小肠部分梗阻的小鼠模型

该外科手术的总体目标是在小鼠中可靠且一致地产生肠梗阻，从而促进研究因梗阻而发生的胃肠道组织的分子和表型变化。这种方法可以帮助回答胃肠道领域中围绕肠梗阻导致表型变化的细胞机制的关键问题。这种技术的主要优点是可靠、可复制且具有成本效益。

该技术的含义延伸到肠梗阻的治疗，因为它们模拟了在肠梗阻引起的人类病理中观察到的表型条件。演示该程序的博士后 Se Eun Ha 和研究生 Lai Wei 都来自我们实验室。在确认对脚趾捏没有反应后，将药膏涂抹在动物的眼睛上，然后将鼠标放在加热垫上。

用脱毛膏去除腹部的毛发，并用 70% 乙醇清洁裸露的皮肤。用聚维酮碘溶液对手术部位进行消毒，并用 25 x 50 厘米的无菌纸覆盖动物，手术区域的开口为 2.5 x 2.5 厘米。用无菌条将窗帘固定在开口和皮肤的边界处，并使用 15 号手术刀刀片做一个 3 厘米的纵向皮肤切口。

使用镊子和手术剪刀，小心地将皮肤与肌肉腹膜层分开，不要切开组织并找到白线。然后用微型镊子和剪刀沿白线切开两厘米，露出腹膜腔，小心定位盲肠。使用微型镊子缓慢而轻柔地将盲肠、近端结肠和回肠从腹膜腔内移动到无菌窗帘上，并立即用 0.9% 无菌盐水浸泡的纱布润湿肠道组织。

找到回肠和近端结肠之间的肠系膜，并在肠系膜上做一个 1 厘米的切口，平行于回肠并在回肠正下方，注意避免切断任何脉管系统。纵向切割以打开肠系膜血管，并使用微镊子打开适当大小的高压灭菌灭菌硅胶环。将环的一端穿过切口，使环的一端与第一端接触，使器械恢复原状。

确认环完全围绕回肠，并用缝合线闭合环。肠系膜上的切口应足够大，以便环能够安装，但又要足够小，以免切开血管。还要确保将环放在回肠上，而不是结肠上。

小心地将肠道恢复到原来的解剖位置，并使用可吸收缝合线进行简单的连续缝合，以闭合沿白线的肌肉腹膜层。用 0.9% 无菌盐水浸泡的纱布清洁任何出血，并使用新的尼龙缝合线和简单的连续缝合来闭合皮肤。然后用聚维酮碘对伤口部位进行消毒并注射抗生素，然后将动物放在有监测的保温门中，直到完全卧位。

在该实验中，与对照假手术动物相比，小肠在部分梗阻手术后 8 天部分充盈和膨胀，在部分梗阻手术后 13 天完全充盈和膨胀。此外，与对照动物相比，部分阻塞手术后小鼠第 8 天和第 13 天结肠中的粪便颗粒形成减少。环上游回肠的平滑肌层在部分梗阻手术后 8 天肥大，并在第 13 天观察到进一步肥大。

通过免疫化学分析评估，在部分梗阻手术后 8 天和 13 天，平滑肌细胞在所有三层组织中以逐渐快速的速度生长，而 Cajal 的间质细胞在肌内层和肌间层内退化。血小板衍生生长因子受体 α 阳性细胞亚群，也称为 PDGFR α 细胞，在部分阻塞小鼠的肌间层内动态重塑，在手术后 8 天观察到生长，到第 13 天已经退化。此外，在术后第 8 天和第 13 天，部分梗阻小鼠的肌间和肌内区域神经元细胞也显著丢失。

一旦掌握，这项技术应在 30 分钟内完成，以确保鼠标的生存。在尝试此程序时，快速而精细地处理组织很重要。在此程序之后，可以进行其他方法，如胃肠道趋势测试，以回答有关阻塞如何改变肠道蠕动的其他问题。

该技术发展后，为胃肠道研究领域的研究人员探索小鼠肠梗阻的后果铺平了道路。看完这个视频后，您应该对如何快速正确地在小鼠回肠周围放置一个环以产生肠道部分梗阻有一个很好的了解。不要忘记，使用手术工具和针头可能非常危险，因此请采取适当的预防措施。

此外，在执行此程序时，请务必戴上无菌手套并练习无菌技术。