可能归因于与同伴互动所产生的社会缓冲效应21。此外，使用改良隔板的雄兔其昼夜活动与休息节律逐渐同步，呈现出类似野生兔子的晨昏活动模式，而社会隔离的雄兔在活动与休息节律上则表现出显著个体差异21。文献表明，由于性成熟后可能出现攻击行为，雄性兔子通常被认为不适合群养14,22,23,24。在野生种群中，雌性比雄性更具群居性6，多个雌性常共享栖息空间，而雄性则倾向于彼此保持较大距离，在实验室笼具这种有限空间内共同饲养时容易引发更强烈的攻击行为15,25。一些研究曾尝试在更大的圈养环境中对雄性兔子进行社会性饲养，但结果不一14,22,26,27。其中一项研究尝试在笼具环境中配对雄性兔子，结果三对兔子均因攻击行为而被迫分开14。以下方案据作者所知，是首个能够在笼具环境中成功实现雄性兔子与其兄弟自幼共同饲养至成年的方法。由于存在攻击风险，本方案不涉及非亲缘关系雄性之间的配对或成年雄性之间的配对；同时，出于种群研究用途的考虑，也不进行雄雌配对。
实现兔子群养的第一步是建立新的配对关系。本文描述了本机构在建立新雌性配对方面最成功的方法，以及用于结构化监测的行为谱（ethogram）。该方案采用尿液标记6,28、应激结对、提供中立区域以及避免强迫资源共享等方法。在野生兔群中，占主导地位的雄兔会向其繁殖群体中的其他兔子（包括幼兔、青年兔和雌兔）排尿，以此通过气味标记确认属于其社会群体的成员29。这一现象已被引入实验室环境，具体做法是将雄兔新鲜采集的尿液涂抹于新配对雌兔的前额。这种处理使两只雌兔带有共同气味，提示它们同属一个繁殖群体，从而减少激烈竞争行为。一项关于使用尿液标记建立新雌性兔对的研究发现，未经标记的配对表现出更强的攻击性，且亲和行为少于经雄兔尿液标记的配对6。应激结对也被证实是在伴侣兔群体中有效的配对方法，即让两只兔子共同经历轻度应激事件，以促进彼此间的联结30。通常通过乘车或用运输箱带兔子外出散步来实现。理论认为，兔子在应激期间因同伴存在而获得安全感，这种感受会延续到未来的互动中，从而更有可能成功建立稳定配对关系31。新 arrival 的兔子在经历来自供应商的运输应激后进行配对，本身就构成了一次自然的应激结对机会，可加以利用以辅助配对过程。一旦配对建立，必须实施有效的监测程序，持续跟踪配对行为，以便在必要时及时干预。本文重点介绍了为全面理解兔子社会行为而开发的行为谱，以及配对维持的方法。由于目前缺乏系统描述兔子常规社会互动及其意义的文献，配对维持常成为各机构面临的难点。许多兔子配对因出现看似打斗的行为而被拆散，但实际上这些行为属于正常的社交互动，可通过适当监测和干预加以缓解。本文旨在通过提供详尽的行为清单及其可能含义，缓解这一问题。此外，环境丰富化干预也被用于预防配对失败。充足的环境丰富化可减少恐惧行为，增强应对压力的能力1，降低异常行为的发生率24,32，满足重要的生理需求33，并整体提升动物福利34。本机构先前研究结果表明，增加环境丰富化有助于提高配对饲养的成功率，特别是在性成熟期（12–17周龄）前后减少攻击性行为的发生35。该方法具有双重益处：一方面，丰富化设施可转移注意力，防止打斗；另一方面，它还能通过物种典型行为促进积极互动。

<table><tbody><tr><td>欧洲兔饲养</td><td>Allentown, Inc.</td><td>RBEURO-06</td><td>中间隔板已移除&lt;br/&gt; http://www.allentowninc.com/large-animal-housing/rabbit-ferret/</td></tr><tr><td>R-Suite 兔类丰富化饲养环境</td><td>Techniplast</td><td></td><td>2 个相连的单笼，中间隔板已移除&lt;br/&gt; http://www.tecniplast.it/en/product/r-suite-rabbit-housing-rack.html</td></tr><tr><td>实验动物标记笔 - 标准笔尖</td><td>Ketchum Manufacturing</td><td></td><td>蓝色&lt;br/&gt; http://www.ketchum.ca/products/lab-animal/animal-markers/1313/animal-markers-standard-tip</td></tr><tr><td>西部提摩西草</td><td>Oxbow 动物健康</td><td></td><td>http://www.oxbowanimalhealth.com/products/type/detail?object=1530</td></tr><tr><td>喷雾瓶</td><td>Uline</td><td>S-18404BLU</td><td>https://www.uline.com/Product/Detail/S-18404BLU/Spray-Bottles/24-oz-Blue-Spray-Bottles</td></tr><tr><td>兔笼衬垫</td><td>蓝岭组织</td><td></td><td>定制 Versa-Pak T.1503 30&#039;&#039; X 30&#039;&#039;&lt;br/&gt; http://www.blueridgetissue.com/products/#versa_pak</td></tr><tr><td>优质全皮手套</td><td>Wells Lamont</td><td>0-53300-07006-8</td><td>https://www.wellsllamont.com/catalog/product/premium-full-leather-glove/</td></tr><tr><td>各种丰富化玩具</td><td>Bio-Serv</td><td>多种</td><td>https://www.bio-serv.com/category/Rabbit_Enrichment_Devices.html</td></tr><tr><td>水果和蔬菜什锦干制零食</td><td>Bio-Serv</td><td>F7227</td><td>https://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Treats/FVM.html</td></tr><tr><td>白噪声发生器</td><td>HoMedics</td><td></td><td>https://www.amazon.com/HoMedics-SS-2000G-Relaxation-Machine-Nature/dp/B00A2JBMRE/ref=redir_mobile_desktop/134-&lt;br /&gt;0048439-0235364?_encoding=UTF8&amp;白噪声机&amp;amp;qid=1503569413&lt;br /&amp;>&amp;amp;ref_=mp_s_a_1_6_a_it&amp;amp;sr=8-6</td></tr><tr><td>Safari 柔软鬃毛猫用梳</td><td>Safari</td><td></td><td>https://www.amazon.com/Safari-Soft-Bristle-Brush-Cats/dp/B0002RJMB4</td></tr><tr><td>Crink-l'Nest</td><td>安德森实验室垫料</td><td>CNK</td><td>http://www.andersonslabbedding.com/irradiated/crink-lnest/</td></tr><tr><td>曼萨尼塔木啃咬棒</td><td>Bio-Serv</td><td>W0016</td><td>http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/W0016.html</td></tr><tr><td>经认证的木制啃咬块</td><td>Bio-Serv</td><td>K3511</td><td>Small&lt;br/&gt; http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/Wood_Blocks.html</td></tr><tr><td>纸袋</td><td>杜罗</td><td></td><td>自封袋&lt;br/&gt; https://www.amazon.com/Duro-Paper-Lunch-Brown-Count/dp/B01N0AS7QO/ref=sr_1_9?ie=UTF8&amp;amp;qid=1511194982&amp;amp;sr=8-9&lt;br /&amp;>&amp;纸袋</td></tr><tr><td>各种纸板来源</td><td>动物房回收的供应箱</td><td></td><td>所有纸板在使用前均需进行高压灭菌</td></tr></tbody></table>

通过行为谱、监测与干预实现新西兰白兔（oryctolagus cuniculus）配对及配对维持的方法

Methods of Pairing and Pair Maintenance of New Zealand White Rabbits (Oryctolagus Cuniculus) Via Behavioral Ethogram, Monitoring, and Interventions

新西兰白兔（NZW）实验兔（Oryctolagus cuniculus）及其祖先欧洲兔均为社会性物种，适宜的群养环境可为其带来多种益处。尽管这些兔子天生具有群居习性，但在圈养条件下仍可能出现某些行为问题，若不加以控制，可能干扰实验结果，甚至导致受伤，在极端情况下伤情可能较为严重。为避免这些问题，必须制定完善的配对饲养实验兔的监测与维护方案。本实验方案旨在介绍建立新配对新西兰白兔的有效操作流程，以及实现长期成功共养的管理方法。针对来自供应商的雌性实验兔，已测试多种配对方法，其中最有效的方法强调利用运输过程带来的应激性 bonding 效应、尿液标记行为、在中立笼具中进行配对（避免资源强制共享），并配合系统的监测与干预机制。为确定在标准笼具环境中饲养配对兔的最佳方式，研究人员收集数据以建立行为谱（ethogram）。各种行为被量化分类为积极、中性或消极行为，并在配对组合的整个共养周期中持续追踪，以识别预示配对成功或失败的关键行为指标。基于对群养新西兰白兔行为特征的新认识，研究人员实施了环境丰富化干预措施，以减轻攻击行为并防止受伤，从而显著提高了配对成功的比例。经过数年对不同配对方法的试验、行为谱的建立以及相应丰富化干预措施的优化，人们对支配配对饲养兔子行为的高度复杂社会结构有了显著深入的理解，进而能够提供更符合物种特性的照护方案，并提升动物福利标准。

在为期12个月的时间内，按照上述方案饲养了172对新西兰白兔（NZW）实验兔（雌性占62%，雄性占38%）。在这些配对中，仅有20%的雄性配对和1%的雌性配对因发生争斗而需要分笼饲养，如图所示。 图5分离出用于攻击行为研究的配对个体平均年龄为18.5周。大多数雌雄配对（63%）因与配对无关的研究目的而被分开，29%的配对仍保持在一起，仅有8%的配对因攻击行为而被迫分离。
在这172对中，稳定的配对关系可维持至成年后期，其中年龄最大的雄性配对在分离时为75周龄，年龄最大的雌性配对为92周龄。这两对动物均因研究需要而被分开，在共同生活的期间未出现任何伤口，并表现出充分的亲和行为。 arrival时即配对的无关雌性占雌性配对的21%，其余雌性配对及所有雄性配对均来自本单位转基因繁育群体，自断奶起即共同饲养。
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尽管欧洲兔是群居物种，但将其进行群养仍具有挑战性。因此，必须充分了解成对饲养的实验兔的行为特征和社会结构。本文介绍了一种用于识别配对方法、典型物种等级建立行为以及需要及时干预的行为的实验方案。

通过行为谱、监测与干预实现新西兰白兔（Oryctolagus cuniculus）配对及配对维持的方法

新西兰白兔（NZW）实验兔（Oryctolagus cuniculus）及其祖先欧洲兔均为具有社会性行为的物种，表现出……

本实验的总体目标是提供一种有效的方法，用于建立新配对的新西兰白兔，并提供相应的行为谱及成功维持配对的策略。该方法有助于通过明确定义配对实验兔的特征性行为及其行为含义，解答兔类社会饲养领域中的关键问题。该技术的主要优势包括在笼养条件下成功实现雌性实验兔配对的方法，以及有效维持雌性和雄性兔配对的策略。通常，初次接触该方法的人会感到困难，因为我们本能地倾向于立即分开发生攻击性行为的动物。然而，一些非伤害性争斗行为对于兔子成功建立其优势等级是必要的。如果我们干预过快，就会扰乱这一过程，从而可能延迟甚至阻碍成功配对的形成。该方法的可视化演示至关重要，因为在配对及维持配对过程中观察到的行为若无直接观察则难以掌握，且这些行为可能被误认为是打斗行为，而实际上属于正常的社交沟通方式。当来自供应商的新西兰白兔未经过配对时，应采用以下方案进行配对。首先，采集雄性兔子的新鲜尿液。将笼具下方的垫料翻转，使塑料面朝上，尿液聚集在垫料表面。随后用注射器吸取尿液，储存于无菌锥形管中。接着，准备一个干净且无中心隔板的中性笼具。至少包含两种低价值的环境丰富物品，例如玩具或咀嚼棒，并包含两种高价值的可破坏性环境丰富物品。至少提供两个藏身处，例如栖木、小屋或箱子，重要的是，食物和水源需设有两个独立的取用点，同时设置两堆散放的干草。现在，将第一只雌性动物从运输容器中取出，称重并修剪其指甲。然后，如有需要，使用蓝色或紫色无毒、对动物安全的墨水在兔子耳尖处做标记，以进行个体识别。接着，用纱布垫或棉球将约1毫升的雄兔尿液涂抹于兔子的前额，并将其放入中性笼中。随后，以相同方式准备另一只雌性兔子，但不做耳标标记，并将其放入同一笼中。现在，持续观察该对兔子至少一小时，同时填写兔子社交引入记录表。在每个时间点记录所观察到的每种行为。当出现啃咬或打斗行为时，使用喷雾瓶喷水进行干预。如果两只兔子相互追逐超过15秒，也应使用喷雾瓶喷水干预，但若其中一只兔子正在逃跑，则无需干预，因为这是正常行为。如果需要干预，则暂时将两只兔子分开，并检查各自是否有伤口。如果眼睛、生殖器附近有损伤，或存在任何正在出血的伤口，则不应重新合笼，并应立即通知兽医人员。如果在观察一小时后配对动物状态稳定，则当天晚些时候再进行两次各10分钟的观察。如果配对动物仍表现出攻击性行为，需继续监测一小时并重新评估。如果该配对需要多次干预且持续发生攻击行为，应加强监测与干预，并密切观察是否出现任何伤情。如果该配对在两次10分钟的检查期间均保持稳定，则让它们过夜同笼饲养。次日早晨，对每只兔子进行体格检查，重点检查生殖器周围是否有伤口。若未观察到受伤情况，则在本周剩余时间内每天进行10分钟的检查。若该配对能够维持一周无冲突，则可视为配对稳定。如果配对小鼠出现文中所述的特定类型伤口，或在连续一至两周内不断出现新的轻微损伤而无法在夜间持续共处，则视为配对失败。也可采用相同方法建立其他类型的配对，包括断奶时的雌性同胞配对、断奶后一周内的雌性非同胞配对、断奶幼鼠与其母鼠的配对、断奶时的雄性同胞配对，或从供应商处购入的已预先配对成对的成年小鼠。对于这些类型的配对，仅需进行一次五分钟的快速观察，即可确认配对是否相容。在填写群养动物互动与丰富化记录时，需要熟悉多种行为表现。其中一些亲和行为以及其他行为是配对成功的积极指标。明确形成优势与顺从关系的个体属于亲和行为。这些行为包括一只兔子追逐、骑跨、用下巴标记或跺脚，而另一只兔子则顺从地接受这些行为。共享资源（如食物、水和干草）是配对关系稳定的积极指标。另一种积极行为是异体理毛，即一只兔子为另一只兔子理毛。如果顺从兔为优势兔理毛，这并不表示配对关系破裂。观察到兔子进行自我理毛也是积极的表现，说明该兔子在共处的环境中感到安全。如果两只兔子共享空间或选择处于同一位置，这也属于积极行为。另一种积极行为是兔子单独与环境丰富化物品互动，或者两只兔子以非攻击性、非竞争性的方式共同与环境丰富化物品互动。在进行观察时需注意，若未观察到任何互动行为，则视为中性结果。这本身并不表示不相容，但如果兔子持续忽视彼此，可能表明尚未建立支配等级，存在发生负面行为的较高风险。负面行为包括打斗或无法建立支配等级。打斗行为的定义是两只动物同时表现出负面行为，例如两只兔子相互绕行或追逐对方。这些争斗发生后，由兽医人员对兔子进行了检查，未观察到任何外伤。需密切观察兔子是否有啃咬、受伤、转圈、资源守护或猛冲等行为。一旦发现上述任何行为，应立即使用喷雾瓶喷水进行干预，以分散兔子的注意力，使其停止该行为。通常，兔子会分开站在笼子的两侧，以梳理掉皮毛上的水分。如果水分未能使其停止负面行为，则需戴上一副厚手套，手动将它们分开。兔子之间有多种自然方式用于相互传达其支配等级关系。观察到这些行为时，应将配对动物置于加强监测状态，并通过提供高价值的环境丰富物品进行干预。在建立优势关系的配对动物中，追逐和逃跑行为非常常见，此类行为无需干预。尿液喷洒最常出现在配对的成年雄性动物中，但在配对的雌性动物中也可能出现。尿液可能会喷洒在笼子上或顺从的兔子身上。两只兔子的毛发上以及笼子上均可观察到尿液染色痕迹。该配对由两只成年雄性兔子组成，年龄均为1.6岁，已形成稳定且明确的优势等级关系。通常可观察到这对小鼠表现出骑跨、尿液标记、理毛、追逐与逃跑行为、异体理毛，以及共同躺卧。尿液标记行为受到密切且持续的监测，两只雄性小鼠均未因此出现皮肤刺激或病变。骑跨是一种非常典型的支配行为表现，由优势个体对顺从个体实施骑跨，而顺从个体接受该行为。啃毛现象，即笼内同伴过度理毛导致的脱毛，通常首先出现在鼻子、耳间或颈背部。应监测该现象，以确保其不会发展为皮肤损伤。该兔子面部可见啃毛现象，目前正处于持续监测中，但尚未因啃毛而出现任何皮肤损伤。拍打行为出于多种社会交流目的，其中之一是展示支配地位。但当拍打行为伴随逃跑时，也可能是一种屈服的信号。在为期12个月的时间内，共观察了344只新西兰白兔（其中62%为雌性），其配对方式如前所述。在这些配对中，仅有8%因攻击行为而被分笼饲养。被分笼的配对平均年龄为18.5周，仅有两只兔子的伤情影响了其后续研究的可用性。出于研究目的，在分笼时，年龄最大的雄性配对为75周龄，年龄最大的雌性配对为92周龄。两对兔子均未受伤，且都表现出亲和行为。观看本视频后，您应能充分了解如何建立新的兔子配对关系、需要监测哪些行为以维持配对成功，以及如何恰当地干预以帮助配对维持健康的支配等级关系。群养对兔子的福利具有显著益处。与所有群养动物一样，可能存在受伤情况，因此所有配对活动均应由经过培训的人员在兽医密切监督下进行观察。任何损伤均应立即向兽医人员报告。

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