猪生物医学模型生物库组织样品的取样策略与处理

在生物库项目的下游分析中, 展示了猪动物模型代表性组织样本生成方法的实际应用和性能, 包括容量、系统随机抽样、组织样品的鉴别处理, 用于定性和定量的形态学和分子分析类型。

本视频演示了对生物样本库猪组织标本进行采样和处理的两种关键技术。浸没技术可靠地估计器官和组织的总体积，定向器技术生成随机各向同性组织切片，用于定量形态学参数的无偏估计。浸没技术用于组织密度测定的主要优点是它可以应用于任何类型的组织，并且对于小样品和大样品，它都能产生可靠的结果。

定向器技术的优点是效率高，也适用于大组织样品。要开始对大器官进行体积测定，请从器官中切除一块适当大小的组织。用纸巾小心擦拭样本，以去除多余的血液和组织液。

然后在精密秤上称量样品并记录样品的重量。将 0.9% 盐水加入合适大小的烧杯中。不要完全装满烧杯，以防止组织浸入过程中溢出。

将烧杯放在秤上，然后将镊子或自制的样品架浸入盐水中，直到镊子或样品架上的标记到达液体。接下来，将刻度的显示重置为零。小心地将组织样品连接到镊子或样品架上，并将样品完全浸入盐水中，直到到达标记位置。

为了记录可靠的密度测量值，重要的是要确保样品完全浸没，并避免浸没的样品与烧杯的内壁或底部接触。将样品固定到位，记录秤上显示的重量。使用此测量值和室温下的盐水密度来计算样品的体积。

然后根据样品的重量及其体积计算组织样品的密度。对于大型器官和组织，例如这个肾脏，使用多个样品进行重复测量，并根据单次测量计算平均密度。对于小样本和总共测量的小器官，例如垂体，在根据单个测量值计算平均器官密度之前，重复测量 3 次。

最后，根据器官、组织或器官隔室的重量和密度计算其总体积。将固定的组织标本放在等角圆的打印件上，其中一条边平行于 0 到 180 度方向。然后使用随机数表来确定随机角度。

在等角圆的刻度上找到相应的标记。使用这些标记，在样品上切出一个截面，截面平面的方向平行于等角圆刻度上指示的随机角方向，并垂直于样品的静止表面。将组织块的截面表面朝下放在余弦加权圆上。

使静止表面的边缘平行于一对一方向放置。现在，使用随机数表确定的随机角度在样品上切下一部分。生成的剖面是各向同性的均匀随机剖面。

下表显示了使用浸没技术测定的几种猪组织和器官的代表性密度。大多数猪组织显示的密度值略高于代表水密度的密度值。而在盐水中游泳的组织，例如脂肪组织，显示的密度低于 1。

该图显示了使用定向器技术制备的猪左心室心肌的四个代表性 IUR 切片。请注意不同 IUR 部分中更改的切割角度。一旦掌握，用于组织密度测定的浸没技术就可以在几分钟内完成。

如果执行得当。使用定向器技术生成的各向同性均匀随机组织切片适用于使用适当的立体分析方法估计任何定量形态参数。数字音乐。