小鼠活动性厌食症的评估

本实验的总体目标是检查神经性厌食症的神经生物学和行为。这种方法可以帮助回答精神病学领域与饮食失调相关的关键问题，例如神经性厌食症的神经基础是什么，以及涉及哪些大脑回路。这项技术的主要优点是它可以用来研究厌食症的一些潜在机制，这些机制无法在人类中进行评估。

通过选择靠近笔记本电脑和轮毂的笼式机架来设置实验区域。这将限制数据传输问题。现在激活轮毂和软件之间的连接。

首先打开车轮管理软件以确保两个无线集线器都处于活动状态。从软件中重置默认 wheel 连接。打开工具，然后选择 delete wheels。

重复此步骤五次，然后关闭软件并重新打开。接下来，为车轮提供动力。将电池组电线连接到车轮硬件，然后将电池插入车轮底座。

然后看看软件。轴距应在相应的无线集线器下列出 ID 为 1。如果没有，请解开电池组，删除软件中的轮子，然后重试。

如果识别出轮子，则用相应动物的 ID 替换 ID。接下来，用胶带将跑轮的底座粘在笼子的底部，以确保稳定性。不要让任何胶带伸出，因为老鼠会咀嚼裸露的胶带。接下来，在底座上放置一个没有腐蚀磁性的跑轮盘，然后旋转轮子以验证与笼壁和格栅的间隙。

旋转光盘并检查每转是否在软件中正确注册。接下来，使用胶带将食物罐固定在笼子上。将其放置在远离跑轮和水瓶的位置。

然后将两块食物放入罐子中，将装满水的瓶子连接到笼子上，并在笼底添加垫料。以这种方式准备好所有笼子后，将小鼠单独放入适当的笼子中。一旦所有小鼠都进入笼子，转到软件并单击文件，然后开始采集。

在整个实验过程中，开始新的收购以打破试验阶段。现在让老鼠适应整整两天的住房条件。在此阶段，确定每只小鼠是否足够健康以处理 ABA 实验。

在实验的第三天，量出大约 9 克食物，并将重量记录为 1/1000 克。接下来，小心地将鼠标从笼子中取出，并在一个大塑料烧杯中称量，精确到十分之一克。以对鼠标的最小压力执行此作。

将老鼠从笼子里出来，找出并取出笼子里的所有食物。除了取出罐子里的食物外，还要翻找床上用品里散落的食物。接下来，如果需要，用 70% 异丙醇和纸巾清洁跑轮。

在将鼠标放回笼子之前，请确保异丙醇已经干燥。然后将鼠标和 9 克食物装入笼子中。第二天，在最后一次访问后的 10 分钟内返回动物设施。

再次将 9 克食物装入一个小塑料烧杯中，并记录准确的重量。再次轻轻地取下鼠标并称重，对鼠标的压力最小。现在从笼子里取出食物罐并进行调查。

用镊子清除所有粪便，并在烧杯上使用过滤器去除垫料。将较大的食物块捣碎，使它们通过过滤器，只留下过滤器中的垫料。然后在笼子垫料中寻找食物残渣并将它们添加到烧杯中。

然后记录笼子里残留的食物的质量。接下来，将罐子擦干净，然后空空放回笼子里。如有必要，请贴上新胶带。

然后将准备好的 9 克口粮装入罐子。像以前一样，清洁所有脏的跑轮并将它们放回笼子中。每天以这种方式重置所有笼子。

在第 5 天、第 7 天和第 9 天，重新启动 wheel running 程序中的计算机数据采集。收集基线数据后，在第 11 天重新启动数据采集并开始限制阶段。基本上，遵循基线协议，进行一些更改。

首先，更换食物时不要清理行走轮。其次，将动物获得 9 克食物的口粮限制在仅 6 小时。喂食期可以是昼夜或夜间。

这两种选择都有其优点。6 小时后，称量罐子和笼子中剩余的食物。此时，如果需要，请清洁车轮，但要尽快清洁，以便可以快速处理下一个笼子。

在限制阶段的每一天，重复此过程。现在监测动物的体重减轻变得非常重要。如果小鼠下降到其基线体重的 75%，请将其从实验中删除。

从笼子地板为这些老鼠提供无限量的食物，并且无法使用跑轮。评估完所有笼子后，对掉落的小鼠实施安乐死，除非要研究它们的恢复情况。使用所描述的实验，评估了一组基于活动的厌食症小鼠以及 3 个对照组。

按照所描述的程序，食物被限制在六个昼夜小时。当一只小鼠由于体重过度减轻而退出研究时，随机选择的对照小鼠也是如此。接受预定喂养的两组在第 1 天到第 5 天体重均有所减轻，这与食物摄入量减少在逻辑上相关。

奇怪的是，体重减轻对车轮跑步活动没有影响。行为研究后，收获大脑并冷冻用于生化分析。对腹侧被盖区组织的一项分析表明，车轮行驶显着增加了 BDNF 表达，而食物限制增加了 NCAM1 MRNA 表达，但没有改变 BDNF mRNA 表达。

在尝试此程序时，重要的是要记住限制小鼠的压力，保持一致测量时间，耐心以获得准确的读数，并始终检查车轮运行软件是否有任何技术问题。按照这个程序，可以在小鼠大脑上进行其他方法，如免疫组织化学和放射配体结合，以回答与厌食症范式中病毒功能有关的其他问题。